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O que é coluna do DNA de absorção ?
DNA possui carga total negativa vinda do grupamento fosfato. Assim, podemos adicionar uma coluna com carga positiva (normalmente é utilizada uma coluna de sílica) no nosso tubo e centrifugar. Dessa forma, o DNA vai ficar retido na coluna devido à sua carga negativa e os outros elementos irão passar direto pela coluna, ficando no fundo do tubo. Para remover o DNA da coluna, usamos um tampão de eluição carregado negativamente em grande quantidade. Normalmente, são usados os tampões Tris-HCl ou o EDTA. Eles irão competir com o DNA pela ligação na coluna de adsorção e, como estão em grande quantidade, ganham a competição e se aderem à coluna expulsando o DNA. O procedimento é feito também por centrifugação, porém o material que sairá da coluna será rico em DNA.
Após a obtenção do DNA por qualquer um desses métodos supracitados, precisamos eliminar qualquer resíduo que por um acaso ainda esteja misturado ao DNA. Para isso, adicionamos isopropanol, que precipita apenas o DNA. Após centrifugação, como o DNA encontra-se precipitado, nosso DNA puro encontra-se no pellet.