Microscopia e métodos de coloração

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Microscopia e Métodos de Coloração 1 
• Primórdios da Microscopia: 
Microscópio de Mão – Leewenhoeck ( 1676) 
Aumento: cerca 
de 270 x 
Material 
Lente 
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• Primórdios da Microbiologia: 
Microscópio óptico – Pasteur (1860) 
Microscopia e Métodos de Coloração 3 
MICROSCOPIO ÓPTICO 
1000 a 1500 x 
Até 5000 x 
Microscopia e Métodos de Coloração 4 
MICROSCOPIA ÓPTICA 
Microscopia e Métodos de Coloração 5 
• Aumento de 1000 x no Microscópio Óptico: 
 Objetiva de Imersão: 
MICROSCOPIA ÓPTICA 
Microscopia e Métodos de Coloração 6 
Microscopia e Métodos de Coloração 7 
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO 
 Desenvolvido em 1932 
Microscopia e Métodos de Coloração 8 
MICROSCOPIA ELETRÔNICA: 
 ME Transmissão (MET) 
  10.000 x 
Microscopia e Métodos de Coloração 9 
MICROSCOPIA ELETRÔNICA: 
 ME Varredura (MEV)  
 200.000 x 
Microscopia e Métodos de Coloração 10 
MÉTODOS DE COLORAÇÃO 
Os Métodos de Coloração Facilitam a 
Visualização dos Microrganismos ao 
Microscópio Óptico 
Preparação “a fresco” 
de Leveduras 
Preparação “corada” de 
Leveduras 
Microscopia e Métodos de Coloração 11 
Métodos 
Diferenciais 
Morfologia 
Reação 
Tintorial 
Métodos Simples 
1 corante. Ex: Azul de Metileno 
Morfologia 
2 corantes. 
Ex: Cristal Violeta + Fucsina de Ziehl dil.  MÉTODO DE GRAM 
 Fucsina de Ziehl + Azul de Metileno MÉTODO DE ZIEHL- NEELSEN 
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Método de Coloração de Gram: 
Parede 
Celular 
Gram Positiva Gram Negativa 
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Método de Coloração de 
Gram 
Cristal 
Violeta 
1 min. 
 Lugol 
1 min. 
Solução 
de Álcool 
Etílico 
95% 
 
Fucsina 
de Ziehl 
diluída 
30 seg. 
Corante Mordente 
Diferenciador Corante 
Gram Positiva  Roxo 
Gram Negativa  Rosa 
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Método de Coloração de Gram 
Microscopia e Métodos de Coloração 15 
Método de 
Coloração de 
Gram: 
Microscopia e Métodos de Coloração 
Solução de 
Fucsina de 
Ziehl-Neelsen, 
concentrada à 
quente 
Solução 
Álcool 
Ácida 
Solução de 
Azul de 
Metileno 
Descorante Corante Corante 
Reação Positiva = Vermelha 
Reação Negativa = Azul 
Método de Coloração de Ziehl-
Neelsen: 
BAAR 
Microscopia e Métodos de Coloração 
Microscopia e Métodos de Coloração 
Método de Coloração de Ziehl-Neelsen: 
Globia 
Microscopia e Métodos de Coloração 
FIM