Trabalho sobre o artigo candida Parasitologia

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FACULDADE CAPIXA BA DE NOVA VENÉCIA MULTIVIX 
 
 
 
 
RESENHA DO ARTIGO 
 
 
 
 
 
 
 
DAIANE SANTOS, ELLEN CRISTINA SANTOS, ITHALLY 
ROCHA,WALKYRIA WASTH, YASMIN BISSOLI 
4 º Período de Farmácia 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
NOVA VENÉCIA – ES 
2021 
Fluconazol e intraconazol no tratamento da C. Albicans estudo in vitro 
Latin American Journal of Development, Curitiba, v. 3, n. 5, p. 3172-3186, sep./oct. 
2021. ISSN 2674-9297 
O artigo Atividade in vitro de fluconazol e itraconazol em biofilmes de Candida 
albicans, foi escrito por, Fernando Yano Abrão, Núbia Pontes Pereira, Laís 
Carneiro Naziasene Lima Marreto, Daniel Teles Zatta, Jacqueline Campos Borba 
de Carvalho, Pedro Henrique Hasimoto e Souza e Lúcia Kioko Hasimoto e Souza. 
 Neste artigo vimos que a Candita é um fungo que é encontrada na microbiota 
do trato genitounário e gastrointestinal do homem. Quando ocorre alterações na 
barreira teciduais causa um desequilíbrio o que possibilita a entrada do 
microrganismo no tecido originando a infecção chamada candidíase que é 
intitulada a terceira causa de infecção nosocomial do mundo sendo Cândida 
Albicans a mais frequente. O número de pacientes com hospedeiros suscetíveis 
vem crescendo, o uso contínuo de antibióticos de amplo espectro e dispositivos 
implantados tem ajudado o aumento e a predominância da infecção. O biofilme 
de Calbicans é simplesmente a adesão a um material em conjunto a 
desenvolvimento de uma barreira de células confluentes que é responsável pela 
liberação da matriz extracelular estável. 
 As infecções no biofilme são de difícil tratamento pois sua estrutura mostra 
resistência tanto ao antimicrobiano quanto ao mecanismo de defesa do 
hospedeiro. O fluconazol e o intraconal tem como mecanismo a inibição da 
biossíntese onde uma hipótese é levantada com a resistência do biofilme que é a 
matriz extracelular que impede a sua difusão para o interior da estrutura deixando 
apenas a camada superficial do biofilme com uma dose letal. 
 O objetivo do artigo foi avaliar a cinética do desenvolvimento dos biofilmes de 
diferentes Candida albicans e estabelecer a inibição mínima do fluconazol e 
itraconazol. Utilizaram a C. parapsilosis ATCC 22019 e C. albicans ATCC 28367 
no controle para avaliarem as cepas de 10 isolados de C. albicans de diversas 
fontes diferentes como o sangue (S157, S211), unha (U02, U15), cateter (C180, 
C140) e mucosas bucal (M02, M36) e vaginal (V58, V60). 
 A suscetibilidade antifúngica in vitro para células planquitônicas obtiveram as 
leveduras através de teste de suscetibilidade por meio da técnica de micro diluição 
em caldo conforme o protocolo M27-A3 do Clínica Laboratory Standard Instiyute 
(CLSI 2008), onde determinaram o CIM. Avaliaram agentes antifúngicos sendo 
eles o itraconazol (Johnson e Johnson) e fluconazol (Pfizer). 
 Usaram a Candida parapsilosis ATCC 22019 para o controle dos isolados 
junto com o inoculo em cada placa que componha o antifúngico diluído. Os 
