Relatório Microbiologia

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PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE MINAS GERAIS 
Curso: Biomedicina 
Disciplina: Microbiologia Clínica 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PRÁTICA III: CONTROLE DA POPULAÇÃO MICROBIANA- USO DE ÓLEOS 
ESSENCIAIS E ANTIBIOGRAMA. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
SUMÁRIO 
 
 
 
1. INTRODUÇÃO 
2. OBJETIVOS 
3. MATERIAL E MÉTODOS 
4. RESULTADOS E DISCUSSÃO 
5. CONCLUSÃO 
6. BIBLIOGRAFIA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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1​. INTRODUÇÃO 
 
O controle da população microbiana significa basicamente destruir, inibir ou 
remover microrganismos através de agentes físicos ou químicos, onde ocorre a 
inibição que é o bloqueio da multiplicação ou a morte onde ocorre a perda 
irreversível da capacidade de reprodução dos microrganismos. 
Os agentes que são antimicrobianos tem capacidade de interferir de maneiras 
variadas nos microrganismos, exigindo uma certa atenção no uso dos mesmos 
pois cada bactéria tem uma característica diferente fazendo com que cada 
antimicrobiano atinja a um resultado diferente. E objetivando controlar a população 
microbiana, os desinfetantes são opções eficientes para destruir os microrganismos 
que vivem nesses objetos. Pois eles conseguem destruir a parede celular do 
microrganismo ou por interferência em seu metabolismo Entretanto a desinfecção 
não consegue exterminar todos os microrganismos ; necessitando então de uma 
esterilização.​ ​E inibir o crescimento microbiano os óleos essenciais vem 
demonstrando eficiência no controle do crescimento de microrganismos , incluindo 
fungos , leveduras e bactérias. 
“Entre antimicrobianos naturais , os óleos 
essenciais vem sendo muito estudados . Esses 
possuem ações contra microrganismos esporulados 
e patógenos de alimentos. ” (BAKKALI et 
al.,2008;BURT, 2004) 
 
Dentre uma variedade de óleos essenciais , existe o óleo de orégano (​Origanum 
vulgare ) cujo a planta vem da família das ​Lamiaceae, popularmente utilizado como 
tempero alimentício . 
 
 
“Os componentes bioativos desses condimentos 
têm atividade antimicrobiana bem documentada, 
com atividade inibitória contra bactérias Gram 
positivas e Gram negativas...” (LIS-BALCHIN et al., 
1998; DELAQUIS et al., 2002; SAGDIÇ; ÖZCAN, 
2003, NAZER et al., 2005, SEYDIM; SARIKUS, 
2006). 
2 
https://docs.google.com/document/d/1nL-B5tfoIpN5Drvyoh5FulmGu_fXvwfKGoCV_RvgCXk/edit#heading=h.1fob9te
 
 
O óleo essencial de orégano possui propriedades anti-inflamatórias e 
anti-infecciosas , possui também ação larvicida e antioxidante , é um poderoso 
estimulante digestivo , em inflamações e dores articulares , problemas de acnes , 
abcessos e furúnculos entre outros . A planta possui origem turca e a extração do 
óleo é feita é através do vapor da erva . 
 
2. OBJETIVOS 
 
3. MATERIAIS E MÉTODOS 
 
MATERIAIS: 
 
● Luvas 
● Álcool 70 
● Bico de Bunsen 
● Caneta para retroprojetor 
● Fósforos 
● 2 placas de ágar Mueller Hinton 
● Swabs estéreis 
● Pinças 
● Alças descartáveis 
● Tubo contendo culturas de ​S. aureus e E. coli em caldo simples 
● Placa contendo colônias da microbiota humana do esgotamento realizado na 
prática 2 
● Discos de papel de filtro para o teste 
● Óleo essencial de orégano 
 
 
 
 
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MÉTODO: 
 
