Capítulos do Volume 1 - 14 Reagentes

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14 REAGENTES 
 
 
14.1 INDICADORES E SOLUÇÕES INDICADORAS 
 
(...) 
 
Amarelo de metanila SI 
Preparação – Dissolver 0,1 g em 100 mL de metanol. 
Mudança de cor – Em titulações desenvolvidas em meio não aquoso muda a coloração de amarela 
(meio básico) para carmim (meio ácido). 
Ensaio de sensibilidade – Dissolver 0,1 mL de amarelo de metanila SI em 50 mL de ácido acético 
glacial anidro. Esta solução deve apresentar coloração vermelho-rosada. Adicionar 0,05 mL de 
ácido perclórico 0,1 M. A coloração deve mudar para violeta. 
 
(...) 
 
Amido iodetado SI 
Preparação –Pesar 0,5g de amido, acrescentar 50 a 60 mL de água e dissolver com aquecimento. 
Dissolver 0,5 g de iodeto de potássio na solução e completar o volume para 100 mL com água. 
Proteger da luz. Usar dentro de 24 horas após a preparação. Impregnar papel de filtro com amido SI, 
recém-preparado, acrescido de 0,5 g de iodeto de potássio. 
 
(...) 
 
Azul de oracet B SI 
Preparação – Dissolver 0,5 g em ácido acético glacial anidro e completar o volume para 100 mL. 
Mudança de cor - Quando utilizado em titulações em meio não aquoso muda de coloração azul 
(meio básico) para púrpura (meio neutro) e para rosa (meio ácido). 
 
(...) 
 
Azul do nilo A SI 
Preparação – Dissolver 1 g em ácido acético glacial anidro para 100 mL. 
Faixa de pH – 9,0 – 13,0 
Mudança de cor - Confere coloração azul a soluções fracamente alcalinas e coloração vermelha a 
soluções fracamente alcalinas. 
Ensaio de sensibilidade - A mistura de 0,25 mL de azul do Nilo A SI em 50 mL de ácido acético 
glacial anidro apresenta cor azul. A coloração passa a azul-esverdeada pela adição de não mais que 
0,1 mL de ácido perclórico 0,1 M em ácido acético glacial. 
Ensaio de identificação – A solução a 0,0005% (p/v) em etanol a 50% (v/v) apresenta máximo de 
absorção (5.2.14) em 640 nm. 
 
(...) 
 
 
Cloreto de metilrosanilínio SI 
Preparação – Dissolver 0,5 g em 100 mL de ácido acético glacial anidro. 
Mudança de cor – Em titulações em meio não aquoso a coloração muda de violeta (meio básico) 
para azul-esverdeada (meio neutro) e para verde-amarelada (meio ácido). 
Ensaio de sensibilidade – A mistura de 0,1 mL de cloreto de metilrosanilínio SI com 50 mL de 
ácido acético glacial anidro mostra coloração púrpura azulada. A adição de 0,1 mL de ácido 
perclórico 0,1 M em ácido acético altera a coloração para verde. 
 
(...) 
 
1-Naftolbenzeína SI 
Preparação – Dissolver 0,2 g de 1–naftolbenzeína em 100 mL de ácido acético glacial. 
Mudança de cor – Quando utilizado em titulações não-aquosas, muda a coloração azul ou verde-
azulada (meio básico) para laranja (meio neutro) e para verde-escura (meio ácido). 
Ensaio de sensibilidade - Adicionar 0,25 mL de solução de 1–naftolbenzeína SI a 50 mL de ácido 
acético glacial anidro. São necessários não mais que 0,05 mL de ácido perclórico 0,1 M em ácido 
acético glacial para efetuar a mudança da coloração amarelo-marrom para verde. 
 
 
14.2 REAGENTES E SOLUÇÕES REAGENTES 
 
 
 
 
Amaranto – vide vermelho amaranto (CI 16185) 
CAS – [915-67-3] 
Fórmula e massa molecular – C20H11N2Na3O10S3 – 604,06 
Descrição – Pó fino, facilmente solúvel em água, praticamente insolúvel em etanol, acetona, éter 
etílico e clorofórmio. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
 
 
 
(...) 
 
Cloreto de sódio 
CAS – [7647-14-5] 
Fórmula e massa molecular – NaCI – 58,44 
Especificação – Contém, no mínimo, 99,0% (p/p) calculado sobre a substância dessecada. 
Descrição – Cristais incolores ou pó cristalino branco, inodoro, de sabor salino. 
Solubilidade – Facilmente solúvel em água e praticamente insolúvel em etanol anidroabsoluto. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
Informação adicional – Sal isento de aditivo. 
 
