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RESUMO FOTOCOLORIMETRIA

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Anne Kelly Santana – Monitora Biofísica 1 
 
RESUMO FOTOCOLORIMETRIA 
Tem como principal objetivo a determinação da concentração de soluções. 
Baseando-se na absorção de radiações eletromagnéticas (Luz) e a concentração da 
substância em questão. 
Quanto mais concentrada a solução, mais escura ela é e mais radiação 
eletromagnética (luz) ela absorve. Ou seja, a intensidade da luz transmitida diminui a 
medida que a concentração da substância aumenta. A relação, entre o raio emitido e a 
concentração da substância, é inversa. 
- Raio Incidente: Aquele que é colocado sobre a amostra (é oferecido à amostra) 
- Raio Emergente: Aquele que passa através da amostra (o raio que sai da amostra) 
 Relação de Lambert-Beer: Existe uma relação direta e exponencial entre a 
concentração da solução e a luz por ela absorvida. 
Atenção: Observem que a relação da transmissão da luz com a concentração é 
inversamente proporcional. Isso por que a relação entre a contração e a absorção é 
inversamente proporcional. Ou seja, quanto maior a concentração, mais luz incidida é 
absorvida e a quantidade de luz que sai (que emerge) é menor. 
Ex.: Dois tubos iguais, contendo as mesmas substâncias, mas com concentrações 
diferentes. 
 
 C¹ C² 
Onde, C¹>C² - Nesse caso a luz que o tubo 1 vai emergir terá menor intensidade do que 
a luz que o tubo 2 vai emergir. 
A substância presente no tubo 1 está mais concentrada, isso vai fazer com que ela 
absorva mais luz e transmita menos luz. 
L = Intensidade da luz emergente. Nesse primeiro exemplo L²>L¹ 
Ex².: Dois tubos diferentes, contendo as mesmas substâncias que possuem a mesma 
concentração. 
 Anne Kelly Santana – Monitora Biofísica 1 
 
 
 C¹ c² 
 
 
Lembrar que: A intensidade da luz emergente também depende do percurso óptico 
(distância percorrida pela luz através da solução). 
Onde, C¹=C² e o diâmetro do tubo 1 é menos que o do tubo 2 (considerar que eles são 
feitos do mesmo material). A intensidade da luz emergente do tubo 1 será maior que a 
do tubo 2. Isso significa que, a luz percorreu um percurso maior, foi mais absorvida e 
emergiu menos. 
 
Conclusão: A concentração da solução e o percurso óptico influenciam na intensidade 
da luz emergente. A luz emergente tem uma relação inversa com essas duas 
características. 
I = Io . 10 –kcd 
(Luz emergente é igual à luz incidente vezes dez elevado a menos kcd), Onde I= 
Intensidade Luminosa (Quantidade a luz que vai emergir – é constrante), Io = 
Intensidade da luz incidente, K = constante para cada solução, C = Concentração e d = 
percurso óptico (diâmetro). 
 
 Fotocolorímetro: Mede a TRANSMITÂNCIA e a ABSORBÂNCIA 
ATENÇÃO: O fotocolorímetro NÃO mede a concentração ele vai lhe da as grandezas 
necessárias para de obter a concentração. 
O fotocolorímetro ele é composto por uma fonte de luz com intensidade luminosa 
constante (ou seja, vai estar sempre emitindo a mesma quantidade de luz). Ela emite 
 Anne Kelly Santana – Monitora Biofísica 1 
 
luz branca, que é POLICROMÁTICA (possui todas as cores), ou seja, emite todos os 
comprimentos de onda. Atenção, mudando o comprimento de onda muda-se a 
energia de radiação ↓ λ (comprimento de onda), ↑Energia de radiação. 
Há também filtros, que filtrará essa luz policromática, separando-a por comprimento 
de onda. Luz de diferentes cores possuem diferentes comprimentos de onda (λ). 
E = h.c/ λ , onde E = Energia de radiação, h = constante de Planck, c = velocidade da luz 
no vácuo e λ = comprimento de onda. 
- Cubeta: Recipiente onde coloca-se a solução a ser analisada. Elas podem ser feitas de 
diferentes materiais. Descartáveis são as mais baratas e de quartzo (pra se trabalhar 
com emissões U.V) são as mais caras. 
- Fotocélula: Faz a geração de corrente elétrica. Transforma LUZ em CORRENTE 
ELÉTRICA 
-Miliamperímetro: Dispositivo que mede a corrente elétrica gerada pela fotocélula 
 
 Espectro de Absorção: Serve para a identificação de uma substância 
 
- O gráfico será um gráfico de absorbância (no eixo y) versus comprimento de 
onda (λ, no eixo x); 
- Esse gráfico nos oferece o FOTOPICO. O fotopico é o comprimento de onda 
que melhor absorve aquela substância. Ou seja, é o comprimento de onda de 
maior absorbância. 
Obs.: O fotopico é específico para cada substância e ele indica a maior 
inclinação da reta da absorbância; a inclinação da reta será sempre menor para 
valores acima ou abaixo do fotopico. 
 
 Curva Padrão: Serve para encontrar as concentrações desconhecidas de 
determinadas substâncias. 
 
- Essa gráfico relacionará valores de absorbância (no eixo y) com respectivos 
valores de concentração da solução (no eixo x). 
- Para obter essa curva deve-se utilizar um único comprimento de onda, que 
será o comprimento de onda adquirido com o gráfico espectro de absorção. 
Será o fotopico. 
- O fotopico proporcionará maior sensibilidade na determinação de 
concentrações desconhecidas da substância, ou seja, o fotopico proporciona 
maior inclinação da reta de absorbância; e quanto maior a inclinação melhor 
será a identificação de concentrações muito próximas. 
 Anne Kelly Santana – Monitora Biofísica 1 
 
* como é uma reta, ela dará uma função do 1º grau. Y= ax; x = y/a, sendo x = 
1/a . y 
 
- Fórmula para achar a concentração sem ser através da curva padrão: 
Cx = F. Ax 
Cx= Concentração desconhecida 
F = Fator de calibração (é o inverso do coeficiente angular – 1/a) 
Ax = Absorbância da concentração desconhecida

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