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Profª Giovanna Critérios de Classificação Características fenotípicas: morfologia, propriedades tintoriais, características bioquímicas, antigênicas e padrões de sensibilidade a drogas. Características genotípicas: sequência dos genes. Dentro de uma mesma espécie existem as cepas. Ex: E. coli sensível e E. coli resistente a antibióticos. Estrutura Região Nuclear Ausência de núcleo estruturado e de carioteca. Os genes estão no cromossomo, nos plasmídeos e nos transposons. Cromossomo Molécula longa de DNA de fita dupla circular, extremamente condensado. Plasmídeos Pequenas moléculas circulares de DNA de fita dupla. 10% do DNA Transposons Pequenos segmentos de DNA móveis que trocam de posição e transferem genes entre os cromossomos e os plasmídeos e vice versa. São genes que codificam proteínas estruturais (toxinas e enzimas). Podem alterar o fenótipo, causando resistência, por exemplo. Citoplasma 80% de água. Alta concentração de íons orgânicos. Presença de ribossomos e grânulos de reserva. Ribossomos Granulações presentes no citoplasma que participam da síntese de proteínas. Membrana citoplasmática Dupla camada de fosfolipídeos. Possui proteínas que formam canais para trocas nutritivas e permeabilidade seletiva por processos passivos e ativos. Produção de energia: as bactérias não possuem mitocôndrias, a membrana as substituem na produção de ATP. Parede celular Circunda a membrana citoplasmática. Protege contra alterações do ambiente e da lise por pressão osmótica. Manutenção da forma. Âncora para os flagelos. São complexas, rígidas e porosas. Contém peptidoglicano. Parede Celular A estrutura dos componentes e funções das paredes celulares diferenciam as bactérias Gram positivas das Gram negativas. Contribuem para as repostas da imunidade inata humana. Parede das Gram-positivas Parede espessa Constituição: 90% de peptidoglicano, até 40 camadas. 10%: ácidos teicóicos, lipoteicóicos e proteínas. Parede das Gram-negativas Complexa. Pouco peptidoglicano Espaço periplasmático: abriga fatores de virulência das patogênicas. Possuem membrana externa. Lipopolissacarídeo (LPS): funciona como endotoxina, com ação tóxica contra células humanas. Não possuem ácido teicóico. Gram-negativas Lipopolissacarídeo (LPS) Localizado na membrana externa das Gram - Molécula de grandes dimensões constituída por um lipídio e um polissacarídeo (carboidrato). Lipídeo A. Igual em todas as bactérias Gram-negativas. Muito tóxico – endotoxina bacteriana. Provoca forte resposta imunológica. Membrana externa Presente nas Gram-negativas Semelhante a membrana plasmática, porém mais seletiva. Cápsula (Glicocálice): Camada rígida com fronteira definida formada por uma série de polímeros orgânicos que nas bactérias se deposita no exterior da sua parede celular. Confere proteção à fagocitose, que é um fator de virulência – causa doenças mais graves. Forma o biofilme (ex: gosma de sabonete): aderência a superfícies de agregados de bactérias. Flagelos Apêndices longos, filamentos rígidos. Locomoção e aderência. Peritríqueo Anfotríqueo Lofotríqueo Monotríqueo Fímbrias Semelhantes a pelos. 2 tipos: adesão e conjugação (transferência de material genético, fímbria sexual). Coloração de Gram Coloração de Gram É um teste rápido, importante e fácil que permite aos clínicos a diferenciação entre as duas mais importantes classes de bactérias. Coloração de Gram Coloração diferencial. Gram-positivas: retém o corante violeta de genciana devido à grande quantidade de peptidoglicano na parede celular. Gram-negativas: não fixam o corante violeta devido a pouca quantidade de peptidoglicano, fixando os corantes de contraste: safranina ou fucsina de tonalidade vermelha ou rosa. Técnica Fixação por calor; Cristal de violeta (1min) Lavagem com H2O; Lugol (1min); Lavagem com H2O; Álcool-Acetona; Safranina (30 seg). Princípio Forma-se um complexo: Lugol (Iodo) – Peptidoglicano – violeta. Na etapa de descoloração o álcool quebra o complexo, retirando o Iodo e a Violeta do peptidoglicano. A descoloração retira então o corante da Gram- negativa mas não é suficiente para retirar todo o corante da Gram-positiva. Micobactérias São do gênero Mycobacterium Possuem na sua parede celular uma grande concentração de lipídeos ligados ao peptidoglicano, devido à presença de ceras e ácidos graxos (ácidos micólicos), o que dificulta a sua visualização através das colorações tradicionais. Esta cobertura é responsável por sua virulência e é antifagocitária. Bactérias álcool-ácido resistentes O ácido micólico na parede celular possui afinidade pelo corante fucsina. Coloração específica – Ziehl-Neelsen: bactéria fica tingida em vermelho. É adicionada uma coloração de contraste de azul de metileno a qual permite observar a bactéria contra um fundo azul. Corantes fluorescentes também podem ser utilizados. BAAR BAAR – bacilos álcool-ácido resistentes Bactérias sem parede celular Não possuem parede celular de peptidoglicano. Apresentam membrana trilaminar. Membrana constituída por colesterol. Mycoplasma e Ureaplasma. Características Gerais Características Gram + Gram - Ácido resistente Peptidoglicano espesso fino pequena Ácido teicóico presente ausente ausente Lipídeos raros LPS ác. Micólico Membrana externa ausente presente ausente Esp periplasmático ausente presente ausente Forma rígida rígida ou flexível rígida ou flexível Morfologia Cocos Bacilos Espiralados Cocos Esféricos ou levemente ovalados. Bacilos Cilíndricos. Espiralados Uma ou mais curvaturas. Vibriões: ligeiramente curvos. Espirilos: forma helicoidal e corpo rígido. Espiroquetas: forma helicoidal e corpo flexível. Esporos Estruturas de resistência. Produzidos por bacilos Gram + Coferem resistência a condições adversas por longos períodos de tempo – suportam temperaturas extremas, falta de água, substâncias tóxicas. São células em repouso, desidratadas, produzidas por esporulação ou esporogênese. Após o processo de germinação a bactéria pode voltar a se multiplicar. Morfologia