(...) 
 
o-Cresol 
CAS – [95-48-7] 
Sinonímia – 2-Metilfenol. 
Fórmula e massa molecular – C7H8O – 108,14. 
Descrição – Líquido ou sólido, incolor a amarelo-marrom, que se cora pela luz e na presença de 
oxigênio; de odor fenólico. Deliquescente. 
Características físicas – Temperatura de fusão: aproximadamente 30 °C. Temperatura de ebulição: 
aproximadamente 191 °C. Densidade: aproximadamente 1,03. Índice de refração (20 °C): 1,540 -
1,550. 
Miscibilidade – Miscível com etanol anidroabsoluto, ligeiramente solúvel em água e solúvel em 
soluções hidróxi-alcalinas. 
Conservação – Em recipientes herméticos. 
Armazenagem – Proteger da luz, umidade e oxigênio. 
Segurança – Irritante. Cáustico. Tóxico. 
Categoria – Desinfetante. 
 
(...) 
 
2,6-Dicloroindofenol sódico 
CAS – [620-45-1] 
Sinonímia – 2,6-Diclorofenolindofenol sódico. 
Fórmula e massa molecular – C12H6Cl2NNaO2 – 290,08. 
Descrição – Pó verde escuro. 
Solubilidade – Facilmente solúvel em água e em etanol anidroabsoluto. A solução aquosa apresenta 
coloração azul escura e quando acidificada se torna rosa. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
 
(...) 
 
Fluido intestinal simulado (sem enzima) pH 6,8 
Preparação – Misturar 250mL de solução de fosfato de potássio monobásico 0,2 M e 112 mL de 
solução de hidróxido de sódio 0,2 M e diluir para 1 000 mL com água. Ajustar o pH em 6,8 ± 0,1 
com hidróxido de sódio 0,2 M. 
 
 
 
 
Ftalato de dibutila 
CAS – [84-74-2] 
Fórmula e massa molecular – C16H22O4 – 278,3 
Sinonímia – Éster dibutílico do ácido ftálico, ftalato de din- butila e dibutil ftalato. 
Descrição – Líquido oleoso, límpido, incolor ou ligeiramente corado. 
Características físicas – Temperatura de ebulição: 340 °C. Densidade: 1,043 a 1,048. 
Miscibilidade – Muito pouco solúvel em água, muito solúvel em acetona, benzeno, etanol e éter 
etílico. 
 
(...) 
 
Ftalazina 
CAS – [253-52-1] 
Fórmula e massa molecular – C8H6N2 – 130,15 
Descrição – Cristais amarelo pálidos. 
Característica física – Faixa de fusão: entre 90 °C e 91 °C. 
Solubilidade – Facilmente solúvel em água e solúvel em etanol anidroabsoluto, em acetato de etila e 
em metanol. 
 
(...) 
 
n-Heptano 
CAS – [142-82-5] 
Fórmula e massa molecular – C7H16 – 100,20 
Especificação – Principal componente de heptano. 
Descrição – Líquido límpido e inflamável. 
Características físicas – Temperatura de ebulição: 98,4 °C. Densidade: 0,684. Índice de refração 
(20 °C): 1,3855. 
Miscibilidade – Praticamente insolúvel em água e miscível em etanol anidroabsoluto. 
 
(...) 
 
n–Hexano 
CAS – [110-54-3] 
Fórmula e massa molecular – C6H14 – 86,18 
Especificação – Principal componente de éter de petróleo e de hexano. 
Descrição – Líquido límpido, volátil, de odor semelhante ao do petróleo. 
Características físicas – Temperatura de ebulição: 69 °C. Densidade: 0,66. Índice de refração (20 
°C): 1,375. 
Miscibilidade – Praticamente insolúvel em água e miscível em etanol anidroabsoluto. 
Conservação – Em recipientes herméticos. 
Armazenagem – Proteger do calor. Manter distante de chama/centelha. 
Segurança – Inflamável. 
 
(...) 
 
 
Lecitina 
Especificação – Mistura de diglicerídeos, principalmente dos ácidos esteárico, palmítico e 
oléicooleico, ligados ao éster fosfórico da colina. Estrutura e composição variáveis de acordo com a 
fonte de obtenção. 
Descrição – Massa gordurosa amarelo amarronzado a marrom, de odor fraco característico. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
Rotulagem – Especificar origem. 
 
