2 Parede celular das bactérias

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PAREDE CELULAR DAS BACTÉRIAS
Parede celular		
Rígida
Função:
Proteção física;
Formato característico de cada bactéria;
Resiste a alterações na pressão osmótica exterior;
Ancoragem dos flagelos
Essencial para o crescimento e divisão da célula;
Parede celular das gram – é mais fina que da gram +;
Usada para diferenciação celular de acordo com a coloração de Gram
Parede celular:
Plantas, algas e fungos têm parede celular outras células eucarióticas não tem (maioria dos protozoários células Animais- nestes a membrana citoplasmática é a estrutura mais externa);
Diferem tanto na composição química quanto na estrutura;
-Bactérias- peptidioglicano;
-Fungos-quitina;
-Vegetais-celulose;
Quando parede celular das é removida em laboratório estas são incapazes de se multiplicar;
Parede celular:	
Nas eubactérias o principal componente é o peptideoglicano (mureína) é um polímero poroso e insolúvel de grande resistência.
Formado por dois tipos de açúcares (o ácido N-acetilmurâmico e a N-acetilglucosamina) e alguns aminoácidos.
Nas arqueobactérias a parede celular tem protéina, glicoprotéinas ou polissacarídeos complexos, não possuem N-acetilmurâmico;
Peptideoglicano
Mureína, mucopeptídeo
Forma uma rede de proteção
Dissacarídeo unido a cadeias laterais de tetrapeptídeos
Dissacarídeos:
N-acetilglicosamina (NAG)
Acido N-acetilmurâmico (NAM)
Tetrapeptideos (NAM):
Unidas
Pontes cruzadas
Peptídeoglicano
Peptídeoglicano
Gram positiva X Gram negativa
Mas é a membrana externa, não a camada de peptideoglicano que distingue as bactérias Gram- negativas;
A membrana externa serve como uma barreira seletiva que controla a passagem de algumas substancias para dentro e fora da bactéria;
Gram positiva X Gram negativa
A estrutura básica da membrana externa das Gram-negativas : bicamada contendo fosfolipídeos, com sua face apolar( hidrofóbica) voltada para dentro, protegida dos meios aquosos, e a face polar (hidrófila) voltada para fora;
Nesta face polar está ancorada ao peptideoglicano por uma lipoproteína;
Molécula anfipática
Bicamada fosfolipídeos 
Gram positiva X Gram negativa
Além dos fosfolipídios a membrana externa da parede contém proteínas e lipopolissacarídeos (LPSs);
Os lipopolissacarídeos estão localizados exclusivamente na camada externa da membrana, enquanto os fosfolipídios estão presentes quase completamente na camada interna;
Os lipopolissacarídeos são característicos são característicos das bactérias Gram-, as Gram+ não contêm esta substância;
Gram positiva X Gram negativa
A porção lipídica da LPS é também conhecida como uma endotoxina e pode atuar como veneno- causando febre, diarreia destruição das células vermelhas do sangue e um choque potencialmente fatal; 
Gram negativas
 
Parede celular mais complexa: membrana externa cobrindo uma camada fina de peptidioglicano;
Espaço Periplasmático
Entre a membrana externa e a membrana plasmática
Membrana externa é ela distingue+ e -
Lipoproteínas
De 1 a 2 camadas de peptideoglicano;
Mais susceptíveis aos rompimentos
Membrana externa
Forte carga negativa
Impede fagocitose 
Barreira para ATB, enzimas, 
detergentes, sais biliares
Proteínas Porinas
Canais que permitem a entrada de moléculas menores;
Lipoproteínas
Fosfolipídeos 
Lipopolissacarídeos (LPS) endotoxina
Polissacarídeo O (identificação de sorovar)
Lipídeo A (tóxica no sangue)
Causa febre e choque fatal
Gram positivas
Até 40 camadas de peptideoglicano
Proteínas de superfície
Ácidos (álcool e fosfato):
Regulam a entrada de cátions
Fortalecem a camada peptideoglicana
Especificidade antigênica
Ácido lipoteicóico
Atravessa o peptideoglicano e ancora na membrana plasmática
Ácido teicóico
Camada peptideoglicana
Coloração de Gram:
Físico dinamarquês 
Hans Christian Gram
1884
Corantes 
Cristal de violeta (bactéria reter)
Iodo
Lavagem com álcool ou acetona
Safranina ou fucsina básica
Técnica de coloração de Gram
Corante primário – violeta de cristal: cora o citoplasma de púrpura, independentemente do tipo de célula.
Mordente – solução de iodo: aumenta a afinidade entre o violeta de cristal e a célula e forma com o corante um complexo insolúvel dentro da célula.
Agente descolorante – álcool, acetona ou ambos: solvente lipídico.
Contrastante – safranina ou fucsina básica: cora o citoplasma de vermelho.
Coloração de Gram:
Durante a coloração ocorre a formação do complexo violeta-iodo (CVI) dentro da célula;
Quando uma bactéria Gram- é tratada com etanol, o lipídio na membrana externa é dissolvido e removido (ela é rompida e aumenta sua permeabilidade);
Assim o corante (CVI) pode ser removido descorando a bactéria Gram- assim ela é tingida pela warfarina;
As bactérias Gram+ o etanol faz que os poros no peptideoglicano se contraia e o CVI permanece no interior da célula;
Cubra com cristal de violeta
60 segundos
Lave com água 
Cubra com solução de iodo
60 segundos
Lave com água 
Descore com álcool 95%
Contracoloração com safranina 
30 segundos
Lave com água
Danos a parede:
A lisozima, enzima presente em meios biológicos tais como secreções (lágrimas, saliva, muco nasal, clara do ovo, etc.) ou no citoplasma das células fagocitárias, hidrolisa o peptidoglicano e, consequentemente, destrói a parede;
 Desprovidas de parede, as bactérias transforma-se em:
-protoplastos extremamente vulneráveis às variações da pressão osmótica.
