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Parasitologia Aula 5: Protozoários – amebíase e amebas de vida livre Apresentação Nesta aula, conheceremos a amebas que causam patologia no homem. Veremos que a Aameba intestinal (Entamoeba histolytica) é o agente etiológico da amebíase, importante problema de saúde pública que leva ao óbito anualmente cerca de 100.000 pessoas, constituindo a segunda causa de mortes por parasitoses. Apesar da alta mortalidade, muitos casos de infecções assintomáticas são registrados. Estudaremos também as amebas patogênicas de vida livre: Naegleria fowleri (agente etiológico da Meningoencefalite amebiana primária), Balamuthia mandrilaris e várias espécies do gênero Acanthamoeba (que causam encefalite amebiana granulomatosa no homem). Objetivos Identi�car os diferentes aspectos �siopatológicos por meio dos mecanismos da ação parasitária que in�uenciam as respostas do hospedeiro; Reconhecer os principais métodos parasitológicos para o diagnóstico laboratorial da parasitose, além de exames laboratoriais complementares; Descrever os tratamentos farmacológicos e pro�laxia para as patologias causadas por amebas. Amebíase intestinal A amebíase é uma patologia causada pelo agente etiológico Entamoeba histolytica. Trata-se de um importante problema de saúde pública, sendo a segunda causa de morte por parasitose. Embora, a amebíase possa evoluir para uma infecção assintomática, todos os anos 100.000 pessoas vão a óbito. O seu habitat é o intestino grosso e, ocasionalmente, penetra na mucosa e produz ulcerações intestinais ou em outras regiões. Veja como as amebas que vivem no intestino do homem são classi�cadas: Reino: Protista Sub-reino: Protozoa Filo: Sarcomastigophora Sub�lo: Sarcodina Família: Entamoebidae Gêneros: Entamoeba, Iodamoeba e endolimax Nesta aula, veremos as espécies do gênero Entamoeba, que vivem no intestino grosso do homem. Vamos lá! Entamoeba histolytica (Fonte: Wikipedia.). 1 http://estacio.webaula.com.br/cursos/go0139/aula5.html Espécies do gênero Entamoeba Temos os seguintes grupos: Clique nos botões para ver as informações. E. coli (homem) E. muris (roedores) → cistos - 8 núcleos E. gallinarum (aves) Grupo coli E. histolytica (homem) E. hartmanni (homem) E. ranarum (sapo e rã) → cistos - 4 núcleos E. invadens (cobras e répteis) E. moshkoviskii (vida livre) E. gingivalis (homem e macaco) � cistos – não são conhecidos Grupo histolytica Atenção! Aqui existe uma videoaula, acesso pelo conteúdo online Formas morfológicas da Entamoeba histolytica Trofozoítos → Pré-cisto → Cisto → Metacisto Trofozoítos Citoplasma Ectoplasma (claro e uniforme) e endoplasma (granuloso e vacuolizado, às vezes, com presença de hemácias). Núcleo Cromatina delicada, uniforme e �na aderida à membrana nuclear, e Cariossomo pequeno e centralmente localizado. A ingestão de alimentos é feita por fagocitose e pinocitose e a movimentação por pseudópodes. Pré-cisto Fase intermediária entre o trofozoíto e os cistos. Cistos ou forma de resistência Cistos jovens Possuem um núcleo e um vacúolo de glicogênio volumoso. Cistos maduros Possuem de 1 a 4 núcleos, cariossomo pequeno e central e apresenta mcitoplasma - corpos cromatoides (bastão) Metacisto Forma multinucleada Encontrada no intestino delgado, onde sofre divisões, originando trofozoítos Atenção! Aqui existe uma videoaula, acesso pelo conteúdo online Ciclo de vida da Entamoeba histolytica O ciclo de vida da Entamoeba histolytica é do tipo monóxeno. Ciclo de vida da Entamoeba histolytica. 