Alcaloides Analises Quali e Quant

Prévia do material em texto

FARMACOGNOSIA II 
Metodologias para Análises 
Qualitativa e Quantitativa 
ALCALOIDES 
Análise 
Qualitativa 
• O que é? 
Análise 
Quantitativa 
• Quanto é? 
Análise Qualitativa (1) 
• Os alcaloides apresentam estruturas químicas bastante 
heterogêneas e complexas. 
 
• São originados, principalmente, de aminoácidos. 
 
• Atualmente, são conhecidos mais de 5.000 alcaloides. 
 
• Não podem ser identificados com base em apenas um 
único critério. 
Análise Qualitativa (2) 
• Formam sais complexos com compostos de mercúrio, 
ouro, prata, platina e outros metais. 
 
• Muitos deles são obtidos na forma de precipitados. 
 
• A detecção de alcaloides é realizada por meio de 
reações de precipitação com reagentes gerais para 
alcaloides. 
Reagentes Gerais 
Mayer 
Solução de iodeto de 
potássio e cloreto de 
mercúrio 
ppt branco 
Dragendorff 
Solução de iodeto de 
potássio e subnitrato 
de bismuto 
ppt 
alaranjado 
Bouchardat 
Solução de iodo e 
iodeto de potássio 
ppt marrom 
Bertrand 
Solução de ácido 
sílico-tungstico 
ppt branco 
Reações de precipitação 
realizadas em lâminas com 
os reativos gerais para 
alcaloides (Bouchardat, 
Mayer, Bertrand e 
Dragendorff). 
Características dos Precipitados 
• Amorfos ou cristalinos. 
 
 
• Podem ser solubilizados em meio alcalino ou 
em excesso de reagente. 
 
• Podem ser causados por outras substâncias em 
um extrato bruto (proteínas, purinas, betaínas, 
etc.) 
– Resultados negativos: indicativo de ausência de 
alcaloides. 
– Resultados positivos: provável presença de 
alcaloides. 
Para se ter certeza deve-se purificar antes 
Classificação dos Alcaloides – 
Origem Biossintética 
Alcaloides verdadeiros:têm anel 
heterocíclico com um átomo de 
nitrogênio e sua biossíntese se dá 
através de um aminoácido (ex.: 
Papaverina) 
Protoalcaloides - átomo de nitrogênio não 
pertence a anel heterocíclico e se originam 
de um aminoácido. (ex: Cocaína) 
Pseudoalcaloides - não são derivados de aminoácidos 
e sim de terpenos ou esteroides (Ex.: Coniina) 
Classificação Química dos Alcaloides 
• Alcalóides Purínicos (xantínicos) 
• Alcalóides Imidazólicos 
• Alcalóides Quinoleínicos 
• Alcalóides Isoquinoleínicos 
• Alcalóides Tropânicos 
• Alcalóides Indólicos 
• Alcalóides não Heterocíclicos (o Nitrogênio está fora do anel) 
• Outros 
Isolamento 
Para identificar os diferentes alcaloides de uma 
mesma droga, primeiramente, é preciso isolá-los: 
 
 
 
– Cristalização fracionada 
Diversas substancias possuem diferentes graus 
de solubilidades a diferentes temperaturas. 
 
 
– Cromatografia 
Em papel, em camada delgada, em 
coluna, HPLC e gasosa. 
Identificação(1) 
É feita por meio das propriedades físicas dos 
alcaloides: 
Ponto de 
fusão 
Poder 
rotatório 
Solubilidade 
Forma e cor 
dos cristais 
Reações 
cromáticas 
específicas 
Métodos 
espectroscópicos 
Identificação (2) 
• Alguns alcaloides podem ser identificados com 
reativos especiais. 
Alcaloides tropânicos + Reativo de Vitali = 
coloração violeta. 
Alcaloides indólicos + Reativo de Urk = 
coloração azul. 
Análise Quantitativa 
• A dosagem é a determinação da quantidade de 
alcaloides existentes em 100 gramas da droga. 
 
• Com a dosagem quantificamos os alcaloides 
totais de uma droga. 
 
• Para a dosagem individual de cada alcaloide é 
preciso isolá-lo. 
 