resultados foram realizados observando o crescimento de leveduras onde a CIM 
foi definida como a menor concentração apto no crescimento do isolado da C. 
albicans. A obtenção dos biofilmes de Candida foi realizada utilizando placas de 
micro titulação de poliestireno, segundo metodologia descrita por Hawser e 
Douglas (1994) e Pierce et al. (2008), com modificações. Para o preparo do 
inoculo, células de Candida provenientes de culturas em ASD (48 h) foram 
inoculadas em líquido YPD (extrato de levedura peptonado dextrosado) e 
incubadas “overnight” em agitador orbital a 30°C. 
 As células foram então centrifugadas a 3.000 g por 5 minutos, o 
sobrenadante desprezado e o sedimento foi ressupenso em 10 mL de PBS estéril 
gelado, através de vigorosa agitação em vórtex, seguida de nova centrifugação. 
Ao precipitado final foi adicionado aproximadamente 2 ml de meio RPMI pré-
aquecido a 37°C e foram realizadas diluições para ajustar a 85% transmitância a 
530 nm (1,0 x 106 células/ml). Para a formação do biofilme, 100 μL deste inoculo 
foi adicionado aos orifícios da placa de micro titulação. O MTT foi utilizado como 
uma solução de 0,5g/L em PBS, para cada 10mL foi adicionado 1 μL de solução 
de menadiona (10 m acetona). Um volume de 100 μL de MTT-menadiona foi então 
adicionado a cada orifício contendo o biofilme pré-lavado e aos orifícios controle 
(sem biofilme). As placas foram então incubadas no escuro por 150 minutos a 
37°C e após, o conteúdo dos orifícios foram descartados e adicionou-se em cada, 
100 L de dimetilsulfóxido (DMSO), em agitação por 15 min, para a solubilização 
dos cristais formazan. 
 A solução final de cada orifício foi transferida para novas placas e a presença 
de coloração foi medida a 550 mm em leitora de placas de ELISA (Behring). Os 
valores de DO dos biofilmes formados individualmente, em quadruplicada, nos 
diferentes intervalos de tempo (24 h, 48 h, 72 h e 96 h) foram comparados pelo 
teste ANOVA e pós-teste Tukey. Foi considerada diferença estatisticamente 
significativa quando P< 0,05. 
 A análise foi feita com o programa SigmaStat versão 2.03 para Windows. Os 
testes de suscetibilidade antifúngica dos biofilmes foram realizados segundo 
Pierce et al (2008). As concentrações dos antifúngicos avaliadas foram de 0,031 
a 16 μg/mL para itraconazol e de 1 a 1.024 μg/mL para fluconazol. Aos biofilmes 
formados (48 h) foram adicionados 100 μL de 3178 Latin American Jornal of 
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cada concentração do antifúngico e incubados por 48 h a 37°C. Os testes foram 
realizados em duplicata, sendo realizados concomitantemente controles de 
crescimento e esterilidade do meio. As CIMS dos antifúngicos para os biofilmes 
foram definidas como as menores concentrações capazes de produzir reduções 
na DO igual a 50% (CIMS50) e a 80% (CIMS80), em comparação ao controle de 
crescimento (sem antifúngico). 
Por outro lado, para os demais isolados avaliados, os valores de DO obtidos no 
intervalo de 48 h apresentaram diferença estatisticamente significativa, quando 
comparados com os obtidos nos demais intervalos de tempo (P < 0,05). 
 
