Princípios de microscopia e citologia vegetal parte 2

Prévia do material em texto

TÉCNICAS PARA PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS
· Para que possamos analisar as estruturas vegetais assim como são na natureza, é necessário que utilizemos técnicas no objetivo de garantir a integridade da amostra.
· COLETA:
· Tesoura de poda
· Representatividade
· Quantidade
· Manutenção das características 
· Momentos frescos do dia
· Transporte através de sacos plásticos umedecidos com água
· Local distante do laboratório: fixação imediata
· Amostras com aspectos morfológicos de acordo o objetivo de estudo
· Fixação(garantir a preservação)
· Tipos de fixadores
· Tamanhos de amostra x volume de fixador
· Tempo e velocidade
· FAA: Fixador químico mais usado.
· Kornovsky: Penetração mais lenta (amostra menor)
· Depedendo do objetivo, a etapa de fixação do material pode ser dispensada desde que seja possível preservar as características de vegetal ate que o processamento e as analises sejam feitos.
· Confecção das lâminas
· Lâminas temporárias: Descartáveis (Água e água glicerinada)
· Lâminas Semipermanentes: Preparada com gelatina glicerinada como meio de montagem, duração de semanas
· Lâminas permanentes: Preparada com resina como meio de montagem, dura anos
· Seccionamento
· Lâminas de barbear (material fresco ou fixado em isopor)
· Micrótomos, consegue cortar mais fino a amostra (material fresco, fixado ou emblocado)
· Cortes:
· Corte transversal: Secção realizada perpendicularmente ao maior eixo do órgão
· Corte longitudinal: Secção realizada paralelamente ao maior eixo do órgão 
· Radial
· Tangencial
· Paradérmico: Secção realizada paralelamente a superfície do órgão 
 
