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ENZIMA: DNA POLIMERASE Vitória Luíza Damasceno Ciências Biológicas – Licenciatura Bioquímica Dna Polimerase no Ciclo Celular Cada vez que uma célula se divide, são necessárias Polimerases de DNA para ajudar a duplicar o DNA da célula, de modo que uma cópia da molécula de DNA original possa ser passada para cada célula filha. Desta forma, a informação genética é transmitida de geração em geração Antes que a replicação possa ocorrer, uma enzima chamada helicase desenrola a molécula de DNA da sua forma bem tecida. Isso abre ou "descompacta" o DNA de cadeia dupla para dar dois fios simples de DNA que podem ser usados como modelos para replicação. Catalisa o ataque nucleofílico da OH 3’ ao dNTP livre; Dirige a termodinâmica da reação; Cadeias de DNA são alongadas somente no sentido 5’- 3’; Dependente de primers; Fornece uma OH 3’ confiável para o início da replicação e isso reduz possíveis erros na síntese; DNA Polimerase II. Localização A replicação do DNA acontece no núcleo, frequentemente as DNA Polimerases são mostradas se movendo ao longo do molde de DNA. Porém algumas técnicas mais precisas mostram que a replicação do núcleo da célula eucariótica ocorre em um número limitado de sítios fixos (fábricas de replicação), ou seja, a DNA polimerase é fixa e dela é expelido o DNA recém-duplicado. III. Reação catalisada A DNA – polimerase utiliza um único sítio ativo para catalisar a síntese do DNA. O pareamento correto das bases é necessário para que a DNA-polimerase catalise a adição do nucleotídeo. Ambas as fitas do DNA são sintetizadas juntas na forquilha de replicação, com orientação antiparalela. Durante o processo de replicação, as pontes de hidrogênio são catalizadas e os nucleosídeos livres unem-se a elas, respeitando sempre a regra do emparelhamento: Adenina-Timina, Citosina-Guanina. À medida que se encaixam nas cadeias do DNA, vão formando duas novas cadeias, obedecendo a regra da replicação semi-conservativa. Os cofatores mais comuns incluem íons inorgânicos como o ferro e magnésio. Por exemplo, a enzima que constrói as moléculas de DNA, a DNA polimerase, requer íons de magnésio para funcionar, o zinco também participa de vários sistemas enzimáticos como cofator da RNA e DNA polimerases IV. Cofator DNA Polimerase é uma enzima Alostérica ou Michaelis Menten? A DNA Polimerase é uma enzima regulada por modificações não-covalentes que nós podemos chamar de Alostéricas. Elas contêm uma região separada daquela em que se liga o substrato, onde as moléculas regulatórias podem se ligar e modificar a atividade catalítica. Ao ligar-se à enzima, o efetor alostérico pode aumentar (efetor positivo) ou diminuir (efetor negativo) a atividade catalítica, através de modificações no sítio catalítico. V. Mecanismo de regulação Um dos mecanismos de regulação da DNA polimerase durante a replicação é a DNA Polimerase III, que por si só apresenta uma baixa afinidade pela fita simples e é capaz de fazer a síntese de pequenos trechos do DNA. É uma proteína móvel que age como uma “cinta reguladora” chamada de grampos deslizantes que “prende” a DNA Polimerase na fita de DNA molde, que como consequência aumenta a eficiência da polimerização. Ela libera a DNA Polimerase quando encontra a fita dupla de DNA A subunidade beta da DNApol III é chamada dímero e forma um anel em torno no DNA. VI. Importância para o Organismo Por meio da replicação podemos entender como nós, seres humanos, fomos formados a partir de sucessivas divisões de uma célula, fruto da fecundação de um ovócito pelo gameta masculino, o espermatozóide, originando o zigoto, passando por intensa multiplicação até resultar em um organismo tão complexo, um novo ser humano. Bibliografia http://graduacao.iqsc.usp.br/files/Aula02_BioqII-Qui_DNARecRepliRepa1.pdf http://www2.bioqmed.ufrj.br/prosdocimi/courses/bioquimica/Aula_7_ReplicacaoDoDNA.pdf https://www.infoescola.com/genetica/replicacao/ https://pt.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/enzyme-regulation/a/enzyme-regulation https://enzyme.expasy.org/cgi-bin/enzyme/enzyme-search-ec http://www.ciclocelular.com.br Princípios de Bioquímica de Lehninger (6° Edição) - Livro por Albert Lehninger e David L. Nelson Biologia Molecular do Gene - 7ª Ed. 2015 - Watson,James D. / Baker,Tania A. / Bell,Stephen P.
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