(...) 
 
 
Reagente de aluminon 
Solução A – Dissolver 250 g de acetato de amônio em 500 mL de água bidestiladapurificada. 
Adicionar 40 mL de ácido acético glacial, 0,5 g de aluminon dissolvido em 50 mL de água 
bidestiladapurificada, 1 g de ácido benzoico dissolvido em 150 mL de álcool isopropílico e 225 mL 
de álcool isopropílico. Completar o volume para 1 000 mL com água bidestiladapurificada. 
Solução B – Dissolver 5 g de gelatina em 125 mL de água bidestilada purificada quente e misturar 
com 250 mL de água purificada bidestilada fria. Filtrar e completar a 500 mL com água 
purificadabidestilada. 
Preparação – Misturar com agitação as Soluções A e B. A mistura deve estar completamente 
límpida quando fria. Armazenar em frasco de polietileno, protegida da luz. 
 
(...) 
 
Sacarose 
CAS – [57-50-1] 
Fórmulae massa molecular – C12H22O11 – 342,30 
Especificação – É obtida da Saccharum officinarum Linné (Família Gramineae), Beta vulgares 
Linné (Família Chenopodiaceae) e outras fontes. 
Descrição – Cristais brancos ou incolores; pó cristalino ou massa cristalina ou blocos brancos. 
Inodoro. Sabor adocicado. Estável ao ar. Finamente dividido é higroscópico e absorve até 1 % de 
umidade. Não contém aditivos. 
Característica física – Decomposição: entre 160 °C e 186 °C. 
Solubilidade – Muito solúvel em água, pouco solúvel em etanol e praticamente insolúvel em etanol 
anidroabsoluto. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
 
 
(...) 
 
Sudan IV 
CAS – [85-83-6] 
Fórmula e massa molecular – C24H20N4O – 380,44 
Descrição – Pó marrom ou marrom avermelhado. 
Características físicas – Faixa de fusão: 181 °C a 188 °C. Decompõe completamente a 260 °C. 
Solubilidade – Praticamente insolúvel em água. Pouco solúvel em acetona, e em etanol e benzeno. 
Solúvel em parafina e fenol 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
 
(...) 
 
Sulfanilamida 
CAS – [63-74-1] 
Sinonímia – 4-Aminobenzenossulfonamida. 
Fórmula e massa molecular – C6H8N2O2S – 172,20 
Descrição – Cristais ou pó fino branco ou branco-amarelados. 
Característica física – Temperatura de fusão: aproximadamente 165 °C. 
Solubilidade – Solúvel em glicerol e praticamente insolúvel em clorofórmio, e em éter etílico e 
benzeno. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
Categoria – Antibacteriano. 
 
(...) 
 
 
 
Vermelho amaranto (CI 16185) 
CAS – [915-67-3] 
Fórmula e massa molecular – C20H11N2Na3O10S3 – 604,06 
Descrição – Pó fino, facilmente solúvel em água, praticamente insolúvel em etanol, acetona, éter 
etílico e clorofórmio. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
 
 
 
14.3 SOLUÇÕES VOLUMÉTRICAS 
 
(...) 
 
 
 
Metóxido de lítio 0,1 M SV 
Preparação – Dissolver, cuidadosamente, em balão volumétrico de 1 000 mL, 0,694 g de lítio em 
150 mL de metanol anidro e completar o volume com tolueno. 
Padronização – Padronizar sempre antes do uso. A 10 mL de dimetilformamida adicionar 0,05 mL 
de azul de timol a 0,3% (p/v) em metanol e titular com metóxido de lítio 0,1 M SV até coloração 
azul. Imediatamente, adicionar 0,2 g de ácido benzóicobenzoico, agitar e titular com metóxido de 
lítio 0,1 M SV até coloração azul. Evitar a absorção de dióxido de carbono atmosférico. O volume 
de titulante gasto na segunda titulação representa a quantidade de metóxido de lítio requerido. Cada 
mL de metóxido de lítio 0,1 M SV equivale a 12,212 mg de C7H6O2. 
 
(...) 
 
