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Reprodução bacteriana Profª. Juliana Munduruca Reprodução Reprodução Reprodução Reprodução bacterianabacterianabacterianabacteriana As bactérias se reproduzem por fissão binária (bipartição ou cissiparidade), processo no qual uma célula-mãe se divide para formar duas células-filhas (crescimento exponencial ou crescimento logarítmico). Crescimento exponencial C r e s c i m e n t o m i c r o b i a n o Fases do ciclo de crescimento • Fase lag (fase de retardo): ocorre uma vigorosa atividade metabólica, mas as células não se dividem. Pode durar de poucos minutos a muitas horas. • Fase log (logarítmica): ocorre uma rápida divisão celular. • Fase estacionária: ocorre quando há carência de nutrientes ou a presença de produtos tóxicos provoca a redução do crescimento até que o número de células novas produzidas seja equivalente ao número de células que morrem, resultando numa situação de equilíbrio na população. • Fase final, de morte ou de declínio: é marcada por um declínio no número de células viáveis. Isolamento de microrganismos em cultura pura Isolamento de microrganismos em cultura pura • A colônia é um conjunto de células idênticas que tem como origem uma única célula ou esporo. • Técnica de esgotamento • Repique • Cultura pura Contagem de microrganismos Direta: contagem em placas, diluições em placas, filtração, método do número mais provável e contagemmicroscópica direta. Indireta: turbidiometria, atividade metabólica e peso seco. Contagem de microrganismos • Contagem em placas: é o principal método de contagem de células viáveis. É um método demorado, visto que é necessário aguardar a multiplicação de uma célula isolada no meio sólido, de modo que esta forme uma colônia microscopicamente visível, a ser contada. Contagem de microrganismos • Técnica das diluições em placas ou diluição seriada: pode ser utilizada tanto para o isolamento como para a contagem de microrganismos. • Permite duas variantes: inoculação em superfície e inoculação em profundidade. Contagem de microrganismos • Filtração: geralmente utilizado quando a quantidade de bactérias é muito pequena, como lagos ou correntes de água relativamente puras. • Também pode ser utilizado para contagem de microrganismos do ar. • Método do número mais provável: pode ser utilizado para microrganismos que crescem em meio líquido. É uma determinação estatística. Contagem de microrganismos Contagem de microrganismos • Contagem microscópica direta: os microrganismos de um determinado volume de uma suspensão bacteriana são contados com a utilização de uma lâmina especialmente desenvolvida, chamada contador de células Petroff- Hausser. • Vantagens: não precisa de incubação • Desvantagens: bactérias móveis são difíceis de serem contadas e as mortas podem ser contadas como vivas. Contagem de microrganismos • Turbidiometria: bactérias que se desenvolvem em meio líquido podem deixa-lo turvo ou opaco com suas células. • Com o uso de um espectrofotômetro é possível medir a quantidade de luz que atravessa a amostra e assim estimar a população microbiana. Contagem de microrganismos • Atividade metabólica: é uma maneira indireta de estimar o número de bactérias através de medidas de atividade metabólica, como produção de ácido ou consumo de oxigênio. Este método considera que a quantidade de produtos excretados através do metabolismo microbiano é proporcional ao número de células presentes. • Peso seco: utilizado para microrganismos filamentosos, cuja contagem não pode ser determinada por outros métodos. Nesse caso, a massa de células é obtida por filtração ou centrifugação, após o que é lavada e seca em forno ou dessecador, até peso constante.
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