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SISTEMA ABO IMUNOLOGIA CLÍNICA MsC. José de Jesus Rodrigues Marques Farmacêutico-Bioquímico Sistemas de grupos sanguíneos eritrocitários mais importantes Ao todo, já foram descritos 30 sistemas e aproximadamente 285 antígenos! ABO Rh Kell Duffy Kidd MNS Lewis Diego A B H D E C e c K k Le Fy M S N s P I i SISTEMA ABO O sistema ABO foi descoberto por Landsteiner em 1900 Em 1940, foi decidido a definição dos grupos A, B, AB, O e o sistema passou a ser conhecido como ABO. Sistema ABO - Sistema 001 na Terminologia da Sociedade Internacional de Transfusão Sangüínea (ISBT) SISTEMA ABO O locus ABO encontra se no braço longo do cromossomo 9. Os antígenos do sistema ABO são produtos secundários do gene ABO, sendo esses não restritos a membrana eritrocitária , mais também podem ser encontrados na saliva, nos linfócitos, plaquetas entre outros. Os anticorpos do sistema ABO aparecem após os 4 meses de idade. SISTEMA ABO SISTEMA ABO DIFERENÇA DE SECRETOR E NÃO SECRETOR - Embora todas as pessoas tenham o antígeno do sistema ABO no sangue, 80% das pessoas tem também este antígeno nas suas secreções (saliva, urina, mucosas, espermatozóides) são chamados de secretores. Os não secretores não apresentam o antígeno do sistema ABO nas secreções do corpo. SISTEMA ABO Os antígenos do sistema de grupo sanguíneo ABO são carboidratos determinados pela ação de enzimas chamadas glicosiltranferases que adicionam monossacarídeos a um substrato chamado, antígeno H. O antígeno H é um carboidrato produzido pela ação de uma enzima chamada fucosiltranferase. SISTEMA ABO A enzima N-acetil-D-galactosaminiltransferase adiciona o monossacarídeo N-acetilgalactosamina no grupo sanguíneo A; e a enzima galactosiltransferase adiciona por sua vez, a D-galactose no grupo sanguíneo B. O grupo sanguíneo AB possui atividades destas duas enzimas. O Grupo sanguíneo O não possui transferase A e nem B, mais apresenta o antígeno H em grande quantidade nas superfícies das hemácias. 9 SISTEMA ABO SISTEMA ABO HERANÇA DOS GRUPOS ABO - Três genes responsáveis: • gene A (co-dominante) • gene B (co-dominante) • gene O (recessivo). SISTEMA ABO SISTEMA ABO GRUPO ABO ANTÍGENOS (HEMÁCIAS) ANTICORPOS (SORO) GENÓTIPO O NENHUM ANTI-AeANTI-B OO A A ANTI-B AAeAO B B ANTI-A BBeBO AB A e B NENHUM AB SISTEMA ABO CLASSIFICAÇÃO ABO PROVA DIRETA: testa-se as hemácias de um indivíduo com reagentes anti-A, anti-B e anti-AB. PROVA REVERSA: utilizam se hemácias A1 e B para detectar no soro a ser testado a presença ou não de Anti-A ou Anti-B. REAGENTES MONOCLONAIS x POLICLONAIS REAGENTES POLICLONAIS: são preparados de soro humano contendo os anticorpos adequados, e respondem a diversos epítopos antigênicos, portanto com menor especificidade. REAGENTES MONOCLONAIS: são secretados por uma população de células idênticas (clones) e são homogêneos em estrutura e especificidade de ligação. Reconhecem apenas um epítopo, sendo assim muito mais específicos no reconhecimento de antígenos. REAGENTES MONOCLONAIS x POLICLONAIS EPÍTOPO: é o lugar específico onde o antígeno se liga ao anticorpo. TIPAGEM ABO x RN Prova Direta até os 4 meses. Lavagem das hemácias de cordão umbilical REAÇÃO DE AGLUTINAÇÃO A aglutinação é a reação de um anticorpo presente naturalmente ou produzido no plasma com deteminados antígenos na membrana das hemácias, formando um aglomeramento de pequenas massas de células. GRAUS DE AGLUTINAÇÃO 0 Ausência de aglutinação 1+ Presença de grumos pequenos, fundo róseo (células suspensas) 2+ Presença de grumos médios a grandes com fundo róseo. 3+ Presença de grumo grande com alguns pequenos, fundo claro 4+ Grumo único, fundo claro TÉCNICA EM TUBO 4+ 3+ TÉCNICA EM TUBO 2+ 1+ TÉCNICA EM TUBO 0 W CLASSIFICAÇÃO SANGUÍNEA ABO PROVA DIRETA PROVA REVERSA GRUPO ANTI-A ANTI-B ANTI-AB A1 B RESULTADO 4+ 0 3+ 0 4+ A CLASSIFICAÇÃO SANGUÍNEA ABO PROVA DIRETA PROVA REVERSA GRUPO ANTI-A ANTI-B ANTI-AB A1 B RESULTADO 0 4+ 3+ 4+ 0 B CLASSIFICAÇÃO SANGUÍNEA ABO PROVA DIRETA PROVA REVERSA GRUPO ANTI-A ANTI-B ANTI-AB A1 B RESULTADO 4+ 4+ 4+ 0 0 AB CLASSIFICAÇÃO SANGUÍNEA ABO PROVA DIRETA PROVA REVERSA GRUPO ANTI-A ANTI-B ANTI-AB A1 B RESULTADO 0 0 0 4+ 4+ O SISTEMA ABO Material necessário Tubos 12 x 75 (de hemólise) e estante Soros anti A, anti B e anti AB Hemácias teste A e B (Rh negativo) Amostra a ser classificada SISTEMA ABO Prova direta ou globular Consiste em por em contato soros teste conhecidos, anti A, anti B e anti AB, com hemácias a testar, para se identificar a presença ou não dos antígenos A e B. SISTEMA ABO Técnicas 1. Rotular três tubos de hemólise: A, B, AB. 2. Nos tubos rotulados, colocar 1 gota dos soros anti-A, anti- B e anti AB, respectivamente. 3. A cada tubo acrescentar 1 gota de suspensão de hemácias a 5% a testar. 4. Agitar os tubos e centrifugar 5. Fazer a leitura da aglutinação, ressuspendendo delicadamente o botão de hemácias. 6. Anotar os resultados. SISTEMA ABO Técnicas - Prova Direta ou Globular SISTEMA ABO Técnicas - Prova Direta ou Globular SISTEMA ABO Prova Reversa ou Sérica Consiste em colocar em contato o soro a testar com hemácias teste A1 e B, permitindo reconhecer a presença ou não de anticorpos dirigidos contra estes antígenos. 33 SISTEMA ABO Técnica 1. Rotular dois tubos de hemólise A e B 2. Colocar duas gotas de soro a testar em cada tubo 3. Adicionar ao tubo A, 1 gota de hemácias A e no tubo B, 1 gota de hemácias B. 4.Agitar os tubos e centrifugar 5. Fazer a leitura da aglutinação, ressuspendendo delicadamente o botão de hemácias. 6. Anotar os resultados SISTEMA ABO Prova Reversa ou Sérica SISTEMA ABO Técnica - Prova Reversa ou Sérica SISTEMA ABO Outras Técnicas SISTEMA ABO Transfusão incompatível ABO: Reação transfusional grave: hemólise intra-vascular Pode levar à óbito 10-20 minutos após iniciada transfusão ~100 ml de sangue transfundido OBRIGADO!
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