 
Sulfato cérico 0,05 M SV 
Especificação – Contém 16,6133,22 g de sulfato cérico ou 20,2 g de sulfato de cério tetraidratado 
[Ce(SO4)2.4H2O] em 1 000 mL de água. 
Padronização – Pesar, exatamente, cerca de 0,2 g de oxalato de sódio, dessecado previamente, e 
dissolver em 75 mL de água. Adicionar, com agitação, 2 mL de ácido sulfúrico previamente 
misturado com 5 mL de água, homogeneizar. Adicionar 10 mL de ácido clorídrico, e aquecer até 
cerca de 75 °C. Titular com sulfato cérico 0,05 M até cor amarelo claro permanente. Cada 6,700 mg 
de oxalato de sódio é equivalente a 1 mL de sulfato cérico 0,05 M SV. 
 
(...) 
 
Tiossulfato de sódio 0,01 M SV 
Preparação – Dissolver exatamente 2,5 g de tiossulfato de sódio pentaidratado e 20 mg de 
carbonato de sódio em água, recentemente fervida e resfriada, transferir quantitativamente para 
balão volumétrico de 100 mL, completar o volume com a mesma água e homogeneizar. 
Padronização - Pesar exatamente 21 mg de dicromato de potássio, pulverizado e dessecado e 
dissolver em 10 ml de água. Transferir para balão volumétrico de 50 mL, adicionar 0,3 g de iodeto 
de potássio, 0,2 g de bicarbonato de sódio e 0,5 mL de ácido clorídrico SR. Tampar, agitar e deixar 
em repouso, por 10 minutos, no escuro. Titular o iodo liberado com a solução de tiossulfato de 
sódio até coloração verde-amarelada. Adicionar 3 mL de amido SI e continuar a titulação até 
desaparecimento da cor azul. 
 
 
14.4 TAMPÕES 
 
 
Certos ensaios farmacopeicos exigem o ajuste ou a manutenção de pH. Para tal, empregam-se 
soluções denominadas tampões, capazes de suportar variações na atividade de íons hidrogênio. Os 
componentes requeridos estão descritos no item Reagentes. Os de natureza cristalina devem ser 
previamente dessecados a 110 - 120 °C por uma hora; utilizar água isenta de dióxido de carbono. A 
armazenagem deve ser feita em recipientes herméticos e apropriados. Considerar a estabilidade no 
preparo das quantidades para consumo. A seguir, relacionam-se as soluções em ordem crescente de 
valores de pH. Outros tampões com características particulares são descritos nos textos dos 
respectivos ensaios. 
 
Tampão ácido clorídrico pH 2,0 
Preparação – Misturar 50 mL de solução aquosa de cloreto de potássio 0,2 M com 13 mL de 
solução aquosa de ácido clorídrico 0,2 M. Completar o volume para 200 mL com água e ajustar o 
pH se necessário. 
 
 
Tampão acetato pH 3,0 
Preparação – Dissolver 12 g de acetato de sódio em água, adicionar 6 mL de ácido acético glacial e 
diluir com água para fazer 100 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão acetato pH 3,5 
Preparação – Dissolver 25 g de acetato de amônio em 35 mL de água, adicionar 38 mL de ácido 
clorídrico 7 M, ajustar o pH para 3,5 com ácido clorídrico SR ou hidróxido de amônio 6 M e 
completar o volume para 100 mL com água. 
 
Tampão acetato pH 4,0 
Preparação – Transferir 900 mL de água para balão volumétrico de 1 000 mL, adicionar 2,86 mL 
de ácido acético glacial e 1 mL de hidróxido de sódio a 50% (p/v), completar o volume com água e 
homogeneizar. Se necessário, ajustar o pH em 4,0 com ácido acético glacial ou hidróxido de sódio a 
50% (p/v). 
 
Tampão acetato pH 4,4 
Preparação – Dissolver 136 g de acetato de sódio e 77 g de acetato de amônio em água e diluir a 
1000 mL. Adicionar 250 mL de ácido acético glacial e homogeneizar. 
 
Tampão ácido clorídrico pH 2,0 
Preparação – Misturar 50 mL de solução aquosa de cloreto de potássio 0,2 M com 13 mL de 
solução aquosa de ácido clorídrico 0,2 M. Completar o volume para 200 mL com água e ajustar o 
pH se necessário. 
Tampão biftalato pH 4,4 
Preparação – Dissolver 2,042 g de biftalato de potássio em 50 mL de água, adicionar 7,5 mL de 
hidróxido de hidrogênio sódio 0,2 M e diluir para 200 mL em água. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão acetato 0,05 M pH 4,5 
Preparação – Transferir 2,99 g de acetato de sódio tri-hidratado e 1,66 mL de ácido acético glacial 
para balão volumétrico de 1 000 mL. Dissolver em água e completar o volume com o mesmo 
solvente. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão acetato de sódio pH 4,5 
Preparação – Diluir 2,8 mL de ácido acético glacial com água para 1 000 mL. Ajustar o pH em 4,5 
± 0,05 com hidróxido de sódio a 50% (p/v). 
 
