AULA PRÁTICA TTPA

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AULA PRÁTICA – HEMOSTASIA
TEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ATIVA (TTPa)
Amostra: 
Plasma Pobre em Plaquetas (PPP)
Obter o sangue cuidadosamente em um tubo contendo citrato de sódio 3,2% na proporção de 1:9 (por exemplo: 4,5 mL de sangue + 0,5 mL de citrato de sódio). Homogeneizar delicadamente.
Centrifugar 2.000 por 15 minutos.
Utilizando uma pipeta plástica coletar o sobrenadante contendo PPP e transferir para um novo tubo plástico e tampar.
Procedimento experimental:
Separar três tubos e identifica-los como 1 (reagente), 2 (plasma) e 3 (cálcio).
No identificado como tubo 3, adicionar 1.000 µl do cloreto de cálcio e pré – aquecer a 37°C por 5 minuto.
No tubo 2, adicionar 100 µl do plasma e pré – aquecer a 37°C por 1 minuto.
No tubo 1, adicionar 100 µl do reagente e pré – aquecer a 37°C por 1 minuto.
Adicionar ao plasma pré-aquecido (tubo 2), 100 µl do reagente (tubo 1) e pré-incubar a 37°C durante 3 minutos.
Em seguida, adicionar 100 µl do cloreto de cálcio a 37°C e disparar o cronômetro. Agitar delicadamente para homogeneizar o conteúdo. 
Manter o tubo dentro do banho-maria a 37°C e próximo a fonte de luz.
Após 20 segundos retirar o tubo do banho, inclinar suavemente uma ou duas vezes por segundo e parar o cronômetro no momento da formação do coágulo.
Realizar o teste em duplicata, e calcular o tempo médio de coagulação.
Calcular a relação entre o tempo obtido com o plasma desconhecido e o plasma controle.
RELAÇÃO = TP paciente 
 TP normal
VALORES DE REFERÊNCIA: 35 A 45 SEGUNDOS RNI: 0,9 A 1,25