Processos de Purificação de Proteínas

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�Questão de concurso FGV � Fiocruz/2010 �
Tecnologista em Saúde � Produção de
Biofármacos)
A purificação de proteínas compreende uma
série de processos que visam o isolamento de
um único tipo proteico a partir de uma mistura
complexa. Sobre o tema, analise as seguintes
afirmativas:
I.  A solubilidade de uma proteína depende do
número e do arranjo de cargas na molécula,
que, por sua vez, depende da composição em
aminoácidos. Partes não proteicas da molécula,
como lipídeos, carboidratos, fosfatos etc.,
também afetam a solubilidade.
II. Um polipeptídeo pode se apresentar em
diferentes graus de estruturação. Sua estrutura
primária se caracteriza por apresentar apenas
ligações de hidrogênio entre os aminoácidos e é
o nível estrutural mais importante, pois dele
deriva todo o arranjo espacial da molécula.
III. Em elevadas concentrações de sais, a
solubilidade aumenta, pois os íons salinos
Questão 1 de 10
Corretas �10�
Em branco �0�
1 2 3 4 5
6 7 8 9 10
Exercicio
Engenharia Genética e Dna
Recombinante
Sair
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A
B
C
D
E
tendem a se associar às proteínas, contribuindo
para uma hidratação e/ou repulsão entre as
moléculas, aumentando a solubilidade salting in.
Assinale a alternativa correta:
Somente a afirmativa I está correta.
Somente as afirmativas I e II estão
corretas.
Somente as afirmativas I e III estão
corretas.
Somente as afirmativas II e III estão
corretas.
Todas as afirmativas estão corretas.
Resposta correta
Parabéns, você selecionou a
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Gabarito Comentado
A alternativa correta é a "A", que afirma que
somente a afirmativa I está correta. A
afirmativa I é verdadeira, pois a
solubilidade de uma proteína realmente
depende do número e do arranjo de cargas
na molécula, que, por sua vez, depende da
composição em aminoácidos. Além disso,
partes não proteicas da molécula, como
lipídeos, carboidratos, fosfatos etc.,
também afetam a solubilidade. No entanto,
as afirmativas II e III contêm erros. A
afirmativa II está errada porque a estrutura
primária de um polipeptídeo não se
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A
B
C
caracteriza por apresentar apenas ligações
de hidrogênio entre os aminoácidos. A
afirmativa III também está errada, pois em
elevadas concentrações de sais, a
solubilidade das proteínas geralmente
diminui, um fenômeno conhecido como
"salting out".
2 Marcar para revisão
�Questão adaptada de concurso público para
Inmetro �Cespe � UnB 2010�, cargo 51� Técnico
em Metrologia e Qualidade � Área:
Biotecnologia.)
A biotecnologia trabalha predominantemente
manipulando material genético de seres vivos;
para a maioria dos organismos, o material
genético é a molécula de DNA. Considerando as
metodologias de biologia molecular, assinale a
opção correta:
Biofármacos de proteínas
recombinantes podem ser produzidos
apenas em células de mamíferos para
serem seguros ao uso em humanos.
A endonuclease de restrição, uma das
principais ferramentas da tecnologia
do DNA recombinante, corta a
molécula de DNA em sequências
específicas.
A E. coli é a última opção como
sistema hospedeiro para produção de
moléculas de DNA recombinante, por
ser patogênica.
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D
E
O termo clonagem de DNA deriva da
clonagem da ovelha Dolly, técnica
precursora da recombinação
heteróloga.
Ao se cortar o DNA genômico
aleatoriamente, serão observados
genes em todos os fragmentos.
Resposta correta
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A alternativa correta é a B, que afirma que
a endonuclease de restrição, uma das
principais ferramentas da tecnologia do
DNA recombinante, corta a molécula de
DNA em sequências específicas. A
endonuclease de restrição é uma enzima
que reconhece sequências específicas de
nucleotídeos no DNA e realiza cortes
nessas regiões. Essa característica é
fundamental na tecnologia do DNA
recombinante, pois permite a manipulação
precisa do DNA, possibilitando a inserção
ou remoção de genes específicos.