Tampão acetato de sódio 0,1 M pH 5,0 
Preparação – Transferir 13,61 g de acetato de sódio tri-hidratado para balão volumétrico de 1 000 
mL, dissolver em quantidade suficiente de água e completar o volume com o mesmo solvente. 
Homogeneizar. Ajustar o pH em 5,0 com ácido acético 0,1 M. 
 
Tampão ácido clorídrico pH 2,0 
Preparação – Misturar 50 mL de solução aquosa de cloreto de potássio 0,2 M com 13 mL de 
solução aquosa de ácido clorídrico 0,2 M. Completar o volume para 200 mL com água e ajustar o 
pH se necessário. 
 
Tampão biftalato pH 4,4 
Preparação – Dissolver 2,042 g de biftalato de potássio em 50 mL de água, adicionar 7,5 mL de 
hidróxido de sódio hidrogênio 0,2 M e diluir para 200 mL em água. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão citrato-fosfato pH 5,0 
Solução A – Dissolver 0,8 g de fosfato de sódio dibásico hepta-hidratado em 500 mL de água. 
Solução B – Dissolver 3,5 g de ácido cítrico monoidratado em 500 mL de água. 
Preparação – Misturar, com agitação, as Soluções A e B até ajustar o pH para 5,0. Distribuir em 
recipientes com 50 mL cada. Autoclavar a 121 °C, pressão de 1 atm, por 20 minutos. Estocar a 4 
°C. 
 
Tampão fosfato pH 2,2 
Preparação – Dissolver 1,38 g de fosfato de sódio monobásico em 800mL de água. Ajustar o pH 
com ácido fosfórico e diluir para 1 000 mL com água. 
 
Tampão fosfato pH 5,5 
Solução A – Dissolver 13,61 g de fosfato de potássio monobásico em água e completar para 1 000 
mL com o mesmo solvente. 
Solução B – Dissolver 35,81 g de fosfato de sódio dibásico dodeca-hidratado em água e completar 
para 1 000 mL com o mesmo solvente. 
Preparação – Misturar 96,4 mL da Solução A e 3,6 mL da Solução B. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato pH 5,8 
Preparação – Em balão volumétrico de 200 mL, adicionar 3,6 mL de hidróxido de sódio 0,2 M a 50 
mL de fosfato de potássio monobásico 0,2 M e completar o volume com água. Ajustar o pH se 
necessário. 
 
Tampão fosfato pH 6,0 
Preparação – Misturar 50 mL de fosfato de potássio monobásico 0,2 M e 5,7 mL de hidróxido de 
sódio 0,2 M. Completar o volume a 200 mL com água. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão acetato pH 6,0 
Preparação – Dissolver 100 g de acetato de amônia em 300 mL de água, adicionar 4,1 mL de ácido 
acético glacial, se necessário ajustar o pH, utilizando hidróxido de amônio 10 M ou ácido acético 
glacial 5 M e completar a 500 mL com água. 
 
Tampão citro-fosfato pH 6,0 
Nome alternativo – Tampão fosfato de sódio pH 6,0 
Preparação – Misturar 36,8 mL de ácido cítrico a 2,1% (p/v) com 63,2 mL de fosfato de sódio 
dibásico a 7,15% (p/v). Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato pH 6,5 
Preparação – Dissolver 2,75 g de fosfato de sódio dibásico di-hidratado e 4,5 g de cloreto de sódio 
em 500 mL de água. Ajustar o pH em 6,5 com tampão fosfato pH 8,5. 
 
Tampão fosfato pH 6,8 
Preparação – Dissolver 28,8 g de fosfato de sódio dibásico e 11,45 g de fosfato de potássio 
tribásico em água e completar o volume a 1 000 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
 
 
Tampão fosfato-laurilsulfato de sódio pH 6,8 
Preparação – Misturar 19 partes de ácido clorídrico 0,1 M com 17 partes de tampão fosfato-
laurilsulfato de sódio pH 11,0. Se necessário, ajustar o pH para 6,8 com ácido fosfórico a 20% (v/v) 
ou hidróxido de sódio a 40% (p/v). 
 