• Para cada tipo de alcaloide existe uma técnica 
especial. 
Métodos Físico-Químico para 
Dosagem de Alcaloides 
• Gravimetria 
• Alcalimetria 
• Tetra Fenil Boreto de Sódio 
• Colorimetria 
• Espectrofotometria 
1 - Gravimetria 
• É o método mais utilizado na avaliação 
quantitativa dos alcaloides totais. 
 
• Simples pesagem do resíduo de alcaloides 
totais obtido. 
 
• É mais indicado para drogas com alta 
concentração de alcaloides (Ex.: cafeína em pó 
de guaraná). 
2 - Alcalimetria 
• A titulometria ou titulação é um método de 
análise quantitativa que determina a 
concentração de uma solução por intermédio de 
uma outra solução de concentração conhecida. 
 
• Titulação Ácido-Base: 
– Acidimetria: determinação da concentração 
de um ácido. 
– Alcalimetria: determinação da concentração 
de uma base. 
 
Alcalimetria e Alcaloides 
• Tem por fundamento a 
transformação quanti-
tativa do grupo amina 
em um sal por adicio-
namento de um ácido 
na presença de um in-
dicador que nos reve-
lará o ponto de vira-
gem da reação, ou 
seja, o ponto de neu-
tralização (o final da 
reação). 
Indicadores 
• Indicadores ácido-base: Substâncias que 
mudam de cor na presença de ácidos ou de 
bases. Exemplos: 
 
– Tornassol: em meio ácido se torna róseo e 
em meio básico se torna azul. 
 
– Fenolftaleína: em meio ácido se torna incolor 
e em meio básico se torna vermelho. 
 
 R 
 R N: + ácido sal 
 R 
 R R + 
 R N: + [HCl] R N Cl- 
 R R 
Ponto de viragem dado por um indicador 
Exemplo: 
Droga: Efedra = 30 g 
Alcalóide: Efedrina = C10H15NO 
Volume de HCl 0,1N gasto na titulação = 15 mL 
P.eq = N X V (L) P.eq ácido = P.eq base 
 
Nác. X V(L) ác. = Nbase X V(L) base 
 
0,1 X 0,015L = Nbase X V(L)base 
 
 m 
P.eq = -------- onde: m = massa; mol = nº de moles; x = nº de Nitrogênios ionizáveis 
 mol/x 
 
 m 
0,1 X 0,015L = -------- 
 mol/x 
 
 
 m 
0,1 X 0,015L = -------- C10H15NO = 10X12+15X1+14+16 = 165 moles 
 165/1 
 
 
m = 165 X 0,1 X 0,015L = 0,2475 
 
 
Se em 30 g---------------------0,2475 
 em 100 g------------------- x x = 0,825% de alcaloides 
 
3 - Tetra Fenil Boreto de Sódio 
• Após reagir com alcaloides, forma sais 
cristalinos bem definidos. 
 R + 
 R N H Cl- + Na+[B(C6H5)4]
- 
 R 
H20 
 R 
 Na+[B(C6H5)R N H + NaCl 
 R 
Tetrafenilboreto de alcaloide ppt em H20 filtra e pesa 
peso conhecido 
4 - Colorimetria 
• Determinação da concentração de uma solução a partir 
da coloração apresentada por ela, já que a intensidade 
da cor é proporcional à quantidade da substância sobre 
a qual agiu o reativo. 
 
• Necessita de soluções-padrões. 
 
• Isola apenas uma determinada banda do espectro. 
 
• A dosagem é feita através de: 
– Fotocolorímetro. 
– Método das diluições (padrão = peso da substância). 
– Método das escalas cromáticas: compara-se com uma escala 
de cores obtidas com pesos conhecidos de padrões. 
Curva de Calibração 
Amostras 
5 - Espectrofotometria 
• Mede a absorção produzida numa radiação eletromagnética, cuja 
banda é definida pelo seu comprimento de onda. 
 
 
 
 
 
 
 
• Os espectros de UV e IV tornaram possível medir produtos 
incolores e coloridos. 
• Apresentam elevada sensibilidade. 
• Muitas reações cromáticas são instáveis (é preferível usar a 
espectroscopia no lugar da colorimetria).