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05/02/2021 1 Metabolismo e genética das bactérias Metabolismo bacteriano Metabolismo: é a soma de todas as reações químicas dentro de um organismo vivo. Catabolismo Anabolismo A quebra de compostos orgânicos complexos em compostos mais simples. Hidrolítica e exergônica A construção de moléculas orgânicas complexas a partir de moléculas mais simples. Desidratação e endergônicas. 1 2 05/02/2021 2 Metabolismo bacteriano Fontes de energia e fontes de carbono Fonte de energia: Quimiotróficos e fototróficos, Fonte de carbono: Autotróficos e heterotróficos, 3 4 05/02/2021 3 Metabolismo bacteriano Via de Embden-Meyerhoff 1) Glicólise 5 6 05/02/2021 4 1) Glicólise Rearranjo e desidratação do Fosfoglicerato Respiração celular Respiração aeróbica 7 8 05/02/2021 5 Respiração celular 9 10 05/02/2021 6 Respiração celular Cadeia de transporte de elétrons Respiração celular Requerimento da produção de ATP. 11 12 05/02/2021 7 Metabolismo bacteriano • Bactérias aeróbias: Aceptor final de elétrons: O2. Fazem todas as etapas da respiração: glicólise, ciclo do ácido cítrico e cadeia fosforilativa – 1 molécula de glicose = 38 ATPs, • Bactérias anaeróbias: produção de ATP varia de acordo com o microorganismo e a via utilizada – produção de menos ATP, Respiração anaeróbia ou Fermentação Fermentação láctica Fermentação alcoólica Respiração celular Metabolismo bacteriano 13 14 05/02/2021 8 1. Libera energia a partir de açúcares ou outras moléculas orgânicas, como aminoácidos, ácidos orgânicos, purinas e pirimidinas. 2. Não requer oxigênio, 3. Não requer a utilização do ciclo de Krebs ou da cadeia de transporte de elétrons, 4. Utiliza uma molécula orgânica como aceptor final de elétrons, 5. Produz somente uma pequena quantidade de ATP (somente uma ou duas moléculas de ATP para cada molécula de matéria inicial), porque grande parte da energia original na glicose permanece nas ligações químicas dos produtos orgânicos finais, como o ácido láctico ou o etanol. Fermentação Fermentação 15 16 05/02/2021 9 Fermentação Streptococcus Lactobacillus Levedura Saccharomyces Fermentação 17 18 05/02/2021 10 Genética bacteriana Ciência da hereditariedade: estudo de genes, como transportam informações, como são replicados e passados para gerações seguintes e como são expressos. GENOMA: informação genética ▪ Cromossomos: estruturas contendo DNA ▪ Genes são segmentos de DNA que codificam produtos funcionais Genótipo e Fenótipo Genética bacteriana Composição genética: Genótipo Propriedades expressas e reais: Fenótipo A maioria das propriedades da célula deriva das estruturas e funções de suas proteínas. DNA e cromossomos Único cromossomo circular com proteínas associadas E. coli: 4,6 milhões de pares de bases – 1mm de comprimento – 10% superenovelado Sequenciamento e caracterização de genomas: genômica 19 20 05/02/2021 11 Genética bacteriana Replicação do DNA Topoisomerase Helicase DNA polimerase 21 22 05/02/2021 12 23 24 05/02/2021 13 RNA e síntese proteíca DNA Transcrição Tradução RNA mensageiro, RNA ribossômico, RNA de transferência. Bases nitrogenadas: C-G A-U mRNA TRADUÇÃO mRNA = códons Códons de iniciação Códons de terminação 25 26 05/02/2021 14 TRADUÇÃO TRADUÇÃO Transcrição e tradução simultânea Nas células procarióticas, a tradução do mRNA em proteína pode começar antes mesmo de a transcrição estar completa; O mRNA é produzido no citoplasma, os códons de iniciação estão disponíveis aos ribossomos antes mesmo que a molécula integral de mRNA seja feita. 