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CARACTERÍSTICAS MORFOLOGICAS DOS PROTOZOÁRIOS Profa. Rúbia Suely Santana Costa Protozoários • Possuem mais de 60.000 espécies • Os protozoários englobam todos os organismos protistas, eucariotas • Unicelulares, sem diferenciação de tecidos • Realizam todas as funções para sua sobrevivência a partir de uma única células: - Alimentação - Respiração - Reprodução - Excreção e locomoção Organelas presentes em protozoários e suas funções • Núcleo – revestido por membrana nuclear • Aparelho de Golgi – síntese de carboidratos e condensação da secreção proteica • Retículo endoplasmático – liso: síntese de esteroides e Rugoso: síntese de proteínas • Mitocôndria – produção de energia • Cinetoplasto – uma mitocôndria especializada rica em DNA • Microtúbulos – formação de citoesqueleto; movimentos celulares ( contração e distenção) e composição de cílios e flagelos. Organelas presentes em protozoários e suas funções • Flagelos, cílios e pseudópodes – locomoção • Corpo basal – base e inserção de cílios e flagelos • Axonema – eixo dos flagelos • cistóstoma – permite ingestão de partículas Morfologia • Esféricas, ovais ou alongadas • Cistos – Ex: Entamoebas • Trofozoítos – Ex: Entamoebas • Gametas - Ex: filo Apicomplexa • Oocistos - Ex: Coccidia Qual o nome desta morfologia ? Entamoeba histolytica Trofozoíto Qual o nome desta morfologia ? Entamoeba histolytica Cisto Cariossoma central Núcleo Corpos cromatóides Citoplasma Qual o nome destas morfologias ? Leishmania spp Promastigota Amastigota Plasmodium spp Qual o nome destas morfologias ? Merozoito Esporozoito Plasmodium spp Qual o nome destas morfologias ? Trypanosona cruzi Qual o nome destas morfologias? Amastigota Tripomastigota Epimastigota Trypanosona cruzi Qual o nome destas morfologias? Amastigota Tripomastigota Reprodução Assexuada Divisão binária ou cissiparidade Brotamento ou gemulação Endogenia – Formação de duas ou mais células filhas por brotamento interno Esquizogonia – Divisão celular seguida de divisão do citoplasma (merozoítos, gametogonia e esporogonia) Sexuada Conjugação Signomia ou fecundação Nutrição Holofíticos ou autotróficos • A partir dos cromatóforos sintetizam energia através da luz solar (fotossíntese) Holozoico ou heterotróficos • Ingerem partículas orgânicas de origem animal , digerem-nas e, posteriormente, expulsam os metabólitos Saprozoicos • “Absorvem” substâncias orgânicas de origem vegetal, já decompostas e dissolvidas no meio líquido Mixotróficos • Quando são capazes de se alimentar por mais de um método citado Excreção Difusão dos metabólitos através da membrana Expulsão dos metabólitos através de vacúolos contráteis Respiração Aeróbicos São os protozoários que vivem em meio rico em oxigênio Anaeróbicos Quando vivem em ambientes pobres em oxigênio, como os parasitos do trato digestivo Locomoção Feita com auxílio de uma ou associação de duas ou mais das seguintes organelas • Pseudópodes • Flagelos • Cílios • Microtúbulos subpeliculares que permitem a locomoção por flexão, deslizando ou ondulação. Paramecium G.lamblia Trichomonas vaginalis Leishmania sp Amebas Sistemática Os protozoários pertencem ao reino ao reino Protista e são distribuídos em sete filos, dos quais os quatro seguintes tem interesse em parasitologia humana: Filo Sarco mastigophora Com núcleos simples; presença de flagelos, psudópodos ou ambos Subfilo Mastigophora: com um ou mais flagelos Classe Zoomastigophorea: sem cloroplastos; um ou vários flagelos Ordem Kinetoplastida: um ou dois flagelos, originados de uma depressão; presença de cinetoplasto: rica em DNA Diplomonadida: corpo com simetria