Lipidograma

Prévia do material em texto

UNIVERSIADEE FEDERAL DO AMAZONAS 
FACULDADE DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Perfil Lipídico (Lipidograma) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Rana Andressa Castelo Branco Feitosa 
Manaus-AM, 2022. 
1. Fundamentação do Método: 
Triglicerídeos 
Os triglicérides do soro são hidrolisados pelas lipases lipoproteícas produzindo glicerol livre, pela 
ação da enzima glicerolquinase o glicerol é convertido em glicerol-3-fosfato, essa molécula 
então é oxidada pela ação das enzimas glicerolfosfato oxidase, a dihidroxiacetona formando o 
peróxido de hidrogênio. O peróxido de hidrogênio na presença de 4-aminoantipirina e 4-
clorofenol produz quinoneimina, composto que possui uma coloração róseo-avermelhada com 
máximo de absorbância a 500 nm. 
Colesterol 
A enzima colesterol esterase hidrolisa os ésteres de colesterol, liberando ácidos graxos e 
colesterol que é oxidado pelo colesterol oxidase, formando a colest-4-en-ona e peróxido de 
hidrogênio. Na presença de peroxidase e peróxido de hidrogênio, o fenol e a 4-aminoantipirina 
são oxidados formando a antipirilquinonimina que possui coloração avermelhada, sendo 
possível ler em 500 nm no espectrofotômetro. 
HDL 
Através do ácido fosfotúngstico e cloreto de magnésio, o VLDL e LDL precipitam de maneira 
seletiva e quantitativamente no meio, devido ambos possuírem uma baixa densidade. Após a 
centrifugação, o HDL é sedimentado e desta forma é possível medi-lo. A reação é então lida a 
500 nm no espectrofotômetro, utilizando os reagentes para dosagem de colesterol total. 
2. Procedimentos: 
1- A amostra de sangue foi coleta no tubo de tampa amarela; 
2- Os kits para colesterol total, triglicerídeos totais e HDL foram separados; 
3- Pipetou-se 250 μl da amostra e 250 μl do agente precipitante do kit do HDL dentro de 
um eppendorf; 
4- Agitou-se o conteúdo vigorosamente; 
5- O tubo foi colocado na centrífuga por 15 minutos a 5000 rpm; 
6- Durante o tempo da centrifugação, foi pipetado 1 mL do reagente do colesterol total 
nos seis tubos (sendo um branco, padrão e teste para o HDL como também colesterol 
total); 
7- Pipetou-se para o tubo de teste do colesterol total 10 μl da amostra (soro); 
8- Pipetou-se 10 μl do padrão do colesterol total em seu respectivo tubo; 
9- Pipetou-se 100 μl da solução padrão do HDL e 100 μl da amostra já centrifugada para 
seu tubo; 
10- Pipetou-se 1 mL do reagente de trabalho nos três tubos do triglicerídeos totais (branco, 
padrão e teste); 
11- Pipetou-se 10 μl da amostra de soro para o tubo teste de triglicerídeos e 10 μl do padrão 
para o seu tubo; 
12- Todos os nove tubos foram homogeneizados e posteriormente levados para o 
banhomaria durante 10 minutos a 370 C; 
13- As leituras de cada tubo foram feitas a 500 nm e anotadas para a realização dos cálculos. 
 
 
 
3. Resultados: 
Análise Resultado Valor de Referência 
TRIGLICERÍDEOS 94 mg/dL <150 
COLESTEROL TOTAL 105 md/dL <200 
HDL 23 mg/dL >40 
LDL 63 mg/dl <110 
VLDL 19 mg/dL <100 
 
Análise Absorbância Padrão 
Tiglicerídeos 0,241 0,514 
Colesterol Total 0,332 0,629 
HDL 0,200 0,351 
 
 
4. Cálculos: 
Utilizando a razão entra a absorbância das amostras pelas absorbâncias dos padrões 
multiplicado pelo o fator de correção, obtemos então a concentração de gordura presente na 
amostra. 
Triglicerídeos: (Abs. amostra÷Abs. Padrão) X200= [TG] 
(0,241÷0,514)X200 = 94 mg/dL 
Colesterol Total: (Abs. amostra÷Abs. Padrão) X200= [CT] 
(0,332÷0,629)X200 = 105 mg/dL 
Colesterol HDL: (Abs. amostra÷Abs. Padrão) X40= [HDL] 
(0,200÷0,351)X40 = 23 mg/dL 
VLDL: TG÷5 
94÷5= 18,8 = 19 mg/dL 
LDL: VLDL – (LDL+HDL) 
105- (18,8+23)= 63 mg/dL 
5. Conclusão: 
 
Os valores de triglicerídeos, colesterol total, e de colesterol LDL estavam dentro dos valores de 
referências desejados para o sexo e faixa etária, já o colesterol HDL estava muito a baixo do 
esperado, quando esses valores de HDL estão menores que 40 mg/Dl deve-se ficar alerta ao 
aparecimento de doenças cardiovasculares, pois pode haver acúmulo de gorduras nos vasos, 
que podem desencadear até um acidente vascular cerebral (AVC).