Aula 2 ESTRUTURA CELULAR

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MICROSCOPIA E ESTUDO DAS CÉLULAS
Uninassau - Caxangá
Bacharelado em Saúde
Disciplina de Citologia
Profº Drº Igor Paiva
Email: igor.paiva@ufpe.br
OBJETIVOS
1. Entender a evolução da microscopia.
2. Reconhecer a importância e finalidade da MEV e MET .
3. Descrever as principais estruturas do microscópio e suas 
respectivas funções.
História e Evolução do Microscópio
O INÍCIO DA MICROSCOPIA
● Hans e Zacharias Janssen (1590) - 
Middelburg, na Holanda.
● Primeiros microscópios simples 
(Aumento: ~9x)
O INÍCIO DA MICROSCOPIA
● Galileu Galilei (~1609)
● Adaptou telescópio para observar 
objetos pequenos
● Aumento de até 30x
● Primeiro a usar ajuste de foco mais 
preciso
● Popularizou a ideia de ampliar o invisível
● Contribuiu para instrumentos científicos
● Não observou microrganismos
O INÍCIO DA MICROSCOPIA
● Antonie van Leeuwenhoek – Pai da 
microbiologia
● Era comerciante de tecidos e não tinha 
formação universitária.
● Observou tecidos animais, vegetais e 
muitas outras coisas que nunca haviam 
sido vistas antes em escala 
microscópica. 
● Aumento: 200x – 300x
O INÍCIO DA MICROSCOPIA
O INÍCIO DA MICROSCOPIA
● Robert Hooke – Antoine apresentou 
suas descobertas à Royal Society em 
Londres, onde Robert Hooke também 
estava fazendo descobertas 
notáveis com um microscópio.
● Micrographia (1665)
● Criou o termo “célula” - cellulae” (em 
latim), que significa “pequenos quartos” 
ou “pequenas celas”
O INÍCIO DA MICROSCOPIA
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
● Muitos pesquisadores se recusaram a usar os primeiros microscópios 
por não confiarem no que estavam vendo (patologista francês Xavier 
Bichat)
● Não houve muitas mudanças no design básico dos microscópios nos 200 
anos seguintes. Melhorias nos Microscópios: 
1) Lentes mais puras: uso de vidro de melhor qualidade, diminuindo 
distorções ópticas.
2) Correção de problemas: redução da distorção de cores (aberração 
cromática) e aumento da resolução da imagem.
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
3) Espelhos incorporados: adicionados aos microscópios compostos para 
refletir mais luz sobre a amostra.
4) Maior luminosidade: melhoria na iluminação da preparação observada.
5) Imagem mais nítida e detalhada: combinação de lentes de qualidade e 
melhor iluminação
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
● Joseph Jackson Lister (1830) - 
oftalmologista e físico inglês
● Em colaboração com o fabricante de 
instrumentos William Tulley, construiu um 
dos primeiros microscópios que corrigia 
ambas as falhas.
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
● 1830, as células e a teoria celular tornaram-se o foco da pesquisa 
médica e biológica, graças ao papel central do microscópio na ciência 
laboratorial.
● Entre 1838 e 1839, dois cientistas alemães, Mathias Schleiden e 
Theodor Schwann (médico) propuseram que as células eram os blocos 
de construção da vida vegetal e animal.
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
Rudolf Virchow (1821–1902)
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
● Microscópio óptico composto
● Melhorias em lentes
● Uso de iluminação artificial
● Ampliação até 1.000x
● Consolidação do microscópio composto
● Base da histologia e citologia modernas
AVANÇOS DO SÉCULO XIX e XX
● Microscópio de contraste de fase (1930)
● Microscópio de fluorescência (1940)
● Uso de fluoróforos específicos
● Melhora na resolução de detalhes celulares
● Nobel de Frits Zernike (1953)
INVENÇÃO DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
● Ernst Ruska e Max Knoll (1931)
● Uso de feixe de elétrons
● Resolução nanométrica
● MET: visualiza interior celular
● MEV: visualiza superfície em 3D
● Nobel concedido em 1986
INVENÇÃO DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
Funciona assim:
O microscópio joga um feixe de 
elétrons em cima da amostra.
Esses elétrons batem e voltam, 
como se fosse uma bolinha de 
ping-pong.
