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Meios de Cultura Urocultura, Hemocultura e Coprocultura Nathaly Renata Henrique Gregório São preparações químicas utilizadas no diagnóstico laboratorial de diversos microorganismos, por possuir os nutrientes necessários para o seu crescimento; Compostos por açúcares, nitrogênio, fósforo, vitaminas, aminoácidos, etc; Sólido, semi-sólido e líquido; Enriquecimento, seletivo, não-seletivo e de transporte. Meios de cultura As infecções do trato urinário (ITU) estão entre as doenças infecciosas mais comuns na prática clínica; Trato urinário alto: pielonefrites ou ureterites; Trato urinário baixo: cistite e uretrite; As infecções podem ser causadas por via ascendente (uretra), hematogênica (infecção sistêmica), linfática (conexões linfáticas) e através da colocação de sonda vesical. Urocultura Urina de jato médio é a amostra mais comum para a realização de cultura; Pode ser utilizada urina de cateter vesical, sonda de alívio, punção subrapúbica e amostra de primeiro jato; Para a cultura é utilizada alça de 1 µl (jato médio) ou 10 µl (sonda vesical); A semeadura é quantitativa em ágar cled ou CPS; A placa é incubada à 37° por 24-48 horas. Semeadura quantitativa Meio não seletivo utilizado para o isolamento, contagem e identificação de bactérias causadoras de ITU; Permite o crescimento de bactérias gram –, gram + e leveduras; Composto por gelatina, extrato de carne, L-cistina, lactose e azul de bromotimol; Cled A lactose presente no meio facilita a identificação de bactérias fermentadoras da mesma, através da mudança da coloração do meio (verde amarelo). Permite a identificação dos principais patógenos causadores de ITU, através de agentes cromogênicos específicos (peptonas) da atividade enzimática bacteriana; Esse meio é baseado em ágar cled; Composto por extrato de carne, peptonas, L-cistina, extrato de levedura, substratos, ágar e água destilada. CPS Utilizada no diagnóstico de infecções sistêmicas, que podem levar a um aumento da morbidade e mortalidade; Pode ocorrer a partir de um foco primário de infecção ou por entrada direta na corrente sanguínea via agulhas ou outros dispositivos vasculares; A coleta é realizada geralmente por via venosa em frasco de hemocultura. Hemocultura O frasco de hemocultura (contém caldo BHI) permanece incubado à 36ºC por 5 dias (bactérias) e 15 dias (fungos) no equipamento Bact/Alert 3D; No frasco há uma membrana sensível à CO2 que adquire coloração amarelada quando ocorre crescimento de microorganismos; O equipamento emite um feixe de luz que realiza a leitura dessa membrana, liberando os resultados como positivo ou negativo; Primeira fase Utilizado na recuperação de microorganismos, incluindo bactérias aeróbicas, anaeróbicas e fungos; Possui em sua formulação peptona e infusão cérebro-coração que servem de fonte de nitrogênio, carbono, enxofre e vitaminas. A glicose é utilizada na fermentação. Composto por infuso cérebro-coração, peptona, dextrose, cloreto de sódio, fosfato dissódico e água destilada. Caldo BHI Em amostras positivas para bactérias é realizada coloração de gram e semeadura qualitativa em ágar chocolate e macconkey; Em amostras positivas para fungos a semeadura é realizada em meio cromogênico para cândida e ágar sabouraud. É utilizada alça metálica. Segunda fase Meio utilizado no isolamento de microorganismos fastidiosos de difícil crescimento em meios simples; Os suplementos contidos no polienriquecimento fornecem os substratos necessários para o crescimento desse patógenos; Composto por peptona de caseína, peptona de carne, amido de milho, fosfato dipotássico, fosfato monopotássico, cloreto de sódio, ágar sangue de carneiro, polienriquecimento e água destilada. Chocolate Meio utilizado na detecção e isolamento de Candida spp.; Permite a identificação de diferentes espécies através da coloração devido à presença de substrato cromogênico na formulação; Composto por glicose, peptona, cloranfenicol, ágar e água destilada. Cromogênico para candida Meio não seletivo para cultura e manutenção de fungos patogênicos e não patogênicos, especialmente dermatófitos; Composto por hidrolisado pancreático de caseína, hidrolisado péptico de tecido animal, dextrose, ágar e água destilada. Sabouraud É o exame bateriológico das fezes utilizado no diagnóstico de gastroenterite; Pode ser causada por bactérias invasoras (colonizam o tubo gastrintestinal, podendo atingir outros locais) e por bactérias toxigênicas (liberam toxinas gerando atividade patogênica); Coprocultura É utilizada alça de 1µl; A semeadura em placa de ágar XLD e Maconkey é realizada de forma qualitativa por esgotamento; Cultura em caldo selenito. Semeadura qualitativa por esgotamento Meio seletivo para enterobactérias destinado à detecção, isolamento e contagem de patógenos intestinais; Organismos que fermentam lactose produzem pH localizado gerando coloração vermelha ou rósea à colônia, enquanto que não fermentadoras permanecem incolores; Composto por peptona de caseína, peptona de carne, peptona de gelatina, sais biliares, lactose, cloreto de sódio, vermelho neutro, cristal violeta, ágar e água destilada. MacConkey Meio seletivo para isolamento e diferenciação de patógenos entéricos gram – (Salmonella e Shigella) fermentadores de lactose; Utiliza o desoxicolato de sódio como agente seletivo por apresentar ação inibitória para bactérias gram +; Composto por xilose, L-lisina, lactose, sacarose, cloreto de sódio, extrato de leveduras, vermelho de fenol, desoxicolato de sódio, tiosulfato de sódio, citrato de amônia férrico, ágar e água destilada. XLD Inibe coliformes e outras espécies da microbiota intestinal, favorecendo o enriquecimento e isolamento de Salmonella e Shiguella spp.; Composto por peptona, lactose, bisselenito de sódio e água destilada. Caldo selenito Obrigada!
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