1) Após o início da aula, lavar as mãos e colocar as luvas descartáveis, fazer a 
higienização da bancada. 
2) Marcar no fundo da placa (Mueller Hinton) de meio sólido o local onde será 
colocado o disco contendo o óleo essencial de orégano, de forma a ficar no 
centro; 
3) Com os devidos cuidados técnicos acender o bico de Bunsen, embeber a 
zaragatoa nas culturas de ​S. aureus ​e ​E. coli​, eliminando o excesso de líquido 
por compressão nas paredes do tubo. 
4) Passar o swab por toda a placa de Mueller Hinton preenchendo-a 
uniformemente; 
5) Identificar as placas; 
6) Flambar a pinça e resfriá-la; 
7) Pegar um disco com a pinça e colocar no centro da placa próximo a chama do 
gás, comprimindo-o ligeiramente para que fique aderido à superfície do meio; 
8) Colocar uma gota de óleo essencial no disco; 
9) Fechar a placa e incubar a 37°C por 48 horas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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4. RESULTADOS E DISCUSSÃO 
 
QUADRO 1: Resultado do antibiograma realizado com óleos essenciais: 
GRUPO PLANTA S. aureus E. coli 
1A Eucalipto Resistente Resistente 
1B Melaleuca Resistente Sensível (2,2cm) 
2 Hortelã Pimenta Sensível (1cm) Resistente 
3 Gengibre Resistente Resistente 
4 Orégano Sensível (4,1cm) Sensível(4,7cm) 
5 Citronela Sensível (9mm) Sensível (7,5mm) 
6 Alecrim Sensível (0,4mm) Resistente 
 
Na tabela acima estão elucidados os resultados obtidos no experimento com óleos 
essenciais para a inibição do crescimento das bactérias S. aureus e E. coli 
Nos resultados obtidos, os ​S. aureus foram sensíveis a quatro tipos de óleos 
essenciais: hortelã pimenta, orégano, citronela e alecrim. Sendo que há uma maior 
sensibilidade ao orégano com halo de inibição de 4,1cm e uma menor sensibilidade 
ao alecrim com uma halo de 0,4mm. 
O orégano possui em sua composição compostos fenólicos como carvacrol e timol 
que podem ser considerados potenciais antimicrobianos. (LOVISON, 2017) 
O hortelã pimenta tem como componentes principais mentofurano, mentol, acetato 
de metila, mentona, 1,8 cineol, pulegona, α-limoneno, β-pineno, isomentol, α-pineo e 
mirceno( SILVA,2009). 
No óleo essencial de citronela os componentes principais são b-citronelal, geraniol 
e β-citronelol. (SCHERER,2009) 
No Alecrim as propriedades antimicrobianas podem estar relacionadas com a 
presença de borneol, pinenos, cineol e cânfora.(SOUSA,2008) 
5 
Nos resultados obtidos com E. coli observou-se sensibilidade a três tipos de de 
óleos essenciais: melaleuca, orégano e citronela, visto que a maior sensibilidade foi 
a citronela e a menor a melaleuca. 
A melaleuca tem como componentes majoritários responsáveis pela ação 
antimicrobiana o cineol e o terpinen 4 ol. (SILVA,2008). Apesar de no teste realizado 
não identificar a eficácia sobre ​S. Aureus, ​na literatura há casos que mostram a 
eficácia do óleo de malaleuca sobre este microrganismo.(PACKER; LUZ, 2007). 
 
Em relação aos óleos de citronela e orégano que demonstraram atividade 
inibitória contra os dois microrganismos testados, as substâncias presentes 
possuem interações com a parede celular bacteriana, inviabilizando a sustentação 
da vida do microrganismo, quer por comprometer a permeabilidade seletiva, quer 
por interagir com a camada fosfolipídica e assim causar o extravasamento de 
componentes celulares importantes. (MILLEZI et al, 2013) . 
 
O óleo de Eucalipto utilizado não apresentou atividade inibitória. No entanto, 
outros estudos observaram que em comparação com a Clorexidina- medicamento 
utilizado por sua função bactericida e bacteriostática- o óleo essencial de Eucalipto 
mostrou maior eficácia antimicrobiana em relação às bactérias Gram-positivas e 
efeito similar tratando-se de bactérias Gram-negativas.(MOTA; TURRINI; POVEDA, 
2015). 
 
As plantas que não foram capazes de inibir o crescimento bacteriano de 
maneira considerável também possuem em sua composição inúmeros princípios 
ativos que podem ter atividade antimicrobiano, no entanto podem não terem 
demonstrado eficácia devido às concentrações utilizadas.Além de que a 
composição em termos percentuais de óleos essenciais podem variar com a época 
de cultivo e nutrientes presentes no local de plantio.(LIMA et al, 2004). 
 
