PROVA PRATICA ESCRITA

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Aqui está um guia de estudos completo e estruturado especificamente para a sua Prova 
Prática Escrita de Bacteriologia Veterinária. Este material aborda os 4 temas exigidos, 
explicando a utilidade, a diferença estrutural/química, os resultados e a aplicação direta na 
rotina da Medicina Veterinária. 
GUIA DE REVISÃO: PROVA PRÁTICA DE 
BACTERIOLOGIA 
TEMA 1: COLORAÇÃO DE GRAM e PAREDE 
BACTERIANA 
Para que serve e como é usada? 
É a coloração de triagem mais importante da microbiologia. Serve para classificar as bactérias 
em dois grandes grupos (Gram-positivas ou Gram-negativas) e identificar a morfologia celular 
(cocos, bacilos, cocobacilos) sob o microscópio óptico. O teste baseia-se na capacidade da 
parede celular de reter ou perder o complexo cristal violeta-lugol após a lavagem com um 
solvente (álcool). 
Qual a diferença estrutural? 
● Gram-positivas (G+): Possuem uma parede celular simples, porém muito espessa, 
composta por uma grossa camada de peptidoglicano (até 90% da parede) e ácidos 
teicoicos. Não possuem membrana externa. 
● Gram-negativas (G-): Possuem uma estrutura complexa. A camada de peptidoglicano é 
muito fina e, acima dela, há uma membrana externa rica em LPS (Lipopolissacarídeo), 
que atua como endotoxina. 
Quais resultados elas dão (Cores)? 
● Gram-positivas: Ficam coradas em Roxo/Azul. (O álcool desidrata a parede grossa e 
retém o primeiro corante). 
● Gram-negativas: Ficam coradas em Rosa/Vermelho. (O álcool dissolve a membrana 
lipídica externa, o primeiro corante escapa e elas absorvem o contracorante, safranina ou 
fucsina). 
Exemplos na Medicina Veterinária 
● Exemplo Gram-positiva (G+): Staphylococcus aureus (causador de mastite bovina e 
infecções de pele em cães) ou Streptococcus equi (causador do Garrotilho em equinos). 
● Exemplo Gram-negativa (G-): Escherichia coli (causador de diarreia em leitões e 
infecção urinária em cadelas) ou Salmonella spp. 
TEMA 2: TESTE DA CATALASE 
Para que serve e como é usado? 
Serve para detectar a presença da enzima bacteriana catalase, que neutraliza o peróxido de 
hidrogênio (H_2O_2 - água oxigenada), um subproduto tóxico do metabolismo do oxigênio. É 
usado na rotina prática para diferenciar os grandes gêneros de cocos Gram-positivos. O 
teste consiste em pingar uma gota de água oxigenada 3% sobre uma colônia bacteriana em 
uma lâmina limpa. 
Qual a diferença química/metabólica? 
● As bactérias aeróbicas e anaeróbicas facultativas geralmente produzem a catalase para 
se protegerem contra os radicais livres de oxigênio gerados pelo próprio metabolismo ou 
pelo sistema imune do hospedeiro (fagocitose). 
● Bactérias catalase-negativas não possuem essa enzima e utilizam outras vias químicas 
menos eficientes para lidar com o oxigênio. 
Quais resultados ele dá? 
● Resultado Positivo (+): Formação imediata de bolhas/efervescência (liberação de gás 
oxigênio O_2). 
● Resultado Negativo (-): Ausência completa de bolhas (o líquido permanece estático). 
Exemplos na Medicina Veterinária 
● Catalase Positiva (+): Gênero Staphylococcus (Ex: Staphylococcus pseudintermedius, 
isolado frequente em otites e piodermites caninas). 
● Catalase Negativa (-): Gênero Streptococcus (Ex: Streptococcus uberis, agente de 
mastite ambiental em vacas leiteiras). 
TEMA 3: ANTIBIOGRAMA (Difusão em Disco) 
Para que serve e como é usado? 
