exercícios de biologia molecular

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procurou uma clínica especializada para realizar alguns exames prescritos por seu Um deles, realizar 5) Um sequenciamento de uma região do exon 1 do gene G a) resultado apontou uma mutação A>G na amostra do e para interpretá-lo, deve-se adotar a fase 2 de leitura ao utilizar a sequência em destaque. Qual seria sua análise como responsável técnico? (1,0 ponto) A Phe UCU UAU UGU Cys UUC UAC Tyr UGC U UUA Leu UCA Ser UAA Parada UGA Parada UUG Leu UCG Ser UAG Parada CUU Leu CCU Pro CAU His CGU Arg Leu CCC Pro CAC His CGC Arg CUA Leu CCA Pro CAA Gin CGA Arg CUG Leu CCG Pro CAG CGG Arg AUU ACU AAU Asn AGU Ser AUC ACC The AAC Asn AGC A AUA ACA AAA AGA Arg AUG Met ACG Thr AAG Lys AGG Arg GUU Val GCU Ala GAU Asp GGU Gly GUC Val GCC Ala GAC Asp GGC Gly G GUA Val GCA Ala GAA Glu GGA Gly GUG Val GCG Ala GAG Glu GGG Gly b) Se você quisesse realizar a PCR para amplificar a sequência acima, qual(is) desses primers você utilizaria? Justifique. (1,0 ponto) I) II) 5'-TATTGCITA-3'; III) 5'-GGTCCCGAC-3'; IV) 5'-ATAACGAAT-3'; V) 5'-TAAGCAATA-3' 6) Um pesquisador deseja inserir um fragmento no vetor B e para tal, utilizará duas abordagens: Construção I: Digestão dupla da sequência A e vetor utilizando as enzimas EcoRV/Sall e, posterior, ligação do fragmento resultante de A no vetor B; Construção II: Digestão dupla do fragmento A e vetor utilizando as enzimas EcoRI/Pstl e, posterior, ligação do fragmento resultante de A no vetor B. vetor escolhido foi pBR322, que possui e uma origem de replicação. HindIII EcoRI EcoRV BamHI 185 4000 375 Sall Pstl 651 3607 tet 1000 pBR322 4361 bp 3000 ori A Pstl Sall EcoRl EcoRV 2000 2295 200 50 2000 800 bp Quais duas construções foram utilizadas para transformar bactérias competentes. Como o (1,0 pesquisador ponto) seriam tamanhos, em pares de base (pb), das duas construções (I e II)? Justifique. (1,0 ponto) Posteriormente, cionaria as bactérias essas transformadas com as construções I ou II? Justifique utilizando duas metodologias.