 
 
 A técnica de micro diluição em caldo permitiu obter valores de CIM para 
células planctônicas de C. Estudo da cinética de formação dos biofilmes dos 
diferentes isolados de Cândida mostrou que todos os isolados foram capazes de 
produzir biofilme (DO ≥ 0,200) e que a atividade metabólica das células sésseis 
aumentou nas primeiras 48 h de incubação. A leitura dos isolados M02, U02 e 
V60 mostrou que as atividades metabólicas destes se destacaram em relação aos 
demais analisados, apresentando valores de DO > 1,237 com 48 h de incubação. 
 
 
 
 A avaliação da atividade in vitro dos antifúngicos fluconazol e itraconazol 
sobre biofilmes de Calbicans mostrou que para o fluconazol os valores obtidos 
para CIMS50 variaram de 8 µg/ml a > 1.024 µg/ml e para CIMS80 ≥ 1.024 µg/ml. 
Estes dados revelaram um aumento da CIMS50 e CIMS80 de fluconazol para os 
biofilmes, em comparação aos valores obtidos para células planquitônicas. Em 
relação ao itraconazol, os biofilmes formados pela maioria dos isolados 
apresentaram CIM50 eCIM80 ≥ 16 µg/ml, resultados 40 vezes maiores do que o 
valor médio obtido para CIMP, que foi de 0,39 µg/ml. Entretanto uma redução de 
50% da atividade metabólica pode ser percebida nos biofilmes dos isolados V58 
e C. 
 As dos isolados de C. albicans que foram submetidos a testes, não 
apresentaram resistência aí itraconazol e ao fluconazol. Apenas um dos isolados 
apresentou resistência ao itraconazol. Os valores obtidos nos testes mostram a 
eficácia do fluconazol no tratamento da cândida. No estudo da cinética de 
formação a maioria dos biofilmes apresenta um aumento de crescimento em até 
48 horas depois ocorre um decréscimo. Nesse trabalhotodos os isolados mostram 
capacidade de criar o biofilme, sendo que todos foram observados em cada fase 
de formação. A técnica de micro diluição que foi utilizada é a mais adequada para 
avaliar se o fármaco é capaz de inibir o crescimento do fungo, sendo que em caso 
de resistência, ajuda a evitar uma terapia inadequada. O teste de suscetibilidade 
fúngica, foi realizada sobre um biofilme de 48 horas de crescimento, quando eles 
apresentam maior atividade metabólica. O itraconazol não apresentou boa ação 
nós biofilmes isolados. 
 A dificuldade de tratamento de pacientes que passaram por procedimentos 
invasivos, pode se relacionar então, ao aumento de resistência de C. albicans na 
forma de biofilme, que foi confirmado com esse estudo. 
 Esse artigo faz uma abordagem bem ampla sobre os estudos in vitro onde os 
autores foram fiéis nas técnicas e precisos nos resultados, além do estudo 
minucioso da doença. Além do uso dos reagentes certos e o tempo preciso de 
cada procedimento. 
 Essa resenha teve o propósito de analisar o artigo “Atividade in vitro de 
fluconazol e itraconazol em biofilmes de Candida albicans”. Vimos a necessidade 
da criação de mais fármacos antifúngicos capazes de agir sobre o biofilme e 
pesquisar mais biomateriais para a montagem de equipamentos médicos 
invasivos que tenham como objetivo evitar a adesão inicial de levedura. 
https://latinamericanpublicacoes.com.br/ojs/index.php/jdev/article/view/784 
ABRAO, F. Y. .; PEREIRA, N. P. .; MARRETO, L. C. N. L. .; ZATTA, D. T. .; DE 
CARVALHO, J. C. B. .; E SOUZA, P. H. H. . Atividade in vitro de fluconazol e 
itraconazol em biofilmes de Candida albicans: In vitro activity of fluconazole and 
itraconazole on candida albicans biofilms candida albicans. Latin American 
Journal of Development, [S. l.], v. 3, n. 5, p. 3172–3186, 2021. DOI: 
10.46814/lajdv3n5-036. Disponível em: 
https://latinamericanpublicacoes.com.br/ojs/index.php/jdev/article/view/784. 
Acesso em: 19 nov. 2021. 
 
 
https://latinamericanpublicacoes.com.br/ojs/index.php/jdev/article/view/784
	Latin American Journal of Development, Curitiba, v. 3, n. 5, p. 3172-3186, sep./oct. 2021. ISSN 2674-9297
	A técnica de micro diluição em caldo permitiu obter valores de CIM para células planctônicas de C. Estudo da cinética de formação dos biofilmes dos diferentes isolados de Cândida mostrou que todos os isolados foram capazes de produzir biofil...