Laboratório de Microbiologia

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1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO 
CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 
E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br 
 
LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
COLORAÇÃO DE GRAM 
 
INSTRUÇÕES GERAIS 
 
 
1. Neste experimento, você irá executar os procedimentos adequados para 
promover experimentos de microbiologia. Dessa forma, você poderá analisar os 
resultados desses experimentos e se precaver de eventuais resultados 
inesperados. 
 
2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da 
experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do 
VirtuaLab. 
 
3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial 
VirtuaLab” presente neste Roteiro. 
 
4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as 
instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 
 
5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação 
de Resultados”. 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
RECOMENDAÇÕES DE ACESSO 
 
 
 
PARA ACESSAR O VIRTUALAB 
 
ATENÇÃO: 
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO 
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE 
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. 
 
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 
 
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 
 
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 
 
4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 
 
5. Realize teste de velocidade da internet. 
 
Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos 
Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção 
de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://cliente.grupoa.com.br. 
Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com 
nossa central de suporte. Conte conosco! 
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https://cliente.grupoa.com.br/
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
PERGUNTAS FREQUENTES 
 
 
1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. 
 
d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> 
“Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o 
computador. 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente 
novamente. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Verifique se o navegador está atualizado. 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO 
 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS 
 
• Microscópio; 
• Lâminas; 
• Acendedor; 
• Espátula; 
• Bico de Bunsen; 
• Pinça metálica; 
• Pissetas; 
• Soro fisiológico; 
• Óleo de imersão; 
• Lugol; 
• Violeta de genciana; 
• Álcool etílico; 
• Fucsina. 
 
PROCEDIMENTOS 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de 
EPIs”. 
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
2. PREPARANDO A AMOSTRA 
 
Inicialmente, goteje o soro fisiológico na lâmina. Feito isso, utilizando a alça 
inoculadora retire uma pequena porção da amostra biológica que será 
examinada. 
 
3. FIXANDO O MATERIAL NA LÂMINA 
 
Abra a válvula do bico de Bunsen e ajuste uma chama azul, redutora. Passe 
rapidamente a lâmina à chama do bico de Bunsen, três vezes para fixar o 
material. 
 
4. COLORINDO A AMOSTRA 
 
Leve a lâmina para a pia. Em seguida, cubra a lâmina com cristal violeta por 
aproximadamente 1 minuto. Depois, enxague em água corrente. Cubra a lâmina 
com lugol, também por 1 minuto e, em seguida, lave a lâmina com água 
corrente. Molhe a lâmina com álcool por aproximadamente 10 segundos e 
enxague com água corrente. Por fim, cubra a lâmina com fucsina por 30 
segundos e lave em água corrente. 
 
5. OBSERVANDO O RESULTADO 
 
Mova a lâmina para o microscópio. Execute todas os ajustes necessários para 
visualização. Goteje o óleo de imersão sobre a lâmina, para uma melhor análise, 
e selecione a objetiva de 100x. Observe o resultado através da lente ocular. 
Anote suas impressões. 
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
6. REPETINDO OS PROCEDIMENTOS COM AS OUTRAS LÂMINAS 
 
Após realizar todo procedimento, realize o mesmo procedimento com as 
lâminas 2 e 3. 
 
7. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação de Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo 
com o que foi observado nos experimentos. 
 
8. FINALIZANDO O EXPERIMENTO 
 
Faça a limpeza de todos materiais utilizados, retire a lâmina do microscópio e 
desligue-o. 
 
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 
 
 
 
1. Analisando a coloração obtida na primeira lâmina, é possível determinar se o 
resultado é Gram positivo ou negativo? Caso seja possível, classifique justificando a 
resposta. 
 
 
 
 
 
 
2. Qual objetivo de realizar o experimento em 3 lâminas? O que se espera observar? 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
TUTORIAL VIRTUALAB 
 
 
 
 
Os equipamentos de proteção individual são obrigatórios para a realização do 
experimento. Dessa forma, acesse a câmera“EPIs”, clicando com o botão esquerdo do 
mouse sobre o menu lateral esquerdo. 
 
Abra as portas do armário, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre elas. 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
Selecione os EPIs necessários ao experimento, clicando com o botão esquerdo do mouse 
sobre eles. Os EPIs utilizados serão: jaleco, luvas de látex e óculos de proteção. 
 
 
 
Após ter selecionado todos os EPIs, eles aparecerão no comando “EPI”. Clique com o 
botão esquerdo do mouse sobre seu ícone em destaque. 
 
 
 
Acesse a câmera “Lâminas”, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o menu 
lateral esquerdo. 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 
 
Inicialmente, goteje o soro fisiológico na lâmina, clicando com o botão direito do mouse 
sobre o conta-gotas e selecionando a lâmina que deseja gotejar a solução. 
 
 
 
Logo depois, adicione um pouco da amostra biológica à superfície da lâmina, clicando 
com o botão direito do mouse sobre a alça inoculadora. Em seguida, escolha em qual 
lâmina depositará a amostra. 
 
 
2. PREPARANDO A AMOSTRA 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 
 
Acesse a câmera “Bico de Bunsen”. 
 
 
 
Abra a válvula que permite a passagem do gás, clicando com o botão esquerdo do mouse 
sobre a válvula. 
 
 
 
3. FIXANDO O MATERIAL NA LÂMINA 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
Inicie a configuração da chama do bico de Bunsen, clicando com o botão esquerdo do 
mouse sobre a válvula em destaque. 
 
 
 
Configure as intensidades, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre os 
parâmetros exibidos no menu inferior esquerdo da tela. 
 
 
 
 
 
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Acenda o bico de Bunsen, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o acendedor 
posicionado sobre a mesa. 
 
 
 
Certifique-se que a configuração utilizada é para chama azul, redutora. Caso a chama 
não esteja conforme demonstrada abaixo, configure a chama no menu inferior esquerdo 
em destaque. 
 
 
 
 
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Acesse a câmera “Lâminas”. 
Realize a fixação da amostra, clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e 
selecionando a opção “Colocar no Bico de Bunsen”. 
 
 
 
Acesse a câmera “Bico de Bunsen” e acompanhe o processo de fixação da amostra. 
 
 
 
Note que a lâmina entrará em contato com a chama rapidamente por três vezes. Após 
isso, a lâmina retornará automaticamente para mesa. Portanto, retorne para a câmera 
“lâminas” para dar continuidade a prática. 
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Leve a lâmina para a pia, clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina e 
selecionando a opção “Colocar no Suporte”. 
 
 
 
Acesse a câmera “Pia e soluções”. 
Comece a coloração da lâmina encharcando-a com o cristal violeta, clicando com o 
botão esquerdo do mouse sobre a pisseta contendo a solução. 
 
 
4. COLORINDO A AMOSTRA 
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Despeje a violeta-de-genciana, clicando e segurando o botão esquerdo do mouse sobre 
a pisseta com a solução. 
 
 
 
Atente-se ao tempo recomendado que a solução deve ficar na lâmina. Neste caso, 1 
minuto. Um cronômetro aparecerá na tela para auxiliar o processo. Aumente a escala 
de tempo para acelerar o processo. 
 
 
 
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Em seguida, lave em água corrente, clicando com o botão direito do mouse sobre a 
lâmina e selecionando a opção “Lavar em água corrente”. 
 
 
 
Repita o mesmo processo para o lugol, o álcool e a fucsina, respectivamente. 
Em seguida, retorne a lâmina para a mesa, clicando com o botão direito do mouse sobre 
a lâmina e selecionando a opção “Colocar na mesa”. 
 
 
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 
 
Acesse a câmera “Lâminas”. 
Coloque a lâmina sobre a platina, clicando com o botão direito do mouse sobre a lâmina 
e selecionando a opção “Colocar no microscópio”. 
 
 
 
Acesse a câmera “Microscópio”. 
Em seguida, ligue a luz, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o interruptor. 
 
 
5. OBSERVANDO O RESULTADO 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
Passe o cursor do mouse sobre o microscópio para identificar as áreas de 
movimentação. Atente-se a instrução que, para movimentação, deve-se clicar com o 
botão esquerdo do mouse sobre a área desejada e movimentar o cursor do mouse para 
direita ou esquerda. 
 
 
 
Acione a visualização da lente ocular para examinar o material da lâmina, clicando com 
o botão esquerdo do mouse sobre a opção ocular. 
 
 
 
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Gire o canhão do microscópio para direita, passando pelas objetivas 4x > 10x, até chegar 
a 40x, objetiva anterior a de 100x. 
 
 
 
Antes de chegar a objetiva de 100x, goteje o óleo de imersão, clicando com o botão 
esquerdo do mouse sobre o conta gotas. 
 
 
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
Em seguida, gire mais uma vez o revólver do microscópio para chegar a objetiva de 100x. 
 
 
 
Se necessário, efetua as configurações de posicionamento dos parafusos, condensador 
e diafragma, para auxiliar a visualização do ocular. Lembre-se que, para movimentação, 
deve-se clicar com o botão esquerdo do mouse sobre a área desejada e movimentar o 
cursor do mouse para direita ou esquerda. 
 
 
 
 
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COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 
 
Após realizar todo procedimento, realize o mesmo procedimento com as lâminas 2 e 3. 
 
 
 
 
Siga para a seção “Avaliação de Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo com o 
que foi observado no experimento. Caso seja necessário, retorne e visualize a lente 
ocular para auxiliar a avaliação dos resultados. 
 
 
 
 
Faça a limpeza de todos materiais utilizados, retire a lâmina do microscópio e encerre o 
experimento. 
 
 
7. ANALISANDO OS RESULTADOS 
8. FINALIZANDO O EXPERIMENTO 
6. REPETINDO OS PROCEDIMENTOS COM AS OUTRAS LÂMINAS 
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