Portanto, essa afirmação está correta e é
um conceito fundamental na biotecnologia.
3 Marcar para revisão
�Questão adaptada de concurso público para
Fiscal Ambiental e Sanitário, Prefeitura de Nova
Candelária � RS 2018�.
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A
B
C
D
E
No Capítulo VIII, dos crimes e das penas da Lei
n. 11.105/2005, está correto o que se afirma na
alternativa:
Utilizar embrião humano em
desacordo com o que dispõe essa lei
resulta em pena de detenção e multa.
Praticar engenharia genética em célula
somática animal gera pena de reclusão
e multa.
Realizar clonagem vegetal gera pena
de reclusão e multa.
Liberar ou descartar OGM no meio
ambiente, em desacordo com as
normas estabelecidas pela CTNBio,
não é crime, mas contravenção.
Produzir, armazenar, transportar,
comercializar OGM sem autorização
ou em desacordo com as normas
estabelecidas gera multa ambiental.
Resposta correta
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A alternativa correta é a letra A, que afirma
que utilizar embrião humano em desacordo
com o que dispõe a Lei n. 11.105/2005
resulta em pena de detenção e multa. Esta
lei, também conhecida como Lei de
Biossegurança, estabelece normas de
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segurança e mecanismos de fiscalização
de atividades que envolvem organismos
geneticamente modificados �OGM�,
incluindo o uso de embriões humanos.
Portanto, qualquer uso de embriões
humanos que não esteja em conformidade
com as disposições desta lei é considerado
um crime, sujeito a penalidades
específicas.
4 Marcar para revisão
�Questão de concurso FGV � Fiocruz/2010 �
Tecnologista em Saúde � Desenvolvimento de
Insumos Biológicos para a Saúde)
Analise as afirmativas a seguir:
I. A técnica de DNA recombinante permite
localizar, isolar, preparar e estudar pequenos
segmentos de DNA, e seus produtos proteicos,
derivados de cromossomos muito maiores.
II. O primeiro organismo usado para a expressão
heteróloga de proteínas usando a tecnologia do
DNA recombinante foi o plasmódium
Escherichia coli.
III. Os plasmídeos são moléculas de DNA
circular extracromossomal que podem ser
propagados prontamente por um organismo
heterólogo, permitindo a síntese de uma
proteína pela inserção de genes de interesse
numa nova combinação de DNA cromossomal
ou extracromossomal, de acordo com o vetor
de clonagem.
Assinale a alternativa correta:
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A
B
C
D
E
Apenas as afirmativas I e III estão
corretas.
Apenas a afirmativa II está correta.
Apenas asafirmativas I e II estão
corretas.
Apenas a afirmativa III está correta.
Apenas a afirmativa I está correta.
Resposta correta
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A alternativa correta é a E, que afirma que
apenas a afirmativa I está correta. A
afirmativa I está correta porque a técnica
de DNA recombinante realmente permite
localizar, isolar, preparar e estudar
pequenos segmentos de DNA, e seus
produtos proteicos, derivados de
cromossomos muito maiores. No entanto, a
afirmativa II está incorreta porque o
primeiro organismo usado para a expressão
heteróloga de proteínas usando a
tecnologia do DNA recombinante não foi o
plasmódium Escherichia coli. A afirmativa III
também está incorreta porque, embora os
plasmídeos sejam moléculas de DNA
circular extracromossomal que podem ser
propagados por um organismo heterólogo,
a síntese de uma proteína pela inserção de
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A
B
C
D
E
genes de interesse numa nova combinação
de DNA não depende apenas do vetor de
clonagem.
5 Marcar para revisão
�Questão adaptada de concurso público para
Tecnologista em Saúde � Desenvolvimento de
Insumos Biológicos para a Saúde, Fiocruz
2010.)
