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* CITOPATOLOGIA TÉCNICAS COLHEITA/ FIXAÇÃO/ COLORAÇÃO * * COLHEITA Exfoliativa: Fundo de saco vaginal (células descamadas naturalmente) Espátula de Ayres Abrasiva: Raspado da mucosa cervical (ecto e endocervice) e vaginal Espátula de Ayres e escova de náilon OBS: O uso da escova deve ser feita sem traumatizar a mucosa, fazendo uma rotação de 360° assim como a espátula na ectocérvice. * INTRUMENTOS PARA COLHEITA * LOCAIS DE COLHEITA * COLHEITA Espalhamento na lâmina: A lâmina deve ser de borda fosca, para identificação, limpa e nova (sem ranhuras). Fazer um esfregaço oriundo da vagina, ectocérvice endocérvice (VCE) sem circunvoluções. O esfregaço não pode ser espesso. Um esfregaço ideal é aquele possui acima de 30.000 células(escamosas, metaplásicas e endocervicais) * FIXAÇÃO OBJETIVO: Preservar o estado morfológico das células. Fixação deve ser realizada imediatamente após a colheita, para evitar dessecamento. * TIPOS DE FIXAÇÃO 1) Molhada: Álcool-éter (1/1), álcool 95%, álcool absoluto, metanol, isopropanol 80%. OBS: Pode ser realizada no prazo de 15 a 30 minutos ou deixar no próprio frasco até chegar ao laboratório. 2) Fixação em cobertura (camadas): Spray com polietilenoglicol + álcool isopropilico (carbowax) OBS: Lançar o spray a 30 cm da lâmina, antes de corar retirar a camada em álcool a 95% durante 15’ Pouco recomendado em função de erros que provocam a dessecação do esfregaço. * * OUTROS TIPOS DE FIXAÇÃO Fluidos: Álcool 50 a 70% Material mucoide: Álcool 50% + 2% poliglicol Cell-block: Formalina a 10% * COLORAÇÃO SHORR: Realizada por alguns laboratórios PAPANICOLAOU: A mais preconizada. Mundialmente conhecida (1942) Corante nuclear: Hematoxilina de Harris (cora o núcleo em azul) Corantes Orange G e EA 36 ou 50: Cora o citoplasma de acordo com a maturação do citoplasma * COLORAÇÃO DE PAPANICOLAOU Vantagens do método: Definição dos detalhes nucleares Transparência citoplasmática Diferenciação celular Fases do método: Hidratação Desidratação Diafanização * COLORAÇÃO DE PAPANICOLAOU CONFORME O INCA 1) HIDRATAÇÃO PROGRESSIVA Álcool a 96% Álcool a 70%................ 01 min. Água corrente............... 01 min. 2) COLORAÇÃO NUCLEAR Hematoxilina de Harris....... 1,30 min. Água corrente HCl aquoso 1 ou 0,5%........... 05 dips Água corrente....................... 1,30 min. * COLORAÇÃO DE PAPANICOLAOU 3) DESCOLORAÇÃO Álcool a 95%............................................. 05 dips Duas cubas com álcool absoluto........... 05 dips cada 4) COLORAÇÃO CITOPLASMÁTICA Orange G....................................................... 30 segundos Três cubas com álcool absoluto............... 05 dips cada 5) COLORAÇÃO CITOPLASMÁTICA EA 36................................................................ 02 min. Quatro cubas com álcool absoluto............. 10 dips * COLORAÇÃO DE PAPANICOLAOU 6) DIAFANIZAÇÃO Xilol + álcool absoluto(1/1)............... 10 dips Quatro cubas com xilol..................... 10 dips 7) MONTAGEM Lâmina Lamínula Resina, Bálsamo do Canadá, Verniz, Entelan
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