27 28 05/02/2021 15 • Genes constitutivos: seus produtos são constantemente produzidos em uma velocidade fixa (ex: enzimas para glicólise) → Os genes responsáveis pela produção de moléculas (enzimas) de “manutenção” são expressos continuamente e são, por isso, chamados genes constitutivos (não são regulados). • Genes estruturais/induzidos: seus produtos são produzidos em situações de necessidade (ex: expressão de glicoproteína no T. cruzi para evasão na resposta imune). REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA • Expressão gênica constitutiva e regulada 1) Expressão gênica constitutiva genes que codificam produtos que são exigidos a todo momento 2) Expressão gênica regulada genes que codificam produtos em resposta a sinais moleculares - indução - repressão 29 30 05/02/2021 16 REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA Repressão e Indução Proteínas repressoras Proteínas indutoras Resposta a abundância de um produto final. Ex: lactose em E. coli Modelo Operon Catabolismo da lactose em E.coli - Β – galactosidase, - Lac permease (transporte para o interior das células), - Transacetilase (metaboliza outros dissacarídeos). Galactosídeo permease Lactose Lactose β-galactosidase β-galactosidase Alolactose Galactose Glicose Intracelular 31 32 05/02/2021 17 Modelo Operon • Genes estruturais (3) e um promotor único: →lacZ: β-galactosidase →lacY: permease →lacA: transacetilase • Gene regulador: → lacI: atua como repressor e tem seu próprio promotor Modelo Operon Repressão 33 34 05/02/2021 18 Modelo Operon Indução Modelo Operon 35 36 05/02/2021 19 Mutações Alteração na sequência de bases do DNA Alteração no produto codificado por esse gene Mutações - Substituição de bases 37 38 05/02/2021 20 Mutações •Mutação missense: substituição de base resulta em uma substituição de aminoácidos na proteína sintetizada (Anemia falciforme), •Mutação nonsense: substituição de uma base que resulta em um códon de parada impedindo a síntese de uma proteína funcional, •Mutações de fase de leitura: um ou alguns pares de nucleotídeos são removidos ou inseridos no DNA (são alterações no DNA). 39 40 05/02/2021 21 Mutações • Produtos químicos (ácido nitroso) e a radiação (raios X, gama, UV) produzem mutações direta ou indiretamente sendo denominados mutagênicos, 41 42 05/02/2021 22 Mutações Capacidade de ionizar átomos e moléculas, Transferência genética e recombinação • Recombinação genética: troca de material genético entre duas fitas de DNA gerando uma nova fita com novas combinações de genes. Ex: Crossing over Salmonella – proteínas flagelares 43 44 05/02/2021 23 Transferência genética e recombinação • Transferência genética vertical: genes passados para os descendentes (Ex. Plantas e animais); • Transferência genética horizontal: uma célula doadora passa parte do seu DNA total para uma célula receptora (Transformação, conjugação). Transformação Experimento de Griffith – S. pneumoniae 45 46 05/02/2021 24 • Ocorre naturalmente, • Poucos gêneros de bactérias, incluindo Bacillus, Hemophilus, Neisseria, Acinetobacter e certas linhagens dos gêneros Streptococcus e Staphylococcus, • A competência da célula receptora resulta da alterações na parede celular tornando-a permeável a molécula grandes de DNA, Transformação Conjugação E. coli 47 48 05/02/2021 25 Plasmídeos e Transposons - Fragmentos de DNA autorreplicantes, circulares, contendo genes, com cerca de 1 a 5% do tamanho do cromossomo bacteriano, - Dispensáveis, mas podem ser cruciais para a sobrevivência e o crescimento da célula, - Fator F: plasmídeo conjugativo (transportam os genes para pili sexuais e transferência de plasmídeo); - Plasmídeos que codificam proteínas para aumento da patogenicidade e síntese de bacteriocinas, - Fatores R: dois grupos – Fatores de transferência de resistência (genes para replicação do plasmideo) e Determinante R (genes de resistência) 49
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