Também chamado de Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA), serve para avaliar quais 
antibióticos são eficazes para destruir ou estagnar o crescimento de uma bactéria específica 
isolada do paciente. É usado semeando a bactéria de forma tapete em uma placa de Ágar 
Mueller-Hinton e aplicando pequenos discos de papel filtro impregnados com concentrações 
padronizadas de antibióticos. 
Qual a diferença e o que é avaliado? 
● O teste avalia a capacidade de difusão do fármaco no meio e a vulnerabilidade da 
bactéria a ele. 
● Bactéria Sensível: O antibiótico impede o seu crescimento ao redor do disco. 
● Bactéria Resistente: A bactéria consegue crescer encostada no disco, ignorando o 
medicamento. 
Quais resultados ele dá? 
Os resultados são interpretados medindo o diâmetro da zona sem crescimento com uma régua 
(em milímetros): 
● Resultado Sensível (Positivo para o tratamento): Presença de um Halo de Inibição 
claro e transparente ao redor do disco (cujo diâmetro deve ser consultado em tabelas 
padrão como CLSI/BrCAST). 
● Resultado Resistente (Negativo para o tratamento): Ausência de halo ou halo menor 
do que o limite estipulado pela tabela de referência. 
Exemplos na Medicina Veterinária 
● Importância Clínica: Essencial no tratamento de infecções refratárias, como otites 
crônicas em cães por Pseudomonas aeruginosa (frequentemente multirresistente) ou 
infecções por Staphylococcus resistentes à meticilina (MRSA/MRSP). O antibiograma 
impede que o veterinário prescreva um tratamento ineficaz, economizando tempo e 
salvando a vida do animal. 
TEMA 4: TESTE CAMP 
Para que serve e como é usado? 
Serve para identificar bactérias que produzem o fator CAMP (uma proteína extracelular). Na 
rotina laboratorial, é usado especificamente para confirmar a identidade do Streptococcus 
agalactiae. O teste é realizado em uma placa de Ágar Sangue, onde se faz uma linha central 
com uma cepa padrão de Staphylococcus aureus (produtor de beta-toxina) e linhas 
perpendiculares com as bactérias que se deseja testar. 
Qual a diferença química/fenotípica? 
Baseia-se no sinergismo hemolítico. O fator CAMP produzido pela bactéria teste não rompe 
as hemácias sozinho, mas quando ele entra em contato com a hemólise parcial (preparada 
pela beta-toxina do Staphylococcus aureus), as duas substâncias agem juntas para causar a 
lise total e massiva dos glóbulos vermelhos do meio. 
Quais resultados ele dá? 
● Resultado Positivo (+): Formação de uma zona límpida de hemólise total em formato 
de ponta de flecha na intersecção entre as duas estrias bacterianas. 
● Resultado Negativo (-): Ausência da ponta de flecha; a hemólise ao redor das linhas 
permanece inalterada e linear. 
Exemplos na Medicina Veterinária 
● CAMP Positivo (+): Streptococcus agalactiae — Este é o principal agente de mastite 
contagiosa crônica em bovinos. O teste CAMP é a ferramenta padrão-ouro no 
laboratório de leite para diferenciá-lo de outros estreptococos ambientais. 
● CAMP Negativo (-): Streptococcus dysgalactiae (outro causador de mastite, mas que 
não possui o fator CAMP). 
● (Nota Veterinária extra: A bactéria zoonótica Listeria monocytogenes, que causa 
encefalite em ruminantes, também dá teste CAMP positivo). 
 
Dica de ouro para a prova escrita: Lembre-se sempre de associar a espessura do 
Peptidoglicano com a cor do Gram, e fixe bem que o principal uso prático da Catalase é 
separar Staphylococcus (+) de Streptococcus (-), enquanto o teste CAMP confirma o terrível 
Streptococcus agalactiae da mastite bovina! Boa prova!