POP PARASITOLOGIA COMPLETO

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CURSO DE GRADUAÇÃO BIOMEDICINA
Bruna Angélica Reizer Lemes
Nerys Wendy Antonieta Alfane
Paulo Henrique Britto Ebeling
Simone Silveira Bozio
PROJETO DE DIAGNÓSTICO
PARASITOLÓGICO DE FEZES E SANGUE
POP:
MÉTODOS QUALITATIVOS E
QUANTITATIVOS
Profª. Layse Fernanda Antonio de Souza
FOZ DO IGUAÇU
2021
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1. INTRODUÇÃO
O exame parasitológico de fezes (EPF) tem como objetivo diagnosticar os
parasitos intestinais do homem, através da pesquisa das diferentes formas
parasitárias que são eliminadas nas fezes.
Métodos Quantitativos
Os métodos quantitativos são aqueles nos quais se faz a contagem de ovos
nas fezes, permitindo, assim, avaliar a intensidade do parasitismo. São pouco
utilizados, pois a dose dos medicamentos antiparasitários não leva em conta a carga
parasitária e sim o peso corporal do paciente. Os mais conhecidos são o método de
Stoll - Hausheer e o método de Kato – Katz.
Métodos Qualitativos
Os métodos qualitativos são os mais utilizados, demostrando a presença das
formas parasitárias, sem, entretanto, quantifica-las. Muitas vezes o número de formas
parasitárias eliminadas com as fezes é pequeno, havendo necessidade de recorrer a
processos de enriquecimento para concentrá-las.
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MÉTODO PARASITOLÓGICO DE STOLL-HAUSHEER
1. Introdução
Stoll-Hausheer é um método quantitativo em solução de hidróxido de sódio 0,1N,
onde se avalia o grau de intensidade do parasitismo através da contagem dos ovos dos
parasitas nas fezes.
Indicação: quantificação de ovos de helmintos em particular os ovos de casca fina
cuja quantificação pelo Método de Kato-Katz pode ser comprometida. Contudo, se presta a
quantificação de ovos de várias espécies. Em algumas infecções helmínticas, a partir da
quantificação podemos inferir a carga parasitária, e, por conseguinte, a espoliação sofrida
pelo paciente.
2. Materiais e Equipamentos
- Frasco tipo Erlenmeyer (frasco de Stoll) que traz duas marcações de gargalo, uma
indicando o volume de 56 ml e outra o de 60 ml ou;
- Proveta graduada de 100 ml, com rolha;
- Pérolas de vidro;
- Lâmina;
- Lamínula (22 por 40mm);
- Pipeta;
- Microscópio.
3. Reagentes
- Hidróxido de sódio;
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4. Procedimentos
- Preencher o frasco com hidróxido de sódio até a marca inferior, isto é, até 56 ml;
- Colocar as fezes até que o conteúdo do frasco alcance a marca superior (60 ml);
- Introduzir no frasco de Stoll uma dezena de pérolas de vidro, arrolhar bem e agitar
vigorosamente;
- Deixar agir o hidróxido de sódio durante uma hora ou mais, para clarificar a preparação, e
tornar a agitar fortemente. Obtém-se, deste modo, uma suspensão homogênea, onde a
diluição da amostra fecal é de 1 para 15;
- Imediatamente após a agitação, pipetar 0,15 ml da suspensão, colocá-la sobre uma
lâmina, cobri-la com lamínula (22 por 40mm) e levar a preparação ao microscópio para
contagem;
- Percorrer toda a área da lâmina, contando o número de ovos de determinada espécie aí
existente;
Para que a contagem seja correta, é importante que nenhuma parte do campo fique sem
exame e que não se passe duas vezes pela mesma região da lâmina. Proceder sempre da
seguinte forma:
- Com aumento pequeno ou médio, focalizar um dos ângulos da lamínula (o anterior
esquerdo, por exemplo);
- Deslocar a preparação sempre no mesmo sentido, procedendo à contagem, até alcançar o
canto oposto (anterior direito);
- Aí chegando, deslocar a preparação para a frente, de tal modo que o novo campo
microscópico seja tangente ao anterior (ou que partículas que apareciam no extremo inferior
do campo passem a ser vistas no extremo superior);
- Deslocar agora a lâmina em direção à margem esquerda e assim sucessivamente.
O número de ovos contados deve ser multiplicado por 100 para que se tenha a média por
mililitro ou por grama de fezes.
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- Se, em lugar de 0,15 ml, forem pipetados 0,075 ml da mesma diluição da amostra, para a
lâmina, o resultado da contagem deverá ser multiplicado por 200.
- Convém lembrar que o número de ovos por grama de fezes varia com o grau de
hidratação do material evacuado pelo paciente. Assim, para uma mesma carga parasitária,
as fezes pastosas conterão aproximadamente metade do número de ovos por grama
daquele encontrado nas fezes formadas; as fezes líquidas, cerca de um quarto desse
número. Isto é, bem entendido, supondo-se que o peso seco da massa fecal eliminada pelo
paciente, em um dia, seja sempre o mesmo. Considerando resultado positivo através da
porcentagem de carga parasitária encontrada na lâmina.
5. EPI’s e EPC's que devem ser utilizados durante a análise
- Jaleco;
- Máscara;
- Luva de procedimento.
6. Interpretação com imagens
O frasco é preenchido até a marca de 56 ml de hidróxido de sódio;
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Com o aplicador uma pequena quantidade de fezes é adicionada até que o hidróxido
de sódio seja elevado para 60 ml;
Em seguida, são adicionadas 10 pérolas de vidro, é feita a agitação até que se misture
tudo muito bem;
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Quando eles são completamente dissolvidos, o tubo é sacudido novamente por um
minuto e uma certa quantidade é retirada da amostra que é colocada sob a lâmina;
A lâmina com a amostra é colocada sob o microscópio onde portanto, é observada a
presença de ovos ou não.
