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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE CENTRO DE BIOCIÊNCIAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR E GENÉTICA Guia de estudo: CITOESQUELETO 1. O citoesqueleto é uma complexa rede de filamentos proteicos presente nas células eucarióticas, essencial para a manutenção da forma celular, organização de organelas, movimento de vesículas, contração e migração celular, além de diversos processos celulares. Com base em seus conhecimentos sobre a estrutura e função do citoesqueleto, responda: a) Quais são os principais tipos de filamentos que compõem o citoesqueleto e quais as proteínas que os formam? b) Descreva o processo de polimerização dos filamentos de actina, microtúbulos e filamentos intermediários, destacando as principais diferenças entre eles. c) Identifique os tipos celulares onde os filamentos intermediários são encontrados em maior abundância Que tecidos irão requerer abundância em microtúbulos? d) A polimerização dos microfilamentos de actina e seu arranjo em feixes organizados são cruciais para a locomoção celular. Cite exemplos de células que empregam microfilamentos de actina para realizar tanto movimentos contráteis quanto não contráteis, e explique como o arranjo e a polimerização contribuem para a dinâmica de cada tipo de movimento. e) Dentre os filamentos do citoesqueleto, qual deles está presente no núcleo e qual sua função? f) Como ocorre a dinâmica dos três tipos de filamentos do citoesqueleto durante o processo de divisão celular? 2. O citoesqueleto desempenha um papel fundamental na manutenção da forma e função celular. Discuta como as alterações nos filamentos do citoesqueleto podem levar ao desenvolvimento de diferentes doenças. Cite exemplos específicos de doenças relacionadas a cada tipo de filamento (microfilamentos, microtúbulos e filamentos intermediários), correlacionando-as com os principais sintomas e mecanismos patogênicos. 3. Os filamentos intermediários desempenham um papel fundamental na manutenção da integridade celular e tecidual. Discuta a especificidade dos filamentos intermediários em diferentes tipos celulares e sua importância na patogênese do câncer. Além disso, explore o potencial diagnóstico das proteínas de filamentos intermediários em diferentes tipos de tumores. 4. O centrossomo é uma estrutura celular essencial para diversos processos celulares. Descreva a estrutura do centrossomo e explique detalhadamente seu papel na organização do citoesqueleto e na divisão celular. 5. A instabilidade dinâmica é uma característica marcante dos microtúbulos e microfilamentos de actina, conferindo ao citoesqueleto uma alta plasticidade. Com base nessa propriedade, responda: a) De que forma a instabilidade dinâmica contribui para a versatilidade funcional do citoesqueleto, permitindo que a célula execute uma ampla gama de processos celulares se adaptando a demandas fisiológicas? b) Quais são os principais fatores moleculares que regulam a polimerização e despolimerização dos microtúbulos e microfilamentos de actina, respectivamente? c) Embora a instabilidade dinâmica seja uma característica comum, algumas estruturas celulares apresentam microtúbulos e microfilamentos de actina com estabilidade aumentada. Cite exemplos de estruturas celulares que possuem esses filamentos estáveis e explique os mecanismos que conferem essa estabilidade." actina com ADP actina com ATP FILAMENTO INTERMEDIÁRIO Citoqueratinas N eurofilamentos (NF-L, NF-M e NF-H) Laminas A/C No tecido conjuntivo, células musculares e neuroglias Nas células nervosas Nos epitélios Em todas as células nucleadas LÂMINA NUCLEAR Vimentina e vim. relacionadas NUCLEAR CITOPLASMÁTICO Moléculas de tubulina GTP adicionadas à extremidade do microtúbulo Pró filamentos contendo tubulina GDP são instáveis e se soltam da parede do microtúbulo Moléculas de tubulina ligada ao GDP MICROTÚBULOS EM CRESCIMENTO Quepe de A adição ocorre mais rapidamente do que a hidrólise de GTP MICROTÚBULOS EM RETRAÇÃO tubulina GDP é liberada no citosol Moléculas de tubulina ligadas a GTP 6. A colchicina e o taxol são alcalóides com aplicação farmacológica utilizados na quimioterapia, alvejando a dinâmica dos microtúbulos para inibir a proliferação celular. Além de seu papel na terapia antineoplásica, esses fármacos encontram aplicações em outras áreas da biologia celular. Considerando a ação da colchicina e do taxol sobre os microtúbulos, responda: a) Detalhe os mecanismos pelos quais a colchicina e o taxol interferem na dinâmica dos microtúbulos, levando à inibição da proliferação celular. b) Discuta as aplicações da colchicina em outras doenças relacionadas à disfunção do citoesqueleto, além do câncer. Cite exemplos específicos e explique os mecanismos de ação. c) Além da colchicina e do taxol, existem outras drogas que atuam sobre os filamentos do citoesqueleto. Cite um exemplo e explique seu mecanismo de ação. d) Explique como a colchicina é empregada nos estudos de citogenética. 7. Descreva como cada um dos três tipos de filamentos do citoesqueleto (microfilamentos de actina, microtúbulos e filamentos intermediários) contribui para os processos de divisão celular e transporte intracelular. Utilize exemplos específicos para ilustrar suas respostas. 8. Quais são as principais proteínas motoras associadas aos microtúbulos e aos microfilamentos de actina? Descreva as características e funções de cada uma dessas proteínas, e como elas contribuem para o transporte intracelular. Utilize exemplos específicos de vesículas e organelas transportadas por cada tipo de proteína motora." carga cauda Cabeça CINESINA carga cauda Cabeça EXTREMIDAD E “MAIS” microtúbulos DINEÍNA EXTREMIDAD E “MENOS” ATENÇÃO Na figura ao lado podemos observar motoras como as proteínas Cinesina e Dineína acopladas a membrana da vesícula por proteínas acessórias (cinectina e dinactina), podem retornar para efetuar novo transporte de vesículas nas direções da secreção e endocitose, respectivamente. FUNÇÕES DA MIOSINA EM CÉLULAS A cauda curta da miosina I contém sítios de ligação para componentes celulares e permite seu deslocamento em relação aos Filamentos de actina Os filamentos de miosina II promovem o deslizamentos de filamentos de actina uns sobre os outros Deslocamento de um filamento em relação ao Membrana plasmática 9. Existem diferentes tipos de dineínas, cada uma com funções específicas. Discuta os diferentes tipos de dineínas encontradas nos cílios e flagelos, e como suas atividades coordenadas geram o movimento ciliar. Explique como as mutações em genes que codificam diferentes subunidades da dineína podem levar a diferentes fenótipos da Síndrome de Kartagener (Discinesia Ciliar primária). Miosina I DINEÍNA CAUSA FLEXÃO DO MICROTÚBULO FLAGELO NORMAL flexão Proteínas de ligação Braço externo da dineína Microtúbulo central Braço interno da dineína Membrana Microtúbos externos Miosina I vesícula Miosina II 10. Descreva os mecanismos moleculares que levam à contração muscular, desde o potencial de ação até o encurtamento do sarcômero. Qual o papel do cálcio nesse processo? Quais são as principais proteínas envolvidas e como elas interagem entre si? 11. Quais os mecanismos que promovem a formação de pseudópodes e a locomoção em células que realizam movimento ameboide. Explique como a polimerização e despolimerização da actina, juntamente com a ação de proteínas motoras, contribuem para esse tipo de movimento. 12. Explique como as células do sistema imune, como os neutrófilos, utilizam o movimento ameboide para migrar para os locais de infecção. Como as células cancerígenas se aproveitam desse mecanismo para invadir outros tecidos?"