-Esferoplastos (parede celular foi parcialmente removida), tornando-se redondas
Danos a parede:
A ação da penicilina conduz ao mesmo efeito, não porque destrua o peptidoglicano, mas porque inibe a sua síntese, durante o crescimento bacteriano;
A ação lítica da lisozima ou a inibição de síntese do peptidoglicano pela penicilina conduz, nas bactérias gram-negativas, à formação de esferoplastos.
Paredes atípicas:
Mycobacterium e Nocardia
São fracamente gram-positivas
Coloração especial 
Coloração álcool-ácido resistente (BAAR) ou Ziehl Neelsen
“Não são gram-positivos nem gram-negativos”
Mycobacterium sp.
Aeróbicas obrigatórias, imóveis e altamente patogênicas, que causam diversas doenças, sendo as mais famosas Hanseníase(lepra) e Tuberculose;
Classificadas com bactérias álcool-ácido resistentes pois ao contrário das bactérias de outros gêneros sua parede permanece corada em rosa pela fucsina após o tratamento da lâmina com etanol;
Considera-se uma bactéria Gram- positiva;
Reagentes utilizados em BAAR
Membrana plasmática:
Tem a estrutura em forma de bicamada fosfolipídica;
É o sitio de atividade enzimática (transporte de moléculas para dentro e fora da célula);
Membrana citoplasmática das procarióticas não tem esteroides (colesterol), menos rígidas;
Membrana plasmática:
Composição: fosfolipídios (30%) e proteínas (70%);
Fosfato: cabeça com carga elétrica (polar), solúveis em água na porção externa (hidrófila)
Glicerol e Ácidos graxos: cauda sem carga elétrica (apolar), insolúveis na porção interna (hidrofóbica)
Função da Membrana plasmática:
É mais seletiva que a parede celular;
Possui varias enzimas envolvidas na produção de energia e síntese de parede celular;
Proteínas permeases (transportam moléculas p/ célula);
Mesossomos extensão da membrana plasmática para o citoplasma; podem ficar próximos a membrana plasmática ou aprofundar-se; 
Membrana plasmática:
Mesossomos profundos estão ligados ao material nuclear e envolvidos na replicação DNA e divisão celular;
Mesossomos periféricos não estão ligados ao material nuclear estão envolvidos com a secreção de penicilinases que destroem as penicilinas;
Nucleóide:
Cromossomo único circular;
Sem membrana nuclear
Plasmídeos fita dupla de DNA extra cromossomais que podem ser passados de bactéria à bactéria, carregando consigo informações genéticas. Funções:
Resistência
Tolerância a metais tóxicos
Produção de toxinas
Síntese de enzimas
Difusão e Osmose através
da Membrana Citoplasmática:
1-Difusão Simples - é passivo e a célula não gasta energia para realizá-lo. O soluto se movimenta do lado menos diluído para o mais diluído até o equilíbrio. 
2-Difusão por meio de Permeases - transporte da maior parte de nutrientes para dentro da célula. Requer gasto de energia pela célula
Difusão e Osmose através da Membrana Citoplasmática:
3-Osmose - passagem do solvente de uma solução de baixa concentração de soluto (alta conc. de água) para uma solução com alta concentração de soluto (ou baixa conc. de água). A força com que a água se move através da membrana é a pressão osmótica. 
As células microbianas podem ser expostas a 3 tipos de condições osmóticas :
Difusão e Osmose através da Membrana Citoplasmática:
Isotônica - a concentração total dos solutos é a mesma em qualquer lado da membrana;
Hipotônica - a concentração do soluto é mais baixa no interior da célula. A água entra na célula por pressão osmótica. A maioria das células crescem nesta condição;
Hipertônica - a concentração do soluto é mais alta no interior da célula. A água deixa a célula por pressão osmótica;
Formas latentes:
Esporos e cistos
Podem sobreviver a condições desfavoráveis como dessecamento e calor;
Metabolicamente inativas;
Sob condições favoráveis podem germinar(crescer) e tornar vegetativas e ativas;
Esporos:
Esporos que se foram dentro da célula- endósporo
Possuem parede celular espessa, brilham muito com a luz do microscópico, e são altamente resistente às mudanças ambientais - a maioria suportam ate 80 oC/10min;
Seu posicionamento: 
Terminal
Subterminal
Central
Endósporo: 
Bactérias Gram positivas Bacillus e Clostridium;
Saúde publica- Botulismo. Os endósporos do Clostridium botulinum podem resistir á fervura por varias horas;
São um problema na indústria alimentar porque elas sobrevivem a procedimentos de processamento que não sejam adequados;
Endósporo: 
O esporo contém o ácido dipicolínico (DPA) não encontrados em células vegetativas, ocorre em combinação com grande quantidade de cálcio, e provavelmente contribui na resistência ao calor;
As bactérias Actinomicetes produzem outro tipo de esporo, o conídio, muito resistente ao dessecamento mas não tanto ao calor;
Esporulação:
Esporulação ou esporogênese
Vegetativo – Endósporo
Rompe a parede celular
Agua é eliminada
Liberando o endósporo
Germinação:
Endósporo – Vegetativo 
Lesão no envoltório do endósporo
Entrada de agua
Reativação do metabolismo
Cisto:
Apresenta estrutura e composição química diferente dos endósporos, e não apresentam alta resistência ao calor. Ex. cistos presentes em Acetobacter;