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Aula de Bases de Biologia Celular e Génetica (ARA0007) - Aula 08 Professora Msc Ingrid Vicente Farias Duplicação ou Replicação do DNA DNA Armazena o código genético Controle do metabolismo celular Estrutura helicoidal em dupla hélice, composta por duas cadeias nucleotídicas, que são mantidas unidas por ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas. Duplicação ou Replicação do DNA Duplicação de DNA = Replicação Ocorre na fase S da intérfase (etapa da divisão celular) Os pares de bases nitrogenadas são unidos entre si por ligações de hidrogênio: a adenina e a timina formam duas ligações entre si, enquanto a guanina e a citosina formam três ligações. Duplicação ou Replicação do DNA Processo que precede a divisão celular e através do qual são geradas cópias idênticas das moléculas de DNA presentes na célula-mãe, a seguir herdadas pelas duas células-filhas Para a formação da molécula de DNA, é necessária a união entre os nucleotídeos por meio de ligações covalentes, que ocorrem da seguinte maneira: o grupo hidroxila do carbono-3 da pentose, pertencente ao primeiro nucleotídeo, liga-se ao grupo fosfato, que se encontra ligado à hidroxila do carbono-5 da pentose do segundo nucleotídeo, por meio de ligações fosfodiéster. Duplicação ou Replicação do DNA https://conteudo.ensineme.com.br/sa/00711/intro?brand=estacio Por isso, a formação do DNA é direcionada sempre na direção de 5’-3’, já que, em uma extremidade, está disponível a hidroxila do carbono-5 da primeira pentose e, na outra extremidade, está livre a hidroxila do carbono-3 da última pentose. Duplicação ou Replicação do DNA Duplicação ou Replicação do DNA O DNA se autoduplica e isso ocorre por meio de um processo semiconservativo, no qual cada molécula de DNA recém-formada é exatamente igual à molécula de DNA que a originou, ou seja, a nova fita de DNA é complementar à fita de DNA que serviu de molde. Duplicação do DNA é semiconservativa Ela é mediada por uma enzima (Helicase), que vai rompendo as ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas, por dentro da molécula de DNA, permitindo que as duas fitas se separem. Duplicação ou Replicação do DNA Duplicação ou Replicação do DNA A replicação do DNA se inicia com a enzima helicase, que é responsável pela separação das duas fitas de DNA, ou seja, promove o rompimento da dupla hélice, formando duas fitas simples de DNA, o que resulta em uma forma de Y, denominada forquilha da replicação. Duplicação ou Replicação do DNA A enzima DNA-polimerase usa as fitas separadas como molde, pois, com os nucleotídeos das fitas expostos, são adicionados nucleotídeos complementares a cada uma dessas duas fitas, resultando em novas fitas complementares. Com isso, ao final do processo, temos duas novas fitas e cada dupla hélice filha possui uma fita intacta do seu genitor. Duplicação ou Replicação do DNA Duplicação ou Replicação do DNA Para evitar que as fitas se liguem novamente, as proteínas ligantes de fita simples (SSB), se encarregam de deixar livres os nucleotídeos das fitas de DNA que acabaram de se separar (na região da forquilha da replicação) para que novos nucleotídeos dispersos no nucleoplasma se liguem e formem a nova fita complementar. Duplicação ou Replicação do DNA Para evitar que as fitas se liguem novamente, as proteínas ligantes de fita simples (SSB), se encarregam de deixar livres os nucleotídeos das fitas de DNA que acabaram de se separar (na região da forquilha da replicação) para que novos nucleotídeos dispersos no nucleoplasma se liguem e formem a nova fita complementar. Duplicação ou Replicação do DNA Sintetizada a partir de fragmentos curtos e em sentido contrário à fita principal Fita continua 5’—3’ Fita tardia ou descontinua As lacunas entre os fragmentos são, posteriormente, ligadas pela enzima DNA ligase. Isso transforma a fita tardia em uma fita contínua. Fragmentos de OkazakiTrechos de novos DNA para a fita tardia Duplicação ou Replicação do DNA Ao fim da replicação, haverá duas moléculas de DNA exatamente iguais, cada uma apresentando uma fita nova e uma antiga pertencente à molécula original. Por que a replicação do DNA é tão importante? A replicação do DNA ocorre cada vez que uma célula do organismo se divide. É um processo que deve ser muito preciso, para que não ocorram erros no momento da adição dos nucleotídeos e a nova fita de DNA seja idêntica à fita molde. Apesar disso, a existência de erros é comum, mas as células possuem mecanismos de controle para eliminar os erros: trata- se das verificações e dos reparos do DNA. Por que a replicação do DNA é tão importante? As polimerases, por exemplo, fazem um trabalho de revisão do pareamento das bases nitrogenadas. Se, após a formação da molécula de DNA, ainda houver alguma base mal pareada, ela será substituída pelo reparo por mal pareamento. Porém, se caso o DNA seja danificado, outros mecanismos podem fazer o seu reparo: química reversa, reparo de excisão e reparo de quebras de fita dupla, são exemplos. Ainda, a célula pode entrar em processo de morte programada (apoptose) em alguns casos, de forma que o DNA danificado não seja transmitido a novas células que serão formadas. Transcrição RNA O que é o RNA? É uma molécula orgânica que tem uma estrutura muito parecida com a do DNA, mas que difere pela presença do açúcar ribose no nucleotídeo, no lugar da desoxirribose. Assim, o nucleotídeo do RNA é composto por: base nitrogenada + ribose + fosfato. Outra diferença entre o nucleotídeo de RNA para o de DNA é que