O aparelho transforma esse "bate 
e volta" em uma imagem super 
detalhada no computador ou na 
tela.
INVENÇÃO DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
INVENÇÃO DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
MEV E MET
● Microscópio Eletrônico de 
Transmissão (MET)
● Funciona como um raio-X: o 
feixe de elétrons atravessa a 
amostra.
● Mostra o interior da célula, como 
se fosse cortar e olhar por 
dentro.
● Faz imagens planas (2D), mas 
muito detalhadas, quase no 
nível dos átomos.
● Microscópio Eletrônico de 
Varredura (MEV)
● Funciona como uma lanterna de 
laser que varre a superfície da 
amostra.
● Mostra a parte de fora da célula 
ou objeto.
● Faz imagens em 3D, cheias de 
relevo, como se fosse uma foto 
em alta definição.
MEV E MET
● Microscópio Eletrônico de 
Transmissão (MET)
A amostra precisa ser muito fina 
(quase transparente para os 
elétrons).
● Microscópio Eletrônico de 
Varredura (MEV)
A superfície do objeto esteja 
preparada (normalmente coberta 
com uma camada fininha de metal, 
como ouro ou platina)
MEV E MET
Partes Estruturais do Microscópio Óptico
Partes Estruturais do Microscópio Óptico
● Base
● Coluna
● Braço
● Platina
● Presilhas
● Revólver porta-objetivas
SISTEMA ÓPTICO 
● Conjunto de lentes e 
estruturas responsáveis por 
captar, concentrar e ampliar 
a luz.
● Oculares 
● Objetivas 
● Condensador 
● Diafragma 
● Lente coletora 
● Fonte de luz
SISTEMA ÓPTICO - OCULARES
● São as lentes por onde o 
observador olha.
● Geralmente aumentam de 
10x a 15x.
● Recebem a imagem 
ampliada pelas objetivas e 
permitem a visualização 
final.
SISTEMA ÓPTICO - OBJETIVAS
● São as lentes mais próximas 
da amostra (normalmente de 
4x, 10x, 40x e 100x).
● Fazem a primeira grande 
ampliação da imagem.
● O NA indica a capacidade da 
lente objetiva de captar luz e 
resolver detalhes da 
amostra.
O 160 indica a distância do tubo óptico do microscópio 
(em milímetros)
SISTEMA ÓPTICO - OBJETIVAS
SISTEMA ÓPTICO - OBJETIVAS
● Quando usamos a objetiva de 100x, a lente fica muito próxima da 
lâmina.
● Se houver ar entre a lâmina e a lente, parte da luz se perde porque o ar 
tem um índice de refração diferente do vidro. Isso causa:
🔻 Perda de luminosidade.
🔻 Menor resolução (imagem borrada).
● O óleo de imersão tem praticamente o mesmo índice de refração do 
vidro da lamínula.
● Assim, a luz não desvia quando passa da lâmina para a objetiva.
SISTEMA ÓPTICO - OBJETIVAS
SISTEMA ÓPTICO - CONDENSADOR
● Localizado abaixo da lâmina.
● Serve para concentrar e 
direcionar a luz sobre a 
amostra, aumentando a 
nitidez.
SISTEMA ÓPTICO - CONDENSADOR
SISTEMA ÓPTICO - DIAFRAGMA
● Funciona como a “íris” do 
microscópio.
● Regula a quantidade de luz 
que passa pelo 
condensador.
● Ajuda a controlar contraste e 
brilho.
SISTEMA ÓPTICO - LENTE E FONTE
● Lente coletora: Localizada 
entre a fonte de luz e o 
condensador.
● Serve para reunir a luz da 
lâmpada e enviá-la 
concentrada para o 
condensador.
● Fonte de luz: Pode ser uma 
lâmpada ou LED.
● É a origem da iluminação 
usada para observar a 
amostra.
SISTEMA ÓPTICO - RESUMINDO…
● Oculares = aumentam a imagem final.
● Objetivas = fazem a ampliação principal.
● Condensador = concentra a luz.
● Diafragma = regula a luz (mais clara ou mais escura).
● Lente coletora = junta a luz e manda para o condensador.
● Fonte de luz = origem da iluminação.
SISTEMA MECÂNICO 
Conjunto de peças responsáveis por sustentar, movimentar e ajustar o microscópio.