Roteiro Antibiograma

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1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
 
INSTRUÇÕES GERAIS 
 
1. Neste experimento, você irá realizar um teste antibiograma pelo método de 
disco-difusão e correlacioná-lo ao aparecimento de cepas resistentes. 
 
2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da 
experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do 
VirtuaLab. 
 
3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial 
VirtuaLab” presente neste Roteiro. 
 
4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as 
instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 
 
5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação 
de Resultados”. 
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RECOMENDAÇÕES DE ACESSO 
 
PARA ACESSAR O VIRTUALAB 
 
 
 
 
 
 
 
 
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 
4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 
5. Realize teste de velocidade da internet. 
 
Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos 
Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção 
de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ 
Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com 
nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por 
Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco! 
ATENÇÃO: 
O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER 
ACESSADO POR CELULAR OU TABLET. 
O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB. 
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO 
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE 
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. 
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PERGUNTAS FREQUENTES 
 
 
1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. 
 
d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> 
“Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o 
computador. 
 
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2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente 
novamente. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Verifique se o navegador está atualizado. 
 
 
 
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DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO 
 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS 
 
• Jaleco; 
• Luvas de procedimento; 
• Máscara; 
• Óculos; 
• Caneta permanente; 
• Swab; 
• Estufa bacteriológica; 
• Alça bacteriológica; 
• Pinça metálica; 
• Tubo de ensaio com solução salina; 
• Escala de McFarland 0,5; 
• Suporte para tubo de ensaio; 
• Ágar Manitol; 
• Ágar MacConkey; 
• Placa meio Mueller Hinton; 
• Bico de Bunsen; 
• Multidisco Gram Positivo; 
• Multidisco Gram Negativo; 
• Acendedor mecânico. 
 
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PROCEDIMENTOS 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Lave as mãos na “Pia” e coloque os equipamentos de proteção individual localizados 
no “Armário de EPIs”. 
 
2. PREPARANDO A SUSPENSÃO 
 
Identifique as placas de ágar Mueller Hinton com caneta permanente. Acenda o bico 
de Bunsen e flambe a alça bacteriológica. Posicione a placa de ágar Manitol próximo 
a chama do bico de Bunsen, destampe a placa e colete a amostra com a alça. Tampe 
a placa de coloque-a de volta na bancada. Mova o tubo de ensaio (1) com solução 
salina para o bico de Bunsen, retire a tampa e inocule a bactéria. Após finalizar a 
inoculação, flambe a alça, tampe o tubo, mova-o para o suporte e compare a turvação 
com a escala de McFarland 0,5. Repita esse processo inoculando a amostra da placa 
de ágar MacConkey no tubo de ensaio (2). 
 
3. SEMEANDO A AMOSTRA 
 
Inocule o swab no tubo de ensaio (1). Mova a placa de ágar Mueller Hinton (1) para o 
bico de Bunsen, retire a tampa e semeei a amostra na placa. Descarte o swab. Tampe 
a placa e coloque-a na bancada. Repita o mesmo procedimento inoculando o swab 
no tubo de ensaio (2) e semeando a placa de ágar Mueller Hinton (2). Retorne as 
placas para a bancada e aguarde 10 minutos para secar. 
 
4. ADICIONANDO OS ANTIBIÓTICOS 
 
Posicione a placa de ágar Mueller Hinton (1) próximo ao bico de Bunsen e retire a 
tampa da placa. Flambe a pinça metálica e adicione o multidisco de antibiótico para 
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gram-positivos. Flambe novamente a pinça, tampe a placa e coloque-a na bancada. 
Posicione a placa de ágar Mueller Hinton (2) próximo ao bico de Bunsen, retire a 
tampa da placa e adicione o multidisco de antibiótico para gram-negativos. Flambe a 
pinça ao final do processo e coloque-a na bancada. Tampe a placa de ágar Mueller 
Hinton, mova a placa para bancada. Coloque as duas placas na estufa, ligue o 
equipamento e aguarde 24 horas. 
 
5. REALIZANDO A LEITURA 
 
Abra a estufa e mova as placas de ágar Mueller Hinton para bancada. Ative o menu de 
resultados da prática. Utilize a régua para verificar o tamanho dohalo de inibição do 
antibiótico. Preencha a tabela de resultados com o valor encontrado e informe a 
classificação. Realize a leitura completa das duas placas de antibiograma. 
 
6. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo 
com o que foi observado nos experimentos 
 
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AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 
 
 
 
1. Qual a importância do antibiograma no diagnóstico laboratorial? 
 
 
 
2. Qual o princípio do método Kirby Bauber utilizado nessa aula? 
 
 
 
3. Em seus resultados foram observadas amostras resistentes? Em quais amostras e 
antibióticos? 
 
 
 
4. Relacione os resultados de resistência às amostras biológicas que foram utilizadas 
nesta aula prática. 
 
 
 
5. Quais são os outros métodos para detecção da resistência aos antimicrobianos? 
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6. Qual a diferença entre as outras técnicas disponíveis e o método de disco-difusão? 
 
 
 
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TUTORIAL VIRTUALAB 
 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Visualize a pia clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Pia” 
localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se 
preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+1”. 
 
 
 
 
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Higienize as mãos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a torneira da pia. 
 
 
 
Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o 
nome “Armário de EPIs”. Se preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado 
“Alt+2”. 
 
 
 
 
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Abra o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. 
 
 
 
Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo 
do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas de látex, 
óculos e máscara. 
 
 
 
 
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2. PREPARANDO A SUSPENSÃO 
 
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Experimento” ou através do atalho do teclado “Alt+3”. 
 
 
 
Identifique as placas de ágar Mueller Hinton clicando com o botão esquerdo do mouse 
sobre a caneta marcadora. 
 
 
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Visualize o bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera “Bico 
de Bunsen” ou utilizando o atalho do teclado “Alt+5”. 
 
 
 
Ligue o gás do bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a válvula. 
 
 
 
 
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Ajuste a chama do bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele 
e movimentando a barra de ajuste para direito ou para esquerda. 
 
 
 
Acenda o bico de Bunsen clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o acendedor 
mecânico. 
 
 
 
 
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Flambe a alça bacteriológica clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Visualize a bancada e mova a placa de ágar manitol para o bico de Bunsen clicando com 
o botão direito do mouse sobre ela e selecionando a opção “Colocar em bico de 
Bunsen”. 
 
 
 
 
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Destampe a placa de ágar manitol clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Colete a amostra da placa de Petri clicando com o botão direito do mouse sobre a alça 
bacteriológica e selecionando a opção “Coletar amostra da placa”. 
 
 
 
 
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Tampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Mova a placa para bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
 
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Mova o tubo de ensaio para o bico de Bunsen clicando com o botão direito do mouse 
sobre ele e selecionando a opção “Colocar no bico de Bunsen”. 
 
 
 
Retire a tampa do tubo de ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele. 
 
 
 
 
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Inocule a amostra no tubo de ensaio clicando com o botão direito do mouse sobre a alça 
bacteriológica e selecionando a opção “Inocular em tubo de ensaio”. 
 
 
 
Flambe a alça bacteriológica clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a alça. 
 
 
 
 
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Tampe o tubo de ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a vidraria. 
 
 
 
Mova o tubo de ensaio para o suporte clicando com o botão direito do mouse sobre o 
tubo e selecionando a opção “Colocar no suporte”. 
 
 
 
 
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Visualize a bancada e mova a placa de ágar MacConkey para o bico de Bunsen clicando 
com o botão direito do mouse sobre ela e selecionando a opção “Colocar no bico de 
Bunsen”. 
 
 
 
Destampe a placa de ágar MacConkey clicando com o botão esquerdo do mouse sobre 
ela. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Colete a amostra da placa de Petri clicando com o botão direito do mouse sobre a alça 
bacteriológica e selecionando a opção “Coletar amostra da placa”. 
 
 
 
Tampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
 
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Mova a placa para bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
Mova o tubo de ensaio para o bico de Bunsen clicando com o botão direito do mouse 
sobre ele e selecionando a opção “Colocar no bico de Bunsen”. 
 
 
 
 
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Retire a tampa do tubo de ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele. 
 
 
 
Inocule a amostra no tubo de ensaio clicando com o botão direito do mouse sobre a alça 
bacteriológica e selecionando a opção “Inocular em tubo de ensaio”. 
 
 
 
 
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Flambe a alça bacteriológica clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a alça. 
 
 
 
Tampe o tubo de ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a vidraria. 
 
 
 
 
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Mova o tubo de ensaio para o suporte clicando com o botão direito do mouse sobre o 
tubo e selecionando a opção “Colocar no suporte”. 
 
