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Pós Teste Respostas enviadas em: 29/04/2024 19:26 1. A coloração de Gram diferencia as bactérias pelas propriedades químicas e físicas de suas paredes celulares. As bactérias Gram-positivas têm uma camada espessa de peptideoglicano na parede celular que retém a coloração primária (cristal violeta). As bactérias Gram-negativas têm uma camada mais fina de peptideoglicano que permite que o cristal violeta seja removido com a adição de etanol. Com base na sua aprendizagem prática no laboratório virtual, assine a alternativa que responda corretamente qual etapa deve ser realizada antes da adição do etanol. Você acertou! A. Após a coloração com cristal violeta, a próxima etapa é a adição de lugol com a função de se ligar ao cristal violeta, aumentando sua afinidade pela parede celular e formando um complexo insolúvel (CV-I); O lugol age como mordente e agente de aprisionamento, para reter o corante na parede celular bacteriana por meio da formação de um complexo formado entre cristal violeta e iodo. Resposta incorreta. B. A adição do lugol após a primeira coloração é importante para formar um complexo insolúvel (CV-I) e aprisioná-lo na parede celular de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. No entanto, apenas as bactérias Gram-positivas permanecem com a coloração roxa/violeta; O uso do lugol possibilita o aprisionamento do corante cristal violeta em todas as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, e ambas permanecem com a cor roxa/violeta. Resposta incorreta. C. Logo após a coloração com cristal violeta, utiliza-se o álcool. O álcool age diluindo a membrana lipídica externa de bactérias Gram-negativas, permitindo que a coloração roxa/violeta seja perdida e que apenas as Gram-positivas apresentem essa cor. Logo após a coloração com cristal violeta, utiliza-se o lugol. Apenas depois que é utilizado o álcool. Pós Teste Respostas enviadas em: 29/04/2024 19:26 2. Você foi responsável por analisar, por meio da metodologia de Gram, duas amostras recebidas no laboratório. Logo após a realização dos procedimentos, você observou as seguintes imagens: De acordo com seu conhecimento adquirido por meio do laboratório virtual, marque a alternativa que representa o seu diagnóstico preliminar desse teste. Resposta incorreta. A. A primeira imagem representa, com certeza, a presença de S. aureus, uma vez que ela é Gram-positiva e está corretamente corada em roxo/violeta por meio do cristal violeta; A coloração de Gram não define com precisão qual é a linhagem específica visualizada na imagem; portanto, é incorreto dizer que a amostra visualizada representa a bactéria S. aureus Resposta incorreta. B. A imagem corada em roxo/violeta representa a presença de bactérias Gram-positivas na amostra analisada. Por sua vez, a imagem corada em vermelho/rosa representa a presença fiel da bactéria E. coli, pertencente ao grupo das bactérias Gram-negativas; Em um diagnóstico preliminar, não se pode garantir a presença de uma linhagem específica utilizando-se apenas a metodologia de Gram. Você acertou! C. As amostras recebidas em laboratório passaram por quatro etapas – coloração primária, adição de lugol, descoloração com álcool e contracoloração – até se chegar à obtenção dessas imagens. A cor roxa/violeta representa a presença de bactérias Gram-positivas na amostra, enquanto a cor vermelha/rosa representa a presença de bactérias Gram-negativas. Após as quatro etapas da coloração de Gram, o diagnóstico preliminar obtido é de que a cor roxa/violeta representa o grupo de bactérias Gram-positivas, e a cor vermelha/rosa, Gram-negativas. 3. Antes de utilizar os reagentes para a metodologia de Gram com a finalidade de corar as bactérias, há a necessidade de primeiro fixar a amostra por meio do calor. Esse procedimento é realizado passando a lâmina por cima da chama azul em um bico de Bunsen algumas vezes. No laboratório virtual você realizou esse procedimento. Mas, afinal, por que você faz isso? Resposta incorreta. A. Para que ocorra alteração na morfologia bacteriana; A coloração de Gram é dependente da viabilidade bacteriana. Caso ocorra a perda da integridade morfológica (alteração), essa ocorrência levará à perda da viabilidade. Se a bactéria não é viável, não ocorrerá a coloração. Resposta incorreta. B. Para que a bactéria reaja à coloração com mais facilidade; De forma alguma a temperatura vai influenciar no processo de coloração das bactérias por meio do método de Gram. Você acertou! C. Para que as bactérias não sejam eliminadas durante as etapas de coloração. Caso as bactérias não sejam fixadas por meio do esfregaço em lâmina, quando ocorrer a adição do corante cristal violeta, do lugol, do álcool e da safranina e retirada dos excessos, não haverá mais amostras na lâmina. A coloração de Gram apresenta diversas etapas, que se iniciam com o esfregaço. Após a amostra estar fixada na lâmina, iniciam-se as etapas de coloração primária, adição de lugol, descoloração e contracoloração. Todo o procedimento é finalizado com a visualização da lâmina com o auxílio de um microscópio óptico. No experimento realizado no laboratório virtual, você percorreu todas as etapas. Levando em consideração o seu conhecimento prático e teórico adquirido, qual etapa é crucial na coloração de Gram? Você acertou! A. O esfregaço bacteriano; O esfregaço é a primeira etapa; se não for realizado de forma correta, não terá como realizar as demais etapas e obter um diagnóstico preliminar correto. Resposta incorreta. B. A adição do lugol; A adição do lugol é extremamente importante, mas apenas poderá ser realizada caso já se tenha feito o esfregaço e a coloração primária com o cristal violeta. Resposta incorreta. C. A coloração primária com cristal violeta. A primeira coloração só será bem-sucedida se a amostra estiver fixada na superfície da lâmina microscópica. Caso contrário, as bactérias não aderidas irão se dispersar e serão removidas quando houver a lavagem delicada com água destilada. Respostas enviadas em: 29/04/2024 19:26 5. Cada reagente utilizado na coloração de Gram apresenta uma função definida. O cristal violeta age como um corante primário, corando todas as bactérias. O iodo (presente no lugol) age formando um complexo com o cristal violeta, prendendo-o no interior das bactérias. O álcool age diluindo a membrana lipídica de bactérias Gram-negativas, liberando o cristal violeta para fora delas. A contracoloração com safranina age corando as bactérias Gram-negativas de vermelho/rosa. Após a realização desse procedimento experimental no laboratório virtual, qual a função do mordente na reação de Gram? Você acertou! A. Fixar o corante primário (cristal violeta) na parede celular de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas; O lugol age como um agente mordente e aprisionador. Isso ocorre com a formação de um complexo insolúvel entre iodo e cristal violeta, ficando retido na parede celular das bactérias. Resposta incorreta. B. Fixar o contracorante safranina nas bactérias Gram-negativas; A safranina fixa-se na parede de bactérias Gram-negativas sem a presença/necessidade de um agente mordente. Resposta incorreta. C. O agente mordente é o álcool, o qual promove a remoção do corante primário de bactérias Gram-negativas pela diluição da membrana lipídica externa. Por sua vez, não promove a remoção do corante primário de bactérias Gram-positivas. Embora o álcool promova a descoloração de bactérias Gram-negativas, e não de Gram-positivas, ele não é considerado um agente mordente, e sim um agente descolorante.
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