A clonagem de um gene é apenas o primeiro
passo na tecnologia de DNA recombinante. A
produção em ampla escala de uma proteína
recombinante é o objetivo principal dos
pesquisadores que utilizam essa técnica. Muitos
organismos podem ser usados para expressão
de proteínas em sistemas heterólogos. Nos
sistemas de expressão disponíveis, é correto
afirmar que podemos expressar proteínas em:
Sistemas eucarióticos e bactérias.
Sistemas de bactérias e vírus.
Somente em bactérias, leveduras e
vermes.
Somente em procarióticos e células de
mamíferos.
Somente em eucarióticos.
Resposta correta
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A alternativa correta é a letra A� "Sistemas
eucarióticos e bactérias". Isso porque a
expressão de proteínas pode ocorrer tanto
em sistemas eucarióticos quanto em
bactérias, que são procarióticas. A
tecnologia de DNA recombinante permite a
inserção de genes em diferentes tipos de
células, incluindo células eucarióticas
(como células de mamíferos e leveduras) e
células procarióticas (como bactérias), para
a produção de proteínas recombinantes.
Portanto, a expressão de proteínas não
está limitada a um único tipo de organismo.
6 Marcar para revisão
�Questão de concurso � Idecan/2019 � IF�PB �
Professor EBTT � Ciências Biológicas)
A biotecnologia abrange diferentes áreas do
conhecimento, incluindo a ciência básica
(biologia molecular e microbiologia), a ciência
aplicada (técnicas imunológicas) e, também, as
tecnologias diversas (informática de sistemas,
robótica e controle de processos). Dentre essas
áreas, o DNA recombinante aparece
diretamente associado ao melhoramento
genético de organismos. Essas técnicas de
melhoramento consistem na inserção de
porções do DNA de interesse de uma espécie
em outra. Tendo em vista os princípios básicos
de biotecnologia, relacionados ao DNA
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A
B
C
D
E
recombinante, sobre os protocolos comumente
utilizados pode-se afirmar corretamente que:
As enzimas de restrição são utilizadas
para cortar a molécula de DNA.
As enzimas de restrição reconhecem o
fragmento de DNA inserido na célula-
alvo.
O uso de plasmídeos diminui a
eficiência das técnicas de
melhoramento genético.
Os plasmídeos são enzimas que unem
as moléculas de DNA.
A enzima DNA-ligase insere o DNA de
interesse na célula alvo.
Resposta correta
Parabéns, você selecionou a
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Gabarito Comentado
A alternativa correta é a letra A� "As
enzimas de restrição são utilizadas para
cortar a molécula de DNA". As enzimas de
restrição, também conhecidas como
endonucleases de restrição, são proteínas
que cortam o DNA em locais específicos.
Elas são fundamentais na biotecnologia e
na genética molecular, pois permitem a
manipulação de sequências de DNA,
facilitando a inserção de genes de
interesse em organismos-alvo, um
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processo crucial para o melhoramento
genético.
7 Marcar para revisão
�Questão do Enade � Inep/2013 � Biomedicina)
Embora os transgênicos sejam muito discutidos
na perspectiva das políticas de produção
agrícola, as aplicações biotecnológicas de
organismos geneticamente modificados �OGM�
são inúmeras e vêm sendo utilizadas há cerca
de duas décadas na produção industrial. Um
exemplo do uso da tecnologia associada aos
OGM é a quimosina, uma enzima importante na
coagulação de lacticínios, pioneira entre os
produtos gerados por OGM e que está no
mercado desde os anos 1990. Essa enzima era
tradicionalmente extraída do estômago de
mamíferos. Nos anos 1990, foram criadas
bactérias geneticamente modificadas contendo
DNA de células estomacais de animais. Essas
bactérias passaram a ser utilizadas, em larga
escala, em um processo de fermentação para a
síntese da referida enzima. A quimosina
produzida desse modo tem estrutura molecular
idêntica àquela que era obtida da forma
tradicional.
Com base no texto, avalie as seguintes
asserções e a relação proposta entre elas:
I. A produção de queijos com uso da quimosina
sintetizada por bactérias geneticamente
modificadas é considerada segura para o
consumidor do alimento, e os queijos assim
produzidos não podem ser classificados como
alimentos transgênicos.