 
 
Visualize a bancada e coloque a alça bacteriológica na bancada clicando com o botão 
direito do mouse sobre ela e selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
 
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3. SEMEANDO A AMOSTRA 
 
Inocule o swab no tubo de ensaio 1 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o 
swab. 
 
 
 
Visualize a bancada e mova a placa de ágar Mueller Hinton para o bico de Bunsen 
clicando com o botão direito do mouse sobre a placa e selecionando a opção “Colocar 
no bico de Bunsen”. 
 
 
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Destampe a placa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Semeei a amostra na placa clicando com o botão direito do mouse sobre o swab e 
selecionando a opção “Semear na placa”. 
 
 
 
 
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Descarte o swab clicando com o botão direito do mouse sobre ele e selecionando a 
opção “Descartar”. 
 
 
 
Tampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
 
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Coloque a placa na bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
Mergulhe o swab no tubo de ensaio 2 clicando com o botão esquerdo do mouse sobre 
o swab. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Visualize a bancada e mova a placa de ágar Mueller Hinton para o bico de Bunsen 
clicando com o botão direito do mouse sobre a placa e selecionando a opção “Colocar 
no bico de Bunsen”. 
 
 
 
Destampe a placa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Semeei a amostra na placa clicando com o botão direito do mouse sobre o swab e 
selecionando a opção “Semear na placa”. 
 
 
 
Descarte o swab clicando com o botão direito do mouse sobre ele e selecionando a 
opção “Descartar”. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Tampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Coloque a placa na bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Aguarde as placas secarem por 10 minutos. 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
 
4. ADICIONANDO OS ANTIBIÓTICOS 
 
Flambe a pinça metálica clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o objeto. 
 
 
 
Visualize a bancada e mova a placa de ágar Mueller Hinton para o bico de Bunsen 
clicando com o botão direito do mouse sobre a placa e selecionando a opção “Colocar 
no bico de Bunsen”. 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Destampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Adicione o multidisco de antibiótico na placa clicando com o botão direito do mouse 
sobre a pinça e selecionando a opção “Colocar disco na placa”. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Flambe a pinça clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Tampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o objeto. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Mova a placa de Petri para bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
Mova a segunda placa de ágar Mueller Hinton para o bico de Bunsen clicando com o 
botão direito do mouse sobre ela e selecionando a opção “Colocar em bico de Bunsen”. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Destampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Adicione o multidisco de antibiótico na placa clicando com o botão direito do mouse 
sobre a pinça e selecionando a opção “Colocar disco na placa”. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Flambe a pinça clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Tampe a placa de Petri clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o objeto. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Mova a placa de Petri para bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
Mova a pinça para bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na bancada”. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Visualize o bico de Bunsen e feche a válvula do gás clicando com o botão esquerdo do 
mouse sobre a válvula. 
 
 
 
Visualize a bancada e mova as duas placas de ágar Mueller Hinton para a estufa clicando 
com o botão direito do mouse sobre ela e selecionando a opção “Colocar em estufa”. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS E IMUNOLÓGICAS 
ANTIBIOGRAMA 
Feche a estufa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Ligue a estufa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de energia 
“power”. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Aguarde por 24 horas até o período de crescimento finalizar. 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
 
5. REALIZANDO A LEITURA 
 
Desligue a estufa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de energia. 
 
 
 
Abra a estufa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a porta. 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Mova a placa de ágar Mueller Hinton para bancada clicando com o botão direito do 
mouse sobre ela e selecionando a opção “Colocar na bancada”. Repita esse passo com 
a segunda placa. 
 
 
 
Inicie a leitura do resultado clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o ícone 
“Resultados placa 1” localizado no canto superior direito da tela. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Meça o diâmetro do halo de inibição clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a 
régua marcando o ponto inicial e o ponto final do halo. 
 
 
 
Preencha a tabela com o valor encontrado clicando com o botão esquerdo do mouse 
sobre o espaço correspondente ao antibiótico analisado. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
Classifique a ação do antibiótico clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a célula 
correspondente da coluna “Classificação (BrCast)” e selecionando uma das opções 
disponíveis. Repita esse processo de leitura e classificação com todos os antibióticos. 
 
 
 
Realize a leitura da segunda placa de antibiograma clicando com o botão esquerdo do 
mouse sobre o ícone “Resultados placa 2” localizado no canto superior direito da tela. 
 
 
 
 
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ANTIBIOGRAMA 
 
6. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo com 
o que foi observado nos experimentos 
 
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