1. Ingestão de cistos; 2. desencistamento no intestino delgado; 3. Intestino grosso (Habitat); 4. pré-cisto; 5. Cisto; 6. Fezes formadas; 7. Fezes pastosas e formadas; 8. Fezes diarreicas; 9. Ciclo patológico na parede intestinal; (10) Amebíase extraintestinal (Fígado, Pulmão, Cérebro, Pele). Fonte: Adaptado. Parasitologia Humana. Veja como se dá o ciclo: Ciclo de vida da Entamoeba histolytica Clique no botão acima. O ciclo se inicia pela ingestão dos cistos maduros, junto de alimentos e água contaminados. Passam pelo estômago, resistindo à ação do suco gástrico, chegam ao �nal do intestino delgado ou início do intestino grosso, onde ocorre o desencistamento, com a saída do metacisto, através de uma pequena fenda na parede cística. Em seguida, o metacisto sofre sucessivas divisões nucleares e citoplasmáticas, dando origem a 4 e depois 8 trofozoítos, chamados trofozoítos. Esses trofozoítos migram para o intestino grosso onde se colonizam. Em geral, �cam aderidos à mucosa do intestino, vivendo como um comensal, alimentando-se de detritos e de bactérias. Sob certas circunstâncias, ainda não muito bem conhecidas, podem desprender da parede e, na luz do intestino grosso, principalmente no cólon, sofrer a ação da desidratação, eliminar substâncias nutritivas presentes no citoplasma, transformando-se em pré-cisto. Em seguida, secretam uma membrana cística e se transformam em cistos, inicialmente mononucleados. Por meio de divisões nucleares sucessivas, se transformam em cistos tetranucleados, que são eliminados com as fezes normais ou formados. Em situações que não estão bem conhecidas ainda, o equilíbrio parasito-hospedeiro pode ser rompido e os trofozoítos invadem a submucosa intestinal, multiplicando-se ativamente no interior das úlceras e podem, através da circulação porta, atingir outros órgãos, como o fígado e, posteriormente, pulmão, rim, cérebro ou pele, causando a amebíase extraintestinal. O trofozoíto presente nessas úlceras é denominado forma invasiva ou virulenta. Patogenia da Entamoeba histolytica Clique nos botões para ver as informações. Acanthamoeba Naegleria De vida livre ou parasitárias facultativas Entamoeba díspar - Extremamente semelhante à E. histolytica, porém não patogênica; E. coli - Não patogênica; E. hartmanni - Semelhante à E. histolytica, porém menor, não patogênica; Endolimax nana - Não patogênica; Iodamoeba butschlii - Não patogênica, ocorre também em primatas e porcos. Comensais Período de incubação: 7 dias a 4 meses. Manifestações clínicas na amebíase intestinal Formas assintomáticas ou infecção assintomática da amebíase (80 - 90% dos parasitados são completamente assintomáticos) – a infecção é detectada pelo encontro de cistos no exame de fezes. Formas assintomáticas Colites não disentéricas: 2 a 4 evacuações/dia (dor abdominal ou cólica) Colites disentéricas: cólicas intestinais, evacuações mucossanguinolentas, 8 a 10 vezes por dia (cólicas, hemorragia), prostração, frequentes perfurações no intestino. Manifestações clínicas na amebíase extraintestinal: Embora rara em nosso meio, a amebíase extraintestinal tem sido relatada (casos de abscessos hepáticos amebianos) na Região Amazônica, principalmente no Pará e Amazonas. Amebíase hepática: O abscesso amebiano no fígado é a forma mais comum da amebíase extraintestinal. Pode ser encontrado em todos os grupos de idade, com predominância em adultos com 20 a 60 anos; sendo mais frequente em homens do que em mulheres. Caracteriza-se por: tríade no abcesso amebiano: dor, febre e hepatomegalia; lesões difusas nos hepatócitos. Provas de função hepática: discreta alteração, com aumento de fosfatase alcalina. Hemograma: discreta leucocitose sem eosino�lia. Formas sintomáticas Lesões provocadas pela E. histolytica: A) corte histológico de uma úlcera amebiana intestinal, com típico aspecto de botão de camisa; B) necrose coliquativa hepática. Fonte: Parasitologia Humana. Ulcerações típicas na amebíase hepática: Ruptura do equilíbrio Parasito/Hospedeiro. Patogenicidade da cepa. Vitalidade e número de cistos ingeridos. Principais fatores determinantes da invasão: Diagnóstico da Entamoeba histolytica O diagnóstico clínico é de difícil determinação. Pode ser confundida com esquistossomose, salmonelas ou síndrome do cólon irritado. Para con�rmar o quadro de amebíase intetinal faz-se o exame Parasitológico de Fezes (EPF), buscando nas fezes cisto (fezes formadas) ