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Jim Duffy – Spector Lab NucleotNucleotíídeos: fundeos: funçções essenciaisões essenciais •• Unidades monomUnidades monomééricas dos ricas dos áácidos nuclcidos nuclééicosicos • Carregadores de energia • ATP, GTP, etc • Cofatores e coenzimas • Coenzima A, FAD, NAD • Mensageiros químicos • AMP cíclico, GMP cíclico NucleotNucleotíídeos como monômeros dos deos como monômeros dos áácidos nuclcidos nuclééicosicos DNADNA e e RNARNA: estrutura X fun: estrutura X funçção ão NucleosNucleosíídeosdeos: carregadores de energia qu: carregadores de energia quíímicamica Nucleosídeos trifosfato: • energia química • precursores ativados para síntese de RNA e DNA NucleosNucleosíídeosdeos: composi: composiççãoão (CH3 x H) uracila 1’ 2’ 4’ 3’33’’ 5’55’’ Nucleosídeos do DNA (d) (d) adenosinaadenosina (d) guanosina (d) timidina (d) citidina PirimidinasPirimidinasPurinasPurinas 1 2 5 6 9 8 7 4 3 1 2 3 45 6 H x OH ((d)NTPsd)NTPs: : termodinâmicatermodinâmica favorfavoráávelvel àà ssííntesentese quebra da ligação ⇑ energia +PPi =Δ G negativo + quebra do PPi = Δ G mais negativo Pu P-O O Etc ... Pu ⇑⇑ SSííntesentese do do polpolíímeromero: : ligaligaççõesões fosfodifosfodiéésterster SSííntesentese do do polpolíímeromero Vista lateral – DNA: DNA polimerase SSííntesentese do do polpolíímeromero: : ligaligaççõesões fosfodifosfodiéésterster Na dNa déécada de Watson & Crickcada de Watson & Crick História: • Miescher (1868): DNA material genético (nucleína) • Avery, MacLeod e McCarty: transformação (1944) • Hershey e Chase: infecção de E.coli (1952) • As regras de Chargaff: • relação A-T/G-C • Franklin: Difração de Raio X Watson & Crick:Watson & Crick: a construa construçção do modeloão do modelo Watson & Crick:Watson & Crick: a construa construçção do modeloão do modelo • estrutura planar das bases • difração de Raio X: densidade e padrão em camadas • Regra de Chargaff • A=T e G=C • intuição: pontes de H ••interainteraççõesões hidrofhidrofóóbicasbicas Watson & Crick:Watson & Crick: a construa construçção do modeloão do modelo A=T e G=C • intuição: pontes de H ReplicaReplicaçção: ão: processo semiconservativoprocesso semiconservativo • Watson e Crick: modelo • Meselsohn e Stahl: experimento AKC Fitas parentaisFitas parentais PlasticidadePlasticidade dada dupladupla hhéélicelice CaracterCaracteríísticassticas do do polpolíímeromero • Esqueleto hidrofílico • Caráter ácido • Neutralização • poliaminas • proteínas • ions • Polaridade: 5’→ 3’ • Estrutura planar das bases 5’ 3’ 5’ 3’ a t g c EstabilidadeEstabilidade dada estruturaestrutura 22ááriaria e 3e 3ááriaria • Estrutura x desordem • íons, proteínas, pontes de H, Van der Walls • repulsão eletrostática • ⇑ Temperatura = desnaturadesnaturaççãoão do DNA (Tm)do DNA (Tm) • absorção de luz • viscosidade EstabilidadeEstabilidade dada estruturaestrutura 22ááriaria e 3e 3ááriaria • ⇑ Temperatura = desnaturação • ⇑⇓ propriedades: • viscosidade • absorção de luz • Estrutura planar • ressonância • absorção de luz UV (260nm) • efeito hipocrômico • Estrutura planar • ressonância • absorção de luz UV (260nm) • efeito hipocrômico TmTm éé caractercaracteríísticastica de de cadacada DNADNA • Como função de: • Razão GC x AT • pH • força iônica • tamanho da molécula • Processo reversível • análise Co T • hibridação Processo reversível: hibridação EstruturaEstrutura do RNA: um do RNA: um mundomundo de de diferendiferenççasas & & extremaextrema plasticidadeplasticidade EstruturaEstrutura do RNAdo RNA • Pareamento não W/C & • bases não usuais EstruturaEstrutura do RNA: do RNA: extremaextrema plasticidadeplasticidade • Fita simples • dupla fita regional, seqüência dependente • empilhamento • Liberdade de rotação • Pareamento não W/C • Estrutura secundária variável ⇒ funções múltiplas EstruturaEstrutura do RNA:do RNA: extremaextrema plasticidadeplasticidade RNA:RNA: exextrematrema plasticidadeplasticidade . . . funcional. . . funcional • RNA: funções múltiplas • rRNA, • mRNA, • tRNA, • RNAs de funções especiais • ribozimas, • estruturais, • regulatórios (RNAs de interferência, pequenos RNAs) Slide Number 1 Slide Number 2 Nucleotídeos: funções essenciais Nucleotídeos como monômeros dos ácidos nucléicos Nucleosídeos: carregadores de energia química Nucleosídeos: composição (d)NTPs: termodinâmica favorável à síntese Slide Number 8 Slide Number 9 Slide Number 10 Na década de Watson & Crick Watson & Crick:� a construção do modelo Watson & Crick:� a construção do modelo Watson & Crick:� a construção do modelo Replicação: �processo semiconservativo Plasticidade da dupla hélice Características do polímero Estabilidade da estrutura 2ária e 3ária Estabilidade da� estrutura 2ária e 3ária Tm é característica de cada DNA Processo reversível: hibridação Estrutura do RNA: um mundo de �diferenças & extrema plasticidade Estrutura do RNA Estrutura do RNA: extrema plasticidade Estrutura do RNA: extrema plasticidade RNA: extrema plasticidade . . . funcional
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