Aula 5 hemocultura, liquídos, secreção respiratoria

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Disciplina de Microbiologia Clínica 
Recife/PE
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 Identificar presença de microrganismos viáveis no sangue (agravamento do quadro infeccioso);
 Exame crítico e de grande importância; 
 Causas da bacteremia/ fungemia
 Drenagem do microrganismos a partir de um foco primário através de vasos linfáticos
 Entrada direta na corrente sanguínea via agulhas ou outros equipamentos
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 Bacteremias transiente, intermitentes, e contínua.
 Microrganismos mais frequentes: Gram +( Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativo, Enterococcus spp,Candida spp) Gram – ( E. coli, Klebsiella pneumoniae...) 
Rápida com duração de minutos a horas
Desaparece e volta a ocorrer
Endocardite infecciosa e infecções intravasculares
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 Material clínico: punção venosa ou arterial (*)
 adultos 3 amostras
 crianças: 2 amostras 
 Média: intervalo de 30/30 min;
 depende da solicitação médica
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 Coleta: proporção de 1/10 de sangue e meio de cultura;
Adultos: 45 ml ( 5 ml de sangue
Crianças: 9 ml ( 1ml de sangue)
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 Processamento: 
 Metodologia manual: limitações, 
 Desvantagens: tempo (7 dias de incubação) agitação do frasco. 
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 Processamento: Metodologia Manual
1) Frasco em estufa 24 horas
2) Após 24 h: semeio em ágar sangue e macconkey ( semeio qualitativo) estufa 35ºC
3) Após 48 h: semeio em ágar sangue, estufa 35ºC
4) Após 7 dias: semeio em ágar chocolate (uma gota) estufa e método da vela;
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 Processamento: Metodologia Automatizada
 Mais eficiente, rapidez nos resultados e diminuição do trabalho técnico;
 Até 5 dias de incubação
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 Processamento: Metodologia Automatizada
 Baseado na detecção de CO2, produzido pelos microrganismos;
 Frasco possui na base um sensor, que na presença de CO2 provoca mudanças no pH, alterando a coloração;
 Equipamento monitoriza a cada 10 minutos com agitação;
Frascos para aeróbicos e para anaeróbicos (10 ml de sangue)/ pediátricos (4 ml)/ FAN (uso de antibióticos, 10ml)/ Micobactérias (5 ml de sangue)
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 Interpretação das Hemoculturas positivas:
 Cuidados: falsos-positivos;
 Não existe o “gold standard” para diferenciar patógenos de contaminantes;
 Agentes mais frequentes: S. aureus; E.coli; outras da família Enterobacteriaceae; Pseudomonas aeruginosa; S. pneumoniae, Candida albicans
 Raramente apresentam bacteremia: Corynebacterium spp; Bacillus spp; Propionobacterium acnes .
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 Como reportar o resultado:
 Bacterioscopia : Gram: 
 Observar agrupamento e coloração;
Cultura: 
 Resultado parcial: Resultado preliminar com 24 h de crescimento.
 Resultado final: Reportar o resultado de cada amostra colhida.
 Negativo: Não Houve Crescimento de Microrganismos
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 Qualquer região ou fluído estéril pode ser infectado por microrganismos;
 Tipos de amostras solicitadas: 
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 Líquido Pleural: localizado entre o pulmão e a pleura.
 Processado em até 2 horas a t.a (20 a 25ºC)
 Coleta for maior que 1 ml, pode ser inoculado em frascos de hemocultura.
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 Líquido Peritoneal: 
 Cavidade peritoneal engloba os órgãos da região abdominal e pélvica.
 Pessoa normal ele apresenta pouca quantidade e baixo leucócito e proteína.
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 Líquido cefalorraquidiano: crânia e o cortex cerebral
 Meningite aguda é uma das doenças mais comuns do SNC;
 Origem viral, bacteriana e fúngica;
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 Líquido cefalorraquidiano:
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 Líquido cefalorraquidiano:
 Material clínico: Tubo estéril e encaminhada ao laboratório a t.a, o mais rápido possível;
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 Teste rápido: 
Detecção de antigeno de estreptococos 
do grupo A (Streptococcus pyogenes). 
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 Gram + cultura (semeadura)
 Semeio em ágar sangue e chocolate (quando necessário: pesquisa de bactérias fastidiosas)
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 Ex 1: Cultura de Orofaringe
 Relatar todos os microrganismos presentes
Streptococcus pyogenes (várias)
 Streptococcus viridans (poucos) 
 Corynebacterium spp (poucos)
 Ou relatar os microrganismos da microbiota normal sem especificar.
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 Pneumonias e bronquites;
 Pneumonias de origem hospitalar ou adquirida na comunidade
 Material clínico: Escarro, aspirado traqueal, lavado brônquico alveolar, escovado brônquico.
 Transporte: 
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 Escarro:
 Primeira amostra da manhã;
 Enxaguar a boca várias vezes com água, colher amostras após tosse profunda, em frasco de boca larga.
 No caso de escarro induzido o laboratório deve ser informado.
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 Aspirado traqueal
 Geralmente pacientes internados em UTI´s
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 Lavado brônquico alveolar
 Geralmente pacientes internados em UTI´s. 100 ml de solução fisiológica são injetados,utilizando o canal do broncoscópio. Após 3 a 5 minutos é aspirado um volume no mínimo 40% do volume injetado.
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 Microscopia- Método de Gram
 Selecionar a parte mais purulenta, após a coloração observar ao microscópio a qualidade do material enviado.
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 Cultura: Escarro
 Porção mais purulenta semeada em CHOC, AS, MC.
 Incubar a placa de MC em estuda aeróbica a 35ºC, e AS e CHOC, na estufa com 5 a 10% de CO2 a 35ºC.
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 Cultura: Aspirado traqueal ( QUANTITATIVA)
 método da diluição seriada.
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 Cultura de lavado´s e aspirado traqueal
 Multiplicar o número de microrganismos pela diluição.
 Fazer o antibiograma se a contagem dos microrganismos isolados for iguais aos valores preconizados.
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 Cultura de Escarro
 Semiquantitativamente sempre correlacionando com o Gram;
Ex1: Haemophylus influenza (várias) ANTIBIOGRAMA
 Neisseria spp (raras)
 Streptococcus grupo viridans (raras)
 Cultura quantitativa
 Ver os valores considerados significativos para cada material;
 Ex2: Material Clínico: Lavado brônquico alveolar
 Klebsiella pneumoniae: 105 UFC/mL
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