Tampão de tris-cloridrato M de pH 6,8 
Preparação – Dissolver 60,6 g de trometamina em 400 mL água. Ajustar o pH para 6,8 com ácido 
clorídrico e completar para 500 mL com água. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato 0,025 M pH 6,86 
Preparação – Dissolver 3,53 g de fosfato de sódio dibásico e 3,39 g de fosfato de potássio 
monobásico em água a completar o volume a 1 000 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão acetato pH 7,0 
Preparação – Dissolver 2,73 g de acetato de sódio em aproximadamente 70 mL de água. Ajustar o 
pH a 7,0 com ácido acético 0,5 M. Completar com água a 100 mL. Ajustar o pH se necessário. 
Conservação – Em recipientes bem fechados. 
 
Tampão citro-fosfato pH 7,0 
Nome alternativo – Tampão fosfato de sódio pH 7,0 
Preparação – Misturar 82,4 mL de fosfato de sódio dibásico dodecaidratado a 7,15% (p/v) com 
17,6 mL de ácido cítrico a 2,1% (p/v). Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato pH 7,0 
Solução A – Hidróxido de sódio M 
Solução B – Dissolver 13,6 g de fosfato de potássio monobásico em água e completar o volume 
para 100 mL com o mesmo solvente. 
Preparação – Misturar 29,5 mL da Solução A e 50 mL da Solução B. Ajustar o pH em 7,0 ± 0,1 
utilizando as Soluções A e B e completar o volume para 100 mL com água. 
 
Tampão fosfato M/l5 pH 7,0 
Preparação – Dissolver 0,908 g de fosfato de potássio monobásico em água e diluir a 100 mL. 
Separadamente, dissolver 2,38 g de fosfato de sódio dibásico em água e diluir a 100 mL. Misturar 
38,9 mL da solução de fosfato de potássio monobásico com 61,1 mL de solução de fosfato de sódio 
dibásico. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato pH 7,1 
Preparação – Transferir 1 g de fosfato de potássio monobásico e 1,8 g de fosfato de sódio dibásico 
anidro para balão volumétrico de 1 000 mL, adicionar 900 mL em água e ajustar o pH para 7,1 ± 
0,1 com ácido fosfórico ou hidróxido de sódio 10 M. Completar o volume com o mesmo solvente. 
 
Tampão fosfato pH 7,2 
Preparação – Juntar 250 mL de fosfato de potássio monobásico 0,2 M e 175 mL de hidróxido de 
sódio 0,2 M. Completar o volume a 1 000 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão albumina-fosfato pH 7,2 
Preparação – Dissolver 4,26 g de fosfato de sódio dibásico anidro, 7,6 g de cloreto de sódio e 10 g 
de albumina bovina em água. Completar o volume a 1 000 mL e antes de usar ajustar o pH com 
hidróxido de sódio 2 M ou com ácido fosfórico. 
 
Tampão fosfato pH 7,3 
Preparação – Dissolver 20,8 g de fosfato de sódio dibásico hepta-hidratado e 3,08 g de fosfato de 
sódio monobásico monoidratado em 900 mL de água, ajustar o pH em 7,3 ± 0,1 com ácido fosfórico 
SR ou hidróxido de sódio SR e diluir para 1 000 mL com o mesmo solvente. 
 
Tampão barbital de pH 7,4 
Preparação – Misturar 50 mL de uma solução contendo 1,94% (p/v) de acetato de sódio e 2,95% 
(p/v) de barbital sódico em água com 50,5 mL de ácido clorídrico 0,1 M. Juntar 20 mL de solução a 
8,5% (p/v) de cloreto de sódio e completar a 250 mL com água. 
 
Tampão fosfato de potássio pH 7,4 com polissorbato 80 a 2% (v/v) 
Preparação – Dissolver 27,22 g de fosfato de potássio monobásico em 1 000 mL de água. 
Transferir 250 mL da solução anterior para balão volumétrico de 1 000 mL, adicionar 195,5 mL de 
hidróxido de sódio 0,2 M e 450 mL de água. Ajustar o pH para 7,4 com ácido fosfórico ou 
hidróxido de sódio e completar o volume com água. O polissorbato 80 deve ser adicionado depois, 
devido a difícil solubilidade do mesmo. 
 