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MÉTODO PARASITOLÓGICO DE KATO-KATZ
1. Introdução
O Kato-Katz é o método laboratorial adotado pelo Ministério da Saúde (MS) e pela
Organização Mundial da Saúde (OMS) como padrão-ouro para o diagnóstico da infecção
humana pelo Schistosoma mansoni, sendo uma ferramenta de relevância clínica e
epidemiológica, visto que permite classificar a carga parasitária do indivíduo infectado pelo
cálculo de ovos por grama de fezes (OPG). Essa classificação pode também ser utilizada
para estimar a intensidade da infecção nas comunidades, mensurar o impacto de medidas
de controle da doença bem como estabelecer parâmetros de qualidade para a leitura das
lâminas.
2. Equipamentos
- Microscópio.
3. Vidrarias e Materiais
- Tela;
- Lâmina;
- Palito;
- Lamínula de papel celofane.
4. Reagentes
- Solução de verde de malaquita a 3%. 1ml
5. EPI’s e EPC's que devem ser utilizados durante a análise
- Jaleco;
- Máscara;
- Luva de procedimento.
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6. Procedimentos experimentais (metodologia
- Depositar, sobre um pedaço de papel higiênico, a porção de fezes a ser examinada;
- Comprimir a parte superior da porção de fezes com uma tela, a qual só permite a
passagem dos ovos de helmintos e de detritos menores que eles;
- Retirar as fezes que passaram pela tela e transferir, com auxílio de um palito, um pouco
das mesmas para uma lâmina;
- Transferir-las para o orifício central do cartão de plástico o qual deve estar colocado sobre
a lâmina de vidro, nivelando a superfície com o palito;
- Depois deencher o orifício central, remover com cuidado o cartão, deixando as fezes
sobre a lâmina de vidro;
- Cobrir as fezes com a lamínula de papel celofane embebida em solução de verde de
malaquita, comprimindo a lâmina, após tê-la invertido, contra uma folha de papel higiênico;
- Aguardar cerca de uma a uma a duas horas e examinar ao microscópio contando os ovos
presentes na preparação;
- O número de ovos encontrados, na preparação fecal, multiplicado por 23, corresponderá
ao número de ovos por grama de fezes.
7. Interpretação
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Este método é indicado para pesquisa de ovos de Schistosoma mansoni, Ascaris
lumbricoides, Trischuris trichiura e Ancylostomidae. Cistos de protozoários não são visualizados
nessa preparação.
Não é possível a execução deste método em fezes diarréicas.
S. mansoni
A. lumbricoides
T. trichiura
Ancylostomidae
EXAME DIRETO Á FRESCO PARASITOLÓGICO DE FEZES
1. Introdução
O exame direto a fresco é um método indicado principalmente para a
pesquisa de trofozoítos de protozoários em fezes diarreicas recém emitidas (no
máximo 30 minutos após coleta).
Além da pesquisa de estruturas parasitárias, o exame microscópico do
material fecal deve assinalar a presença de possíveis elementos indicadores de
anormalidades intestinais.
2. Materiais
Salina;
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Lâminas de vidro;
Lamínula;
Palito;
Lugol;
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Microscópio;
3. Passo a passo
- Colocar duas a três gotas de salina a 0,85% em uma lâmina de vidro.
- Tocar com a ponta de um palito em vários pontos das fezes, transferindo uma
pequena porção para a lâmina de microscopia.
- Espalhar as fezes, fazendo um esfregaço e examinar ao microscópio. A espessura do
esfregaço não deve impedir a passagem de luz.
- Este método é indicado principalmente para a pesquisa de trofozoitos de protozoários
em fezes diarreicas recém emitidas; para a identificação de cistos de protozoários e
larvas de helmintos cora-se a preparação com Lugol.
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4. EPI’s e EPC’s que devem ser utilizados durante a analise
- Jaleco;
- Mascara;
- Luvas.
5. Conclusão
O exame direito a fresco é um dos métodos mais utilizados na rotina
laboratorial por ser simples, eficiente e de rápido diagnostico, sendo indicado para
pesquisa de trofozoitos de protozoários em fezes diarreicas ou recém emitidas.
6. Referências bibliográficas
NEVES.D.P. Livro: Parasitologia Humana. Décima edição. Cap. 56. PP 403.
REY. L. Livro: Parasitologia. Parasitos e Doenças parasitárias do homem nas
Américas e na África. 3º edição. Métodos e técnicas usuais em parasitologia.
P.787-796, 2001.
ARAÚJO, Ana; SILVA, Viviane; et al. Exame Parasitológico: Procedimento
Operacional Pradão – Universidade Federal da Paraíba, Paraíba, 2020.
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REVISTA DE BIOLOGIA E CIÊNCIAS DA TERRA. Sensibilidade de métodos
parasitológicos para o diagnóstico das enteroparasitoses. REV. VOL. 13. Nº 2.
2013. Disponível em
<http://joaootavio.com.br/bioterra/workspace/uploads/artigos/782-2983-1-pb-53df98
5535898.pdf> Acesso em 19 de outubro de 2021.
http://joaootavio.com.br/bioterra/workspace/uploads/artigos/782-2983-1-pb-53df985535898.pdf
http://joaootavio.com.br/bioterra/workspace/uploads/artigos/782-2983-1-pb-53df985535898.pdf