ele não possui timina, em seu lugar entra uracila (U). RNA - Transcrição A transcrição é a síntese de RNA a partir do DNA. É um processo que ocorre no núcleo dos eucariotos e no citoplasma dos procariotos. Por que ocorre a transcrição? Este processo ocorre durante a intérfase, etapa do ciclo celular, e consiste na transferência de informações genéticas contidas no DNA para o RNA para que possa ocorrer a síntese de proteínas, conforme as necessidades da célula. Este, portanto, é o objetivo da transcrição! O RNA é uma molécula monofilamentar e é transcrito através de trechos específicos contidos no DNA, que são chamados de genes ou cístrons. A transcrição é catalisada pela enzima RNA polimerase. RNA - Transcrição RNAm (mensageiro) - é sintetizado no núcleo e exportado para o citoplasma, onde tem a função de definir a posição dos aminoácidos na molécula de proteína. RNAr (ribossômico) - também sintetizado no núcleo e exportado para o citoplasma, onde capta os aminoácidos dispersos e os conduz até o sítio de síntese de proteína. RNAt (transportador) - faz a ligação entre o RNAm e o RNAt na síntese de proteínas. Ribossomos O processo de síntese de proteínas conta com algumas moléculas RNA - Transcrição Definição: processo de síntese de uma molécula de ácido ribonucleico complementar a uma fita template de DNA. Vamos investigar.... RNA – Transcrição X Replicação Semelhanças: Ambos sintetizam uma fita de polinucleotídeos complementar a uma fita de DNA molde antiparalela Ambos usam nucleotídeos trifosfatados como precursores A química da síntese é a mesma que ocorre sempre no RNA – Transcrição X Replicação Diferenças Os precursores são rNTPs e não dNTPs A reação é catalisada por uma RNA polimerase dependente de DNA RNA polimerase não precisam de primer A transcrição ocorre em uma bolha e não uma forquilha RNA – Transcrição X Replicação A bolha de transcrição Uma região de aprox. 13 pares de bases do DNA é desenrolada para a transcrição RNA – Transcrição X Replicação Diferenças O transcrito de RNA não permanece associado à fita molde de DNA Processo menos preciso que a replicação (incorporações de bases erradas= 1x104) A transcrição é assimétrica Assimetria da transcrição Apenas 1 das fitas de DNA é copiada Por isso uma das fitas de DNA é denominada de fita codificadora e a outra de fita molde Assimetria da transcrição Fita codificadora: A fita de DNA que tem a mesma sequencia do RNAm e é relacionada pelo código à sequencia proteica codificada pelo gene Maturação do RNAm O processo de formação de RNAm é feito a partir da transcrição de trechos do DNA (cístrons) e que partes são transcritas e formarão moléculas de proteína (éxons) e partes não traduzidas (íntrons). Então, ao decorrer do processo de síntese de RNA, o RNA que é produzido a partir dos cístrons é classificado como transcrito primário, mas ainda dentro do núcleo. Após o processo de maturação, os íntrons são descartados por clivagem, sobrando os éxons, que, em seguida, serão unidos, formando o RNAm maduro. Tradução Tradução Características da tradução: •Altamente conservado, do ponto de vista evolutivo. •Demanda um alto custo energético. •Tem a participação de RNAm, RNAt, ribossomos, aminoácidos e proteínas específicas. •Nos procariotos, tradução e transcrição ocorrem em um mesmo espaço, o citoplasma. •Nos eucariotos, a tradução e a transcrição ocorrem em espaços separados e são independentes. Tradução Características da tradução: •O RNAm é específico para cada proteína diferente produzida, mas pode ser usado na tradução diversas vezes. •O RNAt e os ribossomos podem ser usados na síntese de diferentes proteínas. •Cada aminoácido é codificado por um ou mais códons, que são trincas de bases nitrogenadas consecutivas do RNAm. •O RNAt possui os anticódons que se ligam aos códons do RNAm, para deixar o aminoácido correspondente. Tradução: Como acontece? Já sabemos que a tradução em eucariotos ocorre após a maturação do RNAm, mas que em bactérias tem início logo que termina a transcrição, ou até antes. É necessário, porém, lembrar que uma proteína é um polipeptídio, constituído por diferentes aminoácidos. Para que seja executada a tradução, é importante lembrarmos também do código genético, pois a sequência de nucleotídeos no DNA é quem determina a sequência de aminoácidos nas proteínas. Portanto, podemos dizer que o DNA possui as informações para sintetizar moléculas de proteínas. Tradução: Como acontece? A tradução sempre vai iniciar de um ponto inicial “códon de iniciação” Códon de iniciação: Grupo de três bases nitrogenadas de RNAm que indicam o ponto de início da tradução. Com o complexo de iniciação formado sobre o RNAm, acontece a ligação de subunidades grande ribossomal, com 3 locais de ancoragem para o RNAt poder se ligar. Com isso, tem início a fase que é denominada de alongamento. O RNAt liga os aminoácidos correspondentes ao códon do RNAm. Finalizam com códons de finalização, códons que não codificam aminoácidos mas sim fatores de liberação de proteínas fazendo com que a proteína formada se separe do ribossomo. Código genético Código Genético 4 nucleotídeos (A, U, C, G) do RNAm Agrupados em trios (códosn) Obtendo 64 combinações possíveis Aminoácidos isolados e conhecidos=20 Conclusão mais de um códon codifica para um mesmo aminoácido Código genéticos degenerado. Leiam o material do conteúdo digital: • Genética de Populações • Genética molecular e o dogma central da biologia molecular • Padrões de Herança Genética e Genética do Câncer Boa Sorte no SM2 (05/06), AV (12/06) e AVS (26/06)