Tampão imidazol pH 7,4 
Preparação – Dissolver 3,4 g de imidazol e 5,84 g de cloreto de sódio em água. Adicionar 18,6 mL 
de ácido clorídrico M e completar com água a 1 000 mL. Se necessário, ajustar o pH para 7,4 ± 0,1. 
 
Tampão de trometamina-cloreto de sódio de pH 7,4. 
Preparação – Dissolver 6,08 g de trometamina e 8,77 g de cloreto de sódio em 500 mL de água 
destilada. Junte 10 g de albumina bovina. Ajustar o pH com ácido clorídrico e complete 1 000 mL 
com água destilada. 
 
Tampão tris-cloreto de sódio pH 7,5 
Preparação - Dissolver 7,27 g de trometamina e 5,27 g de cloreto de sódio em 950 mL de água. 
Ajustar o pH em 7,5 com ácido clorídrico 2 M e completar com água a 1 000 mL. 
 
Tampão borato pH 8,0 
Preparação – Misturar 0,619 g de ácido bórico e 0,746 g cloreto de potássio em 50 mL de água. 
Adicionar 3,97 mL de hidróxido de sódio 0,2 M e diluir para 200 mL de água. Ajustar o pH se 
necessário. 
 
Tampão de barbital de pH 8,4 
Preparação – Dissolver 8,25 g de barbital sódico em água e completar a 1 000 mL com o mesmo 
solvente. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão de trometamina-EDTA de pH 8,4. 
Preparação – Dissolver 5,12 g de cloreto de sódio, 3,03 g de trometamina e 1,40 g de iodeto de 
sódio em 250 mL água destilada. Ajuste o pH com ácido clorídrico e complete 500 mL com água 
destilada. 
 
Tampão de tris-EDTA ASB de pH 8,4 
Preparação – Dissolver 6,1 g de trometamina, 2,8 g de iodeto de sódio, 10,2 g de cloreto de sódio e 
10 g de albumina bovina em água, ajustar o pH com ácido clorídrico M e completar para 1 000 mL 
com água. 
 
Tampão acetato de amônio pH 8,5 
Preparação – Dissolver 50 g de acetato de amônio em 1 000 mL de etanol a 20% (v/v). Ajustar o 
pH em 8,5 com hidróxido de amônio 6 M. 
 
Tampão fosfato pH 8,5 
Preparação – Dissolver 3,5 g de fosfato de potássio dibásico anidro e 4,5 g de cloreto de sódio em 
500 mL de água. Ajustar o pH em 8,5 com uma mistura de água e ácido fosfórico (1:1). 
 
Tampão barbital pH 8,6 
Preparação – Misturar 129 mL de ácido clorídrico 0,1 M adicionar volume suficiente de barbital 
sódico 0,1 M para completar 1 000 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato pH 8,6 
Preparação – Misturar 2,3 volumes de hidróxido de sódio 0,2 M, com 2,5 volumes de fosfato de 
potássio monobásico 0,2 M e 2 volumes de metanol. Resfriar e misturar com água para obter 10 
volumes de solução. Ajustar, se necessário, o pH para 8,60 ± 0,05 com hidróxido de sódio. 
 
Tampão de tris-cloridrato 1,5 M pH 8,8 
Preparação – Dissolver 90,8 g de trometaminaem 400 mL de água. Ajustar o pH para 8,8 com 
ácido clorídrico e diluir para 500 mL com água. 
 
Tampão borato pH 9,0 
Preparação – Dissolver 12,37 g de ácido bórico e 14,91 g de cloreto de potássio em água e 
completar o volume para 1 000 mL com o mesmo solvente. Transferir 50 mL da solução obtida para 
balão volumétrico de 200 mL, adicionar 20 mL de hidróxido de sódio 0,2 M e 120 mL de água. 
Ajustar o pH em 9,0 com hidróxido de sódio SR ou ácido clorídrico SR e completar o volume com 
água. 
 
Tampão tris 0,05 M pH 9,0 
Preparação – Transferir 6,05 g de trometamina para balão volumétrico de 1 000 mL. Dissolver em 
água e completar o volume com o mesmo solvente. Ajustar o pH em 9,0 ± 0,05 utilizando ácido 
fosfórico. Dissolver 10 g de laurilsulfato de sódio em cerca de 600 mL do tampão. Misturar a 
solução obtida com o restante do tampão. 
 