· Coloração
· Realiza o contraste dos diferentes tipos celulares, facilitando a percepção
· Safrablau (Dupla coloração): 
· É azul
· Colore de azul os polissacarídeos 
· Colore de vermelho assafrinina
· Azul de toluidina (Metacromasia)
· Cores diferentes de acordo com a composição química (azul, roxo e verdes)
· Testes histoquímicos 
· Localizar lipídios
· Montagem
· Lâminas
· Lamínula (bem fina)
· Meios de montagem:
· Água: minutos de uso
· Água glicerinada: Horas ou dias de uso
· Gelatina glicerinada: semanas ou meses
· Resinas: Anos
· O organismo vegetal é formado de órgãos (raiz, caule, folhas, flores e frutos), que se compõem de tecidos, os quais são conjuntas de células, homogêneas quanto a origem, a forma, organização e funções. Nesse sentido, a anatomia das espermatófitas (plantas com sementes) estuda a estrutura interna dos órgãos vegetais.
A CÉLULA (cela ou compartimento)
· Existem dois grupos distintos de células, as procariontes (células simples - com estrutura simples e não apresenta núcleo, sendo assim seu material genético é disperso no citoplasma) e as eucariontes (células complexas, estrutura complexa e núcleo bem definido).
· Célula procarionte: 
· Seres procariontes:
· Bactérias
· Cianobactérias 
· Arqueos
· Célula eucarionte:
· São as células que apresentam núcleo, ou seja, apresentam o material genético envolvido pelo envoltório nuclear, o qual é constituído por duas membranas concêntricas.
TIPOS DE CELULAS EUCARIONTES
ANIMAL
· É a unidade básica dos animais e dos humanos. Esse tipo de célula eucariótica é composta por citoplasma, núcleo celular e organelas membranosas como mitocôndrias, complexo de Golgi, lisossomos, ribossomos, retículo endoplasmático, entre outras.
VEGETAL(Célula que é foco do nosso estudo)
·  É a unidade estrutural e funcional das plantas.
COMPONENTES DA CÉLULA EUCARIONTE VEGETAL
· APOPLASTO
· O apoplasto é como um vasto território que envolve e conecta todas as células vegetais, formado pelas paredes celulares e pelos espaços intercelulares preenchidos por uma matriz rica em água, proteínas e outras moléculas. Essa matriz, também chamada de apoplasto líquido, serve como um canal de comunicação e transporte para diversas substâncias, como água, minerais, açúcares e hormônios vegetais.
Características do Apoplasto:
· Espaço contínuo: O apoplasto forma um continuum intercelular, conectando todas as células vegetais de um órgão ou tecido.
· Permeável: A matriz apoplasto permite a livre passagem de água e moléculas de pequeno porte, facilitando o transporte de nutrientes e outras substâncias.
· Funções: O apoplasto desempenha funções essenciais, como:
· Transporte de água e nutrientes: A matriz apoplasto facilita o transporte de água e nutrientes do solo para o interior das células.
· Comunicação celular: Permite a comunicação entre as células vegetais através de moléculas sinalizadoras.
· Armazenamento de substâncias: O apoplasto pode armazenar substâncias como enzimas, proteínas e metabólitos secundários.
· Defesa contra patógenos: A matriz apoplasto atua como uma barreira contra patógenos, contendo substâncias antimicrobianas e enzimas digestivas.
· PROTOPLASTO
· O protoplasto é como um reino dentro da célula vegetal, formado pelo citoplasma, membrana plasmática e todas as organelas celulares, exceto a parede celular. É a parte viva da célula, onde ocorrem os principais processos metabólicos, como respiração, fotossíntese, síntese de proteínas e replicação do DNA.
Características do Protoplasto:
· Espaço limitado pela membrana plasmática: O protoplasto é delimitado pela membrana plasmática, uma barreira semipermeável que regula a entrada e saída de substâncias da célula.
· Composto por citoplasma e organelas: O citoplasma é a matriz gelatinosa que preenche o interior do protoplasto e suspende as organelas, como mitocôndrias, retículo endoplasmático, complexo de Golgi, vacúolos e plastídios.
· Local das reações bioquímicas: O protoplasto é o palco de diversos processos bioquímicos essenciais para a vida da célula vegetal, como respiração, fotossíntese, síntese de proteínas e replicação do DNA.
CINTOPLASTO
· O cintoplasto é um tipo especial de plastídio, organelas presentes nas células vegetais que realizam a fotossíntese. Eles contêm clorofila, um pigmento verde que absorve a luz solar, e outras moléculas essenciais para a conversão de energia luminosa em energia química na forma de ATP e NADPH.
Características do Cintoplasto:
· Presença de tilacóides: Os cintoplastos possuem tilacóides, membranas saculares onde se encontram os pigmentos fotossintéticos, como a clorofila.
· Local da fotossíntese: A fotossíntese, processo de conversão da luz solar em energia química, ocorre nos tilacóides dos cintoplastos.
· Estrutura interna: Os cintoplastos podem apresentar diferentes formas e estruturas internas, como grana e estroma.
· Adaptações à luz: Os cintoplastos podem se adaptar à intensidade e qualidade da luz, ajustando sua estrutura e pigmentação.
PAREDE CELULAR
· Compartimento metabolicamente dinâmico com funções muito especificas.
· As células vegetais formam tecido por serem ligadas umas nas outras. O que as mantém unidas umas às outras é a lamela média – que é um cimento celular de pectina.
· Apoplasto
· Definição: É o espaço fora da membrana plasmática 
· Características: Permite a passagem de água e solutos, sem atravessar a membrana celular. É importante para o transporte de substâncias nas plantas e estabelece a comunicação com o ambiente.
· Simplasto
· Definição: É o conjunto formado pelo citoplasma das células vegetais, incluindo os plasmodesmos que conectam as células.
· Plasmodesmos: São canais citoplasmáticos, presentes nas paredes primarias, que conectam as células adjacentes.
· Características: Permite a comunicação direta entre as células vegetais, facilitando o transporte de substâncias e a coordenação de atividades celulares.
· Funções: Desempenha papel na seleção e transporte de sais minerais e na regulação da quantidade de agua que segue para o xilema.
FUNÇÕES DA PAREDE CELULAR
· Manter a forma da célula (Semirrígida, maleável até certo ponto)
· Manter a integridade da célula (protege de possíveis rupturas)
· Atua no crescimento da célula (afrouxamento da parede celular para o crescimento da célula )
· Barreira física: Com aspecto poroso, onde as substâncias menores que os buracos da parede passam por ela.
· Sítios de enzimas (compartimentos dinâmicos) e proteínas 
·Armazenamento de produtos de reserva
· Sinalização (diferenciação celular ou reconhecimento de ataque de patógenos)
· Importância econômica 
· Celulose (papel)
· Tintas
· Resinas
COMPONENTES DA PAREDE CELULAR
· Celulose:
· Um tipo de açúcar homogêneo 
· É um polissacarídeo formado por várias moléculas de glicose ➡ 1 micro fibrilas de celulose (centenas de cadeias de celulose) ➡ macro fibrilas (ligações de hidrogênio)
· É o principal componente estrutural da parede, sendo essencial para sua rigidez e função de suporte.
· OBS.: O complexo de roseta é a estrutura responsável pela síntese da celulose.
· Hemicelulose
· Heterogêneo: vários tipos de açúcar
· Menos rígidos que a celulose
· Contribui para o controle da expansão celular, pois se associam às microfibrilas de celulose, limitando a extensibilidade da parede celular
· Pectina
· Altamente hidrofílica (absorvem muita água) 
· Consistência de gelatina 
· Ausente na parede secundaria
· Relacionada à flexibilidade e porosidade das paredes celulares 
· Proteínas: Variam de acordo com os tipos de células e tecidos
· Lignina
· Composto hidrofóbico responsável pela impermeabilização das paredes celulares.
· Na mesma espécie de célula podem ter paredes diferentes
· A partir do conhecimento da estrutura da parede é possível definir o tecido
image1.png
image2.jpg