PORQUE
II. A quimosina utilizada na fabricação de
queijos, embora seja um OGM, é eliminada no
final do processo produtivo.
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A
B
C
D
E
Acerca dessas asserções, assinale a opção
correta:
As asserções I e II são proposições
verdadeiras, e a II é uma justificativa
correta da I.
As asserções I e II são proposições
verdadeiras, mas a II não é uma
justificativa correta da I.
A asserção I é uma proposição
verdadeira, e a II é uma proposição
falsa.
A asserção I é uma proposição falsa, e
a II é uma proposição verdadeira.
As asserções I e II são proposições
falsas.
Resposta correta
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Gabarito Comentado
A asserção I é verdadeira, pois a produção
de queijos com uso da quimosina
sintetizada por bactérias geneticamente
modificadas é considerada segura para o
consumidor do alimento, e os queijos assim
produzidos não podem ser classificados
como alimentos transgênicos. No entanto,
a asserção II é falsa. A quimosina utilizada
na fabricação de queijos, embora seja um
OGM, não é eliminada no final do processo
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produtivo. Na verdade, a quimosina
permanece no produto final, contribuindo
para a coagulação do leite e,
consequentemente, para a formação do
queijo. Portanto, a alternativa correta é a
letra C� "A asserção I é uma proposição
verdadeira, e a II é uma proposição falsa".
8 Marcarpara revisão
�Questão do Enade � Inep/2016 � Biomedicina)
Os alimentos transgênicos resultam de um
processo de modificação molecular por meio
das técnicas de engenharia genética. A
obtenção de plantas transgênicas passa por
três etapas: obtenção do gene que deve ser
incorporado em um vetor para se processar a
transformação; introdução do gene na planta
receptora; e regeneração da célula em uma
nova planta, por meio da cultura de tecidos.
(adaptado).
A respeito dos vetores utilizados na engenharia
genética, avalie as afirmações a seguir:
I. Os plasmídeos bacterianos são utilizados
como vetores de clonagem do gene de
interesse para a transformação genética em
plantas.
II. Os plasmídeos são dependentes do DNA
cromossômico para replicação, sendo
frequentemente manipulados no processo de
transformação gênica.
III. Para ser um bom vetor de clonagem, um
plasmídeo deve possuir origem de replicação,
sítios de clivagem para endonucleases de
restrição e um gene que codifique resistência a
um antibiótico.
É correto o que se afirma em:
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A
B
C
D
E
I, apenas
II, apenas
I e III, apenas
II e III, apenas
I, II e III
Resposta correta
Parabéns, você selecionou a
alternativa correta. Confira o
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Gabarito Comentado
As afirmações I e III estão corretas. A
afirmação I está correta porque os
plasmídeos bacterianos são, de fato,
utilizados como vetores de clonagem do
gene de interesse para a transformação
genética em plantas. A afirmação III
também está correta, pois para ser um bom
vetor de clonagem, um plasmídeo deve
possuir origem de replicação, sítios de
clivagem para endonucleases de restrição
e um gene que codifique resistência a um
antibiótico. No entanto, a afirmação II está
incorreta, pois os plasmídeos não são
dependentes do DNA cromossômico para
replicação. Portanto, a alternativa correta é
a C� I e III, apenas.