Tampão borato pH 9,6 
Preparação – Transferir 3,093 g de ácido bórico e 3,728 g de cloreto de potássio para balão 
volumétrico de 1 000 mL, adicionar 250 mL de água e agitar até dissolução. Acrescentar 182 mL de 
hidróxido de sódio 0,2 M e completar o volume com água. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão carbonato-bicarbonato de sódio pH 9,6 
Preparação – Dissolver 0,75 g de carbonato de sódio e 1,5 g de bicarbonato de sódio em 500 mL de 
água. Distribuir em recipientes com 50 mL cada. Autoclavar a 121 °C, pressão de 1 atm, por 20 
minutos. Estocar a 4 °C. 
 
Tampão cloreto de amônio pH 10,0 
Preparação – Dissolver 5,4 g de cloreto de amônio em 70 mL de hidróxido de amônio 5 M e diluir 
com água a 100 mL. 
 
Tampão cloreto de amônio pH 10,7 
Preparação – Dissolver 67,5 g de cloreto de amônio em água, adicionar 570 mL de solução 
concentrada de amônia e diluir para 1 000 mL com água. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão fosfato-laurilsulfato de sódio pH 11,0 
Preparação – Dissolver em água 16,35 g de fosfato de sódio monobásico, 7,05 g de hidróxido de 
sódio e 3 g de laurilsulfato de sódio e diluir com água para 1 000 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão ácido acético-acetato de amônio 
Preparação – Dissolver 77,1 g de acetato de amônio em água, adicionar 57,0 mL de ácido acético 
glacial e completar com água a 1 000 mL. Ajustar o pH se necessário. 
 
Tampão de eletroforese DSS-EGPA 
Preparação – Dissolver 151,4 g de trometamina, 721 g de glicina e 50 g laurilsulfato de sódio em 
água e completar 5 000 mL com o mesmo solvente. Diluir a 1:10 com água, imediatamente antes do 
uso. O pH da solução diluída deve estar compreendido entre 8,1 e 8,8. 
 
Tampão concentrado para amostras DSS-EGPA. 
Preparação – Dissolver 1,89 g de trometamina, 5 g de laurilsulfato de sódio e 50 mg de azul de 
bromofenol em água; juntar 25 mL de glicerina e completar para 100 mL com água. Ajustar o pH 
para 6,8 com ácido clorídrico e completar para 125 mL com água. 
 
Tampão concentrado para amostras DSS-EGPA em condições redutoras 
Preparação – Dissolver 3,78 g de trometamina, 10 g de laurilsulfato de sódio, 100 mg de azul de 
bromofenol e 50 mL de glicerina em 200 mL de água. Juntar 25 mL de 2-mercaptoetanol. Ajustar o 
pH para 6,8 com ácido clorídrico e completar para 250 mL com água. Em vez do 2-mercaptoetanol, 
pode ser usado o ditiotreitol como agente redutor. Nesse caso, proceda como se indica: dissolva 
3,78 g de trometamina, 10 g de laurilsulfato de sódio, 100 mg de azul de bromofenol e 50 mL de 
glicerina em 200 mL de água. Ajustar o pH para 6,8 com ácido clorídrico e completar para 250 mL 
com água. Imediatamente antes do emprego, adicionar o ditiotreitol, de modo a obter uma 
concentração final de 0,1 M. 
 
Tampão fosfato-salina (PBS) 
Preparação – Dissolver, com agitação, 24 g de cloreto de sódio, 0,6 g de cloreto de potássio, 4,3 g 
de fosfato de sódio dibásico dodeca-hidratado e 0,6 g de fosfato de potássio monobásico em 4 L de 
água. Autoclavar a 121 °C, pressão de 1 atm, por 20 minutos. Estocar a 4 °C. 
 
Tampão sulfato cúprico 
Solução A – Dissolver 15,22 g de fosfato de sódio dibásico anidro em quantidade suficiente de 
água. Adicionar 9,75 g de ácido cítrico monoidratado e diluir para 1 000 mL com água. Ajustar o 
pH em 5,2 com auxílio de hidróxido de sódio ou ácido cítrico. 
Solução B – Dissolver 0,313 g de sulfato cúprico penta-hidratado em água e diluir para 100 mL com 
o mesmo solvente. 
Preparação – No momento do uso misturar 15 mL da Solução B com 985 mL da Solução A.