bilateral; 1 a 4 pares de flagelos; cistos presentes Trichomonadida: tipicamente com 4-6 flagelos, um deles formando membrana ondulante; presença de corpo parabasal Amoebida: tipicamente uninucleado, sem flagelo em nenhum estágio Schizopyrenida: corpocilíndrico, movimentando-se eruptivamente; flagelos temporários Subordem Trypanosomatina: um flagelo livre ou com uma membrana ondulante Diplomonadida: dois corpos parabasais Tubulina: Corpo cilíndrico; citoplasma não se dirige simultaneamente para duas direções Sistemática Sistemática Em 2005 foi proposta uma nova classificação de eucariotas unicelulares por Adl e cols. Comitê de especialistas e chancelada pela International Society of Protistologists Existência de seis “supergrupos” de eucariotas: Amoebozoa, Opisthokonta, Rhizaria, Archaeplastida, Chromalveolata e Excavata. Um dos motivos da proposta deriva- se da constatação que linhagens multicelulares não são reinos, por terem emergido de linhagens monofiléticas de protistas A classificação de organismos vivos continuará sofrendo contínuas mudanças a partir de novos conhecimentos da biologia, ultraestrutura e filogenia molecular 25 • Exame direto - Escarificação Antissepsia na borda da lesão Diagnóstico parasitológico 26 • Exame direto - Escarificação Coleta do material com a própria lâmina de bisturi Distensão em lâmina de microscopia, bisturi na posição horizontal Movimento de escarificação suave, Evitando sangramento Diagnóstico parasitológico 27 • Exame direto - Coloração de Geimesa Amastigota Diagnóstico parasitológico 28 • Método direto Imprint • Biópsia da borda da lesão com auxilio de “punch” - Ambulatório – Procedimento médico Diagnóstico parasitológico 29 • Método direto Diagnóstico parasitológico 30 • Método direto - Aspecto da lâmina de de imprint Diagnóstico parasitológico 31 • Exame Indireto • Fragmento da lesão – Isolamento em cultura Coleta com”punch” ou bisturi ( 3mm). A esterilidade do procedimento é fundamental. Diagnóstico parasitológico 32 • Exame Indireto • Cultura do fragmento da lesão - Meio de cultura bifásici - NNN + Schneider - Suplementado com soro fetal bovino (10%) Diagnóstico parasitológico 33 • Exame Indireto • Cultura do fragmento da lesão Diagnóstico parasitológico Diagnóstico parasitológico Pesquisa do parasito em sangue periférico corado ao Giemsa, Leishman ou Wright Hemocultura Xenodiagnóstico Diagnóstico imunológico Detecção de anticorpos anti-tripanosoma (Imunofluorescência indireta, ELISA, Hemaglutinação indireta, teste de Machado guerreiro) Diagnósticos que podem ser usados para identificação de protozoários ALGUNS PROCEDIMENTOS DIAGNÓSTICOS IFA Esfregaço de sangue periférico ao Giemsa Xenodiagnóstico •Clínico Anamnese (procedência e hábitos do indivíduo) •Laboratorial: I - Métodos parasitológicos diretos Exame parasitológico de fezes - demonstração dos ovos (sedimentação espontânea, por centrifugação, Stoll e Kato-Katz, etc) Biópsia ou raspagem da mucosa retal Outros: biópsia hepática (rara) II - Métodos indiretos ou imunológicos Intradermorreação de Montenegro Diagnóstico por imagem, etc. Diagnósticos que podem ser usados para identificação de protozoários Referências ALENCAR, J.E. – História Natural da Doença de Chagas no Estado do Ceará. Fortaleza, Imprensa Universitária da UFC, 1987 [341 páginas]. REY, L. – Bases da Parasitologia. 2a edição. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2002 [380 páginas]. REY, L. – Parasitologia. 3a edição. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 2001 [856 páginas]. NEVES, D. P. Parasitologia dinâmica. 2. ed. Rio de Janeiro: Atheneu, 2005.
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