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9 Marcar para revisão
�Questão adaptada de concurso do
FUNDEP/2017 � UFVJM�MG � Técnico de
Laboratório/Biologia)
"Resistência aos transgênicos está caindo, diz
Abramilho. A resistência aos grãos transgênicos
está diminuindo no mundo. É em que acredita o
presidente da Associação Brasileira dos
Produtores de Milho �Abramilho), Alysson
Paolinelli. Em nota divulgada pela entidade, ele
lembra que mercados onde o plantio desse tipo
de grão é proibido, compram milho de países
onde se cultivam organismos geneticamente
modificados. 'A resistência vai caindo aos
poucos e a tecnologia vai dominando os
campos porque só traz vantagens', diz ele, no
comunicado. Paolinelli ressalta que o mercado
europeu, por exemplo, compra milho dos
Estados Unidos, do Brasil e da Argentina, onde
a tecnologia é largamente utilizada. Situação
semelhante é vista na Coreia do Sul, que, só do
Brasil, importa 4,5 milhões de toneladas do
cereal. Nesta safra, a área de milho transgênico
no Brasil deve ficar estável em relação ao ciclo
passado, informa a Abramilho com base em
dados da consultoria Celeres. A estimativa é de
15,7 milhões de hectares semeados com
organismos modificados, que somam 22
tecnologias aprovadas no país."
A resistência ao milho transgênico era motivada
por dúvidas em relação ao uso da tecnologia na
produção de vegetais para consumo humano e
animal. Embora seu uso seja comprovadamente
seguro, advogava-se que uso dessa tecnologia
estaria relacionado aos seguintes problemas
ambientais e de saúde, exceto:
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A
B
C
D
E
Diminuição da biodiversidade de
artrópodes e invertebrados.
Aumento do consumo de água para as
lavouras.
Incremento da prevalência de reações
alérgicas.
Escape gênico para plantas nativas.
Resistência microbiana aos
antibióticos.
Resposta correta
Parabéns, você selecionou a
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Gabarito Comentado
A alternativa correta é a letra B� "Aumento
do consumo de água para as lavouras". No
entanto, é importante esclarecer que o uso
de transgênicos não está diretamente
relacionado ao aumento do consumo de
água para as lavouras. As demais
alternativas apresentam problemas que
podem estar associados ao uso de
transgênicos, como a diminuição da
biodiversidade, o incremento de reações
alérgicas, o escape gênico para plantas
nativas e a resistência microbiana aos
antibióticos. Portanto, a alternativa B é a
única que não se encaixa no contexto dos
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possíveis problemas relacionados ao uso
de transgênicos.
10 Marcar para revisão
�CONSULPLAN/2010 � Prefeitura de Campo
Verde/MT � Professor � Ciências)
A engenharia genética, mais apropriadamente
chamada de tecnologia do DNA recombinante,
é um conjunto de técnicas que permite aos
cientistas identificar, isolar e multiplicar genes
dos mais diversos organismos. Essas técnicas
envolvem, frequentemente, o isolamento, a
manipulação e a introdução do DNA num
chamado ''corpo de prova'', geralmente para
exprimir um gene.
Conforme representado na figura a seguir, a
utilização de vetores é uma das principais
ferramentas dessas novas possibilidades da
engenharia genética. Essa importância do uso
de vetores se justifica por que:
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A
B
C
D
E
Os plasmídeos são encontrados no
núcleo das células eucariotas e, ao
serem transportados para as
bactérias, podem carregar genes de
interesse para serem copiados.
Vírus, lipossomos e plasmídeos, que
funcionam como vetores, têm a função
de promover a intensa proliferação da
célula de interesse, quando nela são
inseridos, como acontece com
bactérias geneticamente modificadas.
Os plasmídeos permitem a
manipulação do material genético do
DNA de todas as células, uma vez que
permitem tornar o DNA circular, de
mais fácil manuseio pelos cientistas.
Os plasmídeos são formas de DNA
bacteriano e, por não possuírem genes
vitais à bactéria, podem ser
manipulados, permitindo a inserção de
genes, sem levar a bactéria à morte.
Os lipossomos, claramente
representados no esquema acima,
constituem os principais vetores
utilizados em engenharia genética,
uma vez que são de fácil manipulação
e podem entrar e sair livremente das
células.
Resposta correta
Parabéns, você selecionou a
alternativa correta. Confira o
gabarito comentado!
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Gabarito Comentado
A resposta certa é: Os plasmídeos são
formas de DNA bacteriano e, por não
possuírem genes vitais à bactéria, podem
ser manipulados, permitindo a inserção de
genes, sem levar a bactéria à morte.