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Controle microbiano por agentes químicos Universidade Federal Rural do Semi-Árido Raphaela V .G. Barreto Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Controle microbiano por agentes químicos • Os agentes químicos são usados para controlar o crescimento de microrganismos em tecidos vivos (ANTI-SÉPTICOS) e em objetos inanimados (DESINFETANTES). • Dificilmente se obtém a esterilidade; a maioria deles apenas reduz a população microbiana a níveis seguros ou remove as formas vegetativas dos patógenos. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Critérios para escolha de um agente químico • Natureza do material a ser tratado; • Características dos microrganismos a serem removidos ou inativados; • Condições ambientais. Efeitos dos agentes antimicrobianos sobre o crescimento BACTERIOSTÁTICO Inibe o crescimento sem que haja morte das células. Atuam na síntese protéica BACTERICIDA Matam as células sem que haja lise celular. Ligam-se fortemente aos seus alvos celulares. BACTERIOLÍTICO Induzem a morte pela lise celular, que pode ser observada como uma diminuição do número de células. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Características de um AGENTE QUÍMICO IDEAL • Alta toxicidade para os microrganismos • Solúvel em água • Estabilidade elevada • Inócuo para o homem e animais • Ausência de afinidade por matéria orgânica Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Características de um AGENTE QUÍMICO IDEAL • Toxicidade para os microrganismos em temperatura ambiente ou corporal • Capacidade de penetração em diversas superfícies • Não ser corrosivo e nem manchar • Desodorisante • Características detergentes • Disponibilidade (baixo custo e fácil acesso) Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Medida da atividade antimicrobiana • A atividade antimicrobiana é avaliada determinando- se a MENOR quantidade de agente necessária para inibir o crescimento de um micro-organismo teste. Concentração Inibitória Mínima (CIM) Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto AVALIANDO UM DESINFETANTE • MÉTODO DA DILUIÇÃO EM TUBOS • Cada tubo contém o meio com uma concentração diferente do agente; • Após incubação do micro-organismo teste, os tubos são analisados verificando a turbidez; • A CIM é determinada pela variação da turbidez ao longo do gradiente do agente químico. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto MÉTODO DA DILUIÇÃO EM TUBOS Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Sobre a concentração inibitória mínima... Não é uma medida constante para um determinado agente, uma vez que pode ser afetada: pela natureza do organismo utilizado, tamanho do inóculo, composição do meio de cultura, tempo e condições de incubação. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto AVALIANDO UM DESINFETANTE • MÉTODO DA DIFUSÃO EM AGAR • Inoculação do micro-organismo teste em um meio em placa de Petri; • Concentrações conhecidas do agente antimicrobiano são adicionadas em discos de papel de filtro; • Os discos são disponibilizados sobre a cultura; • Durante a incubação ocorre a difusão do agente e possível inibição do crescimento bacteriano. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto MÉTODO DA DIFUSÃO EM AGAR Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto MÉTODO DA DIFUSÃO EM DISCO Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Formação de uma zona de inibição, que é proporcional à: Quantidade do agente antimicrobano; Solubilidade do agente; Coeficiente de difusão e Eficácia geral do agente. MÉTODO DA DIFUSÃO EM DISCO Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto AVALIANDO UM DESINFETANTE • COEFICIENTE FENÓLICO • Analisa quanto um desinfetante é mais eficiente que o fenol. • As soluções de fenol e do desinfetante-teste são diluídas e inoculadas com a cultura do micro- organismo por determinados intervalos de tempo; • A viabilidade da cultura é analisada por subcultivo em placa com meio sem o desinfetante. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto COEFICIENTE FENÓLICO Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto CÁLCULO DO COEFICIENTE FENÓLICO Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto TIPOS DE AGENTES QUÍMICOS ANTIBACTERIANOS • Compostos Orgânicos (Fenol e Compostos Fenólicos, Álcoois, Compostos de Amônio Quaternário -Quats) • Halogênios • Metais Pesados e seus compostos • Outros (Peroxigênios, Quimioesterilizantes Gasosos, Agentes de superfície, Biguanidas, Antibióticos) Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto FENOL Irritante e Odor Desagradável Composto Padrão: Coeficiente Fenólico APLICAÇÕES PRÁTICAS: Dependente da concentração: 0,5 – 1,0% - anti-séptico; 5% - desinfetante. Promove uma desinfecção de nível médio ou baixo. Derivados Químicos: possuem alterações na estrutura do fenol que aumentam a ação antimicrobiana e diminuem a toxicidade Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto FENOL Descontaminação de superfícies hospitalares, artigos metálicos e vidros; Exposição durante 10 min e em artigos, por 30 min – bactericida, mas não age em endosporos; Não recomendado para artigos hospitalares que entram em contato com o trato respiratório, alimentos, berçários e objetos de látex, pois estes são danificados. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto FENOL Hexaclorofeno: Tóxico e Restrito. A 3% apresenta ação anti- séptica, mas o uso excessivo acarreta danos neurológicos. MECANISMOS DE AÇÃO: Alteram a permeabilidade da membrana – lise celular Desnaturam e inativam de proteínas Bacteriostática ou Bactericida Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Compostos com IODO Fortes agentes oxidantes, altamente reativos; Destroem os componentes vitais da célula microbiana. IODO E COMPOSTOS IODADOS Agente químico usado como desinfetante e anti-séptico; Forte agente oxidante – complexa e inativa proteínas; Tintura – solução de iodo em álcool aquoso; Iodóforo – combinação de iodo com molécula orgânica na qual o iodo é liberado lentamente. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Álcool iodado - 0,5 a 1,0% de iodo livre em álcool etílico 77%; Ação contra células vegetativas, endosporos, vários fungos e alguns vírus; Soluções a 2% em água ou em solução alcoólica para anti- sepsia de tecidos e tratamento de feridas. Compostos com IODO Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Compostos com CLORO CLORO E COMPOSTOS CLORADOS Inativam enzimas e ácidos nucléicos; São eficazes contra bactérias Gram-positivas e negativas, fungos, micobactérias, todos os tipos de vírus e endosporos; A forma ativa é o ácido hipocloroso (HOCl). A eficácia do cloro decresce com o aumento do pH. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Compostos com CLORO CLORO E COMPOSTOS CLORADOS A concentração de cloro deve ser alta o suficiente para satisfazer a demanda do cloro (cloro consumido pela carga orgânica presente) e fornecer cloro residual suficiente para destruir os microorganismos. Solução de hipoclorito 1% - desinfetante doméstico; Solução de 5 a 12% - alvejantes, desinfetantes domésticos, sanitizantes em indústria de alimentos.Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Uso de hipoclorito para limpeza de frutas, legumes e verduras 1. Lavar bem em água corrente para remover sujidades e ovos de parasitas 2 e 3. Deixar de molho em água clorada por 15 minutos (colher de sopa de cloro para cada 5 litros d’água) 4. Enxaguar bem com água tratada e manter sob refrigeração. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Álcool Bactericida e fungicida entre 60% e 90%; Promovem a desinfecção de níveis baixos a intermediários; Atuam sobre as células de Mycobacterium turbeculosis; Mais indicado para desinfecção de artigos e superfícies, devido à facilidade de evaporação; Incompatível com acrílicos, borrachas e tubos plásticos; Álcool etílico apresenta maior ação germicida, menor custo e toxicidade que o álcool isopropílico, o qual, por sua vez, tem maior atividade contra vírus. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Álcool Aplicações Práticas: Etanol (70%) e Isopropanol (90%) Anti- sépticas e Desinfetantes Mecanismo de Ação: Desnatura Proteínas Solvente de Lipídeos: lesão da membrana Remoção Mecânica Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Metais pesados Mercúrio, Selênio, Prata e Cobre; Germicida e anti-séptico; Ação Oligodinâmica: capacidade de quantidades muito pequenas de metais pesados – especialmente a prata e o cobre – de exercerem atividade antimicrobiana. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Metais pesados Aplicação Prática: Mercúrio orgânico: Mercuriocromo e “Merthiolate” – em desuso (2000) devido à toxicidade do mercúrio! Nitrato de prata 1 % - usado em bebês na hora do parto para prevenção de doenças oftálmicas; Sulfato de Cobre: algicida; Sulfato de Zinco: usado em colírios; Sulfito de Selênio: elimina fungos (combate a caspa) Mecanismo de Ação: Inativação de proteínas Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Ação oligodinâmica dos metais pesados Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Tensoativos Surfactantes – tensoativos – grupos anfipáticos; Sabões e detergentes sintéticos; Aniônicos, Catiônicos ou Não-iônicos; Sabão: pouco valor anti-séptico (mais importante na remoção mecânica). Detergentes: ânion da molécula reage com a membrana plasmática (atuam sobre um amplo espectro de micróbios e não são tóxicos) Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Quaternário de Amônio (QUAT) Ação bactericida relacionada à parte positivamente carregada; Possuem quatro grupos orgânicos ligados a um átomo de nitrogênio do íon amônio (NH4 +); Bactericida: 1:30.000 / Bacteriostático: 1:200.000; Mais efetivos contra bactérias Gram-positivas; Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Quaternário de Amônio (QUAT) Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Salmonella typhimurium são resistentes a sua ação; Desnaturam proteínas, interferem em processos metabólicos e lesionam a membrana; Não apresentam ação letal contra micobactérias e endósporos; Em soluções concentradas é bastante nocivo ao manipulador. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Quaternário de Amônio (QUAT) Aplicações Práticas: Germicida e detergente Baixa toxicidade, alta solubilidade, alta estabilidade Não corrosivo, anti-séptico, desinfetantes, sanitizantes; Assoalhos, hospitais, restaurantes, etc. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Teste da diluição de uso Determina a concentração apropriada do desinfetante. Permite realizar uma comparação de diferentes desinfetantes entre si, relacionando a eficácia entre tipos diversos de agentes químicos. Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Teste da diluição de uso Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Diluição aceitável – morte dos microrganismos em pelo menos 59 de cada 60 cilindros testados, após 10 minutos de contato com o agente químico. Microrganismos comumente utilizados neste teste: Staphylococcus aureus ATCC 6583; Salmonella choleraesuis ATCC 10708; Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442 Teste da diluição de uso Controle Microbiano por Agentes Químicos Profa. Raphaela Barreto Utilizada comumente para a determinação de toxicidade de anti-sépticos, agentes químicos específicos para uso em tecidos vivos. Índice de toxicidade (I)
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