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ESTERILIZAÇÃO Esterilização pelo calor 2 Calor úmido Coagulação das proteínas; destruição de células vegetativas e esporos Aplicações: Meios de cultura e soluções aquosas Materiais pouco resistentes ao calor (plásticos resistentes, etc.) Equipamento/técnicas: Autoclave (atmosfera de vapor de água sob pressão) Pasteurização (aquecimento do produto por um período de tempo que varia com produto a pasteurizar e a temperatura utilizada) Tindalização (aquecimento a 65-100ºC durante 30-60 min, intercalado com incubação a 35ºC – ciclos que podem repetir-se até 3 dias) CALOR ÚMIDO Uso em meios de cultura, instrumentos, soluções Não se deve embalar material com papel alumínio, dá-se preferência ao papel comum Retirada total do ar da autoclave Pressão (psi) Temperatura (ºC) 0 100 5 110 10 116 15 121 20 126 30 135 Esterilização pelo calor 6 Calor seco Oxidação e desnaturação das proteínas Combustão da matéria orgânica Aplicações: Materiais resistentes a altas temperaturas (ansas, vidros não calibrados, etc.) Equipamento Estufas a 160-180ºC (2 horas) Equipamento de incineração ou queima direta FILTRAÇÃO A VÁCUO Usada para esterilizar material sensível ao calor (termolábil) Enzimas, vacinas, meios de cultura específicos, soluções de açúcares Filtros de membrana: ésteres de celulose Poros de 0,22 a 0,45 µm Esterilização por filtração Remoção de microrganismos em membranas filtrantes com poro nominal inferior às dimensões bacterianas (0,2 µm) Aplicações: Produtos termo lábeis, voláteis ou sensíveis a altas pressões (ex: antibióticos e vitaminas) Equipamento/técnicas: Filtração com funil (grandes volumes) Filtração com seringa (pequenos volumes) Filtração de ar em câmaras de fluxo laminar 9 Prescott, Microbiology, 5th edition Esterilização por radiações 11 Raios X e : Poder ionizante e elevado poder de penetração - para objectos volumosos Raios UV: Menor energia, radiação pouco penetrante usada para esterilização de superfícies Ultra-sons (radiação de alta frequência) Destruição mecânica de células Raios catódicos (feixes de electrões de intensidade e velocidade elevadas): Esterilização de material cirúrgico
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