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LÍMITE DE RESOLUÇÃO Presentado por Prof. Antônio Fco. Do Carmo. http://cpma.comunidades.net icroscópio O MICROSCÓPIO Instrumento óptico destinado a observar certos objetos e os organismos extremamente pequenos. É uma ferramenta básica para o estudo na Biologia Geral. Do micro- (pequeño) e scopio, (observar) Para o estudo do material biológico se dispõe de varios tipos de microscopios, os quais se podem classificar basicamente de acordo com o tipo de fonte luminosa que usam: • Ópticos o luminosos: - Campo claro - Campo oscuro - Contraste de fases - Fluorescência - Ultravioleta • Eletrônicos - Exploração - Transmissão O microscópio óptico convencional é composta porque tem dois principais sistemas convergentes lentes (oculares e objetivos). A maioria dos modelos atuais são binóculos, embora haja monocular. O microscópio composto convencional é chamado de "campo de luz" ou "campo claro", porque todo o campo é iluminado com uma lente condensadora comum que projeta fotônica leves. Microscópio óptico de campo claro Sistema mecânico: segurando o sistema óptico e contém os elementos necessários para a iluminação e concentrar a preparação. Sistema de iluminação tornam-se os componentes responsáveis pela recolha a luz, a dose e dirigi-la através do preparado sistema óptico: inclui todos os elementos que colaboram na ampliação da imagem O condensador projecta um cone de luz sobre as células que estão a ser examinadas ao microscópio. Depois de atravessar as células, o feixe de luz, em forma de cone, penetra o alvo; a lente projecta uma imagem ampliada no plano focal da ocular, o que novamente de largura. Finalmente, a imagem fornecida pelo ocular pode ser percebido pela retina do olho ímite de resolução Limite de resolução: é a menor distância que deve existir entre dois objetos para que eles possam ser exibidos separadamente. Quando um objeto é iluminado, os pontos de sua superfície reflete ondas de luz. Próximos dois pontos sobre a superfície como será diferente se a distância entre eles é grande em comparação com o comprimento de onda recebida. Se a distância entre elas é menor do que o comprimento de onda que ilumina a vista aparece como dois pontos em conjunto. Comparação de limites de resolução entre microscópio óptico, eletrônico e olho humano. LR= λC/NA onde: λ= longitude de onda de la luz (em µm) C= constante de proporcionalidade NA= abertura numérica Cálculo do límite de resolução Longitude de onda O comprimento de onda é a distância entre dois vértices consecutivos, em outras palavras, o tempo que é descrito onda. No espectro visível, as diferenças de comprimento de onda são manifestados como diferença de cor. Se a amostra é iluminada com luz branca, ele é considerado o comprimento de onda verde e amarelo (0,55 um) Constante de proporcionalidade Constante de proporcionalidade está relacionada com o grau de sobreposição dos dois pontos de modo que possam ser resolvidas pelo olho humano. Esta constante é 0,61 Abertura numérica É uma medida da capacidade do microscópio para refrações de grupo da luz produzida pelos detalhes finos do objeto, uma vez que determina o tamanho do feixe de luz que é capturada pelo alvo depois através do objeto. É uma característica de cada objetivo, rapidez faz parte das inscrições sobre os objetos. A qualidade de um objeto é maior quanto maior for a sua abertura numérica. Cálculo da abertura numérica onde: n é o índice de refracção do meio em que a lente é θ é metade do ângulo máximo de aceitação que pode entrar ou sair da lente. NA=n sen Θ Calcule o limite de resolução do microscópio óptico para objetos diferentes 10 x LR= λC/NA LR= 0,55 µm(0,61) / 0,30 LR= 1,12 µm 40 x LR= λC/NA LR= 0,55 µm(0,61) / 0,65 LR= 0,52 µm 100x LR= λC/NA LR= 0,55 µm(0,61) / 1,30 LR= 0,26 µm Calcule o limite de resolução do microscópio óptico objetivos diferentes. Microscópios ópticos modernos têm um limite de resolução de 0,2 a 0,4 um, cerca de l / 20 do diâmetro de um eritrócito humano normal Para reduzir o LR podemos usar uma fonte com menor comprimento de onda (o caso extremo é o de microscópios de elétrons) ou aumentar n, para as quais podemos escolher entre a preparação é a mais densa do que o ar. ME características que a diferenciam de microscopia de luz e melhora o limite de resolução do último. feixes de electrões são conseguidos com um comprimento de onda de 0,05 nm, o poder de resolução é de 0,2 nm, enquanto o comprimento de onda da luz visível varia em torno de 500 nm, e o seu poder de resolução é 0, 2 ^ m Características importantes do microscopio Aumento total Poder de penetração Distância focal Poder definição Poder de resolução http://cpma.comunidades.net http://techliecom.wordpress.com http://techlie-labor.comunidades.net http://cpma3.webnode.com http://profafc.webnode.com
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