O óleo essencial de gengibre não mostrou efeitos inibitórios para nenhum dos 
micro-organismos testados, evidenciado pela ausência de halo. Outro composto que 
é muito utilizado em estudos similares é o extrato de Gengibre. No entanto os 
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extratos que possuem como solvente água, etanol e acetona não demonstraram 
eficácia antibacteriana. (DALGÊ, 2014). Como o resultado foi corroborado por 
outras fontes, levanta-se a hipótese de que o Gengibre não possua composto com 
atividade sobre ​S. Aureus​ e ​E. Coli​. 
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
DALGÊ, J.J. ​Estudo da capacidade antioxidante, antimicrobiana, 
anti-hemolítica do gengibre (Zingiber officinale). 2014. 72 f. Dissertação 
(Mestrado)- Ciências da Engenharia de Alimentos- Faculdade de Zootecnia e 
Engenharia de Alimentos, Pirassunga, 2014. Disponível 
em:<http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74132/tde-08092015-083147/pt-br
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LIMA, A.P.L. et al. ​Efeito Antimicrobiano do Alecrim (Rosmarinus officinalis) 
sobre Cepas de Staphylococcus aureus e Escherichia coli Isoladas de 
Pacientes de um Hospital Escola do Sul de Minas. ​Revista Ciências em Saúde, 
Itajubá, V. 4, n.2, p. 55-63, 2004. Disponível em:< 
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MILLEZI, A.F., et al. ​Caracterização e atividade antibacteriana de óleos 
essenciais de plantas condimentares e medicinais contra Staphylococcus 
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v.15, n.3, p.373-379, 2013. Disponível em: 
<http://www.scielo.br/pdf/rbpm/v15n3/10.pdf>. Acesso em: 27 ago. 18. 
 
 
MOTA, V.S.; TURRINI, R.N.T.; POVEDA,V.B. ​Atividade antimicrobiana do óleo 
de Eucalyptus globulus, xilitol e papaína: estudo piloto. Revista da Escola de 
Enfermagem da USP, São Paulo, V.49, n.2 ,p. 216-220, 2015. Disponível em:< 
http://www.scielo.br/pdf/reeusp/v49n2/pt_0080-6234-reeusp-49-02-0216.pdf>. 
Acesso em: 27 ago. 18. 
 
 
REIS, Lucia ; RABELLOII, Bruno; SANTOS, Lucio. AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE 
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Disponível em < http://www.scielo.br/pdf/reben/v64n5/a11v64n5.pdf> Acesso em 
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TRAJANO, Vinicius, SOUZA, Evandro et all. ​PROPRIEDADE ANTIBACTERIANA 
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http://dx.doi.org/10.21876/rcsfmit.v4i2.230
http://dx.doi.org/10.21876/rcsfmit.v4i2.230
SILVA, P. A. A.;MEJIA, D. P. M. A​tividade antimicrobiana do óleo essencial de 
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antissépticos​.Pós-graduação em Estética e Cosmetologia, Faculdade Ávila.2008. 
 
SCHERER, R. et al.Composição e atividades antioxidante e antimicrobiana dos 
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LOVISON, M. M. Ó​leo essencial de orégano nanoemulsionado: produção, 
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e aplicação em patê de frango​. Universidade de São Paulo. Faculdade de 
Zootecnia e Engenharia de Alimentos. 2017. Pirassununga. 
 
SILVA, M. T. N. ​Atividade antibacteriana de óleos essenciais de plantas frente a 
linhagens de ​Staphylococcus aureus e ​Escherichia coli isoladas de casos 
clínicos humanos.Rev. bras. plantas med. vol.11 no.3 Botucatu 2009 
 
 
 
SOUSA,T. M. P. Atividade antimicrobiana do alecrim (Rosmarinus officinalis L.)Centro 
Universitário Anhanguera - Unidade Leme.Trabalho apresentado no 15º Simpósio 
Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP 
 
SANTOS, C. H. S. 2017 el al.​Atividade antimicrobiana de óleos essenciais e 
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em:<http://www.ial.sp.gov.br/resources/insituto-adolfo-lutz/publicacoes/rial/rial76_co
mpleta/artigos-separados/1719.pdf>.Acesso em: 01 de Set. 2018 
 
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