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Protocolo de Exames Parasitológicos Nome do exame parasitológico Método de Hoffman, Pons e Janer, também conhecido como método de Lutz. Materiais e Equipamentos utilizados · Palito de Madeira · Frasco de Borrel ou copo plástico descartável · Água destilada ou filtrada · Filtro de papel ou gaze · Cálice cônico ~ 250ml · Pipeta Pasteur · Lâmina e Lamínula · Lugol · Microscópio Fundamento do método . No ano de 1934 Hoffman, Pons e Janer aprimoraram uma técnica criada por Lutz em 1919. O método baseia-se na sedimentação espontânea, sendo uma técnica qualitativa e de baixa sensibilidade, descrita primordialmente para o diagnóstico de ovos de Schistosoma mansoni, sendo após expandida para o diagnóstico de diversas parasitoses. A sedimentação espontânea é o método parasitológico mais utilizado nos laboratórios de análises clínicas devido a sua amplo abrangência, melhor observação dos parasitos em diferentes estágios, facilitando a identificação das espécies, baixo custo e facilidade para execução. O método possui como fundamento a lei gravitacional, isto é, quando uma porção da amostra é homogeneizada em água destilada até que a dissolução seja obtida e separe sedimentos. O conteúdo filtrado é transferido para um cálice cônico completando o volume do recipiente, com água até cerca de 1 cm da borda e mantendo em repouso por uma hora a 24 horas até que se obtenha o sedimento. Os ovos, larvas, cistos ou oocistos, por serem mais densos, vão acumular-se no fundo do recipiente Método: 1. Colocar 2g de fezes em um borrel ou copo descartável, com 5 mL de água e triturar com bastão de vidro ou palito de picolé. 2. Acrescentar 20 mL de água. 3. Filtrar a suspensão para um cálice cônico através de uma tela ou gaze, os detritos retidos são lavados, agitando-se constantemente com o bastão, e o líquido da lavagem é recolhido. 4. Deixar em repouso de 2 a 24 horas. 5. Observar o aspecto do líquido sobrenadante: a) se o líquido estiver turvo: descartá-lo cuidadosamente, colocar mais água até o volume anterior e deixar em repouso por mais 60 minutos; b) se o líquido estiver límpido: coletar uma amostra do sedimento. 6. Coleta do sedimento para exame: a) Pipetagem do líquido. b) Desprezar o sobrenadante, homogeneizar o sedimento e coletar uma gota. 7. Colocar a gota do sedimento em uma lâmina e fazer um esfregaço. 8. Examinar com as objetivas de 10x ou 40x. OBS: Para a identificação de cistos de protozoários e larvas de helmintos, corar a preparação com lugol. Indicação do método Possui como principal indicação a pesquisa de formas evolutivas de parasitos pesados como ovos de média a grande densidade, embora tenha boa sensibilidade para diagnóstico de formas evolutivas de helmintos e protozoários. É eficaz para o diagnóstico de Schistosoma mansoni, de cistos de amebídeos, cistos de Giardia duodenalis, larvas de Strongyloides stercoralis e ovos de Ascaris lumbricoides e Trichuris trichiura. Estruturas observadas As formas parasitárias que podem ser encontradas incluem ovos e larvas de helmintos, cistos de protozoários, e alguns oocistos maiores como o de Isospora belli. As tabelas abaixo mostram, de forma simplificada, a indicação e a forma dos parasitos que podem ser visualizados com a aplicação do método de Hoffman. PRINCIPAIS HELMINTOS Classe Trematoda Cestoda Nematoda Gênero Schistosoma Fasciola Hymenolepis Ascaris, Ancylostoma, Necator e Trichuris Espécie S. mansoni F. hepatica H. nana e H. diminuta Ascaris lumbricoides, Ancylostoma duodenale e Ancylostoma ceylanicum, N. americanus, T. trichiura Forma Ovo Ovo Ovo Ovo PRINCIPAL PROTOZOÁRIO Classe Sporozoa Gênero Isospora Espécie Isospora belli Forma Oocisto Referências Bibliográficas FERREIRA, Ana Flávia V.; BARBOSA, Chayenne Luiza; ARAÚJO, Marina Rodrigues A.; HOFMANN, Natássia Alfenas A.; RANCANTI, Victória Paes C. Atlas de Parasitologia; Faculdade de Ciências Médicas de Minas Gerais. 2012. Disponível em:<https://sites.google.com/site/atlasdeparasitologiafcmmg/metodos-diagnosticos/mtodo-de-hoffman-pons-e-janer-hpj>. Acesso em: 14 de set. de 2020. LIMA, Felicson Leonardo Oliveira. Um século do exame parasitológico de Lutz e sua relevância atual. RBAC, v. 52, n. 1, p. 32-4, 2020. NAKASHIMA, Flávia Terumi; UCHÔA, Claudia. Atlas Virtual de parasitologia: Técnica de Lutz. Página única. NEVES, David Pereira; DE MELO, Alan Lane; LINARDI, Pedro Marcos; VITOR, Ricardo W. Almeida. Parasitologia Humana, 13ª edição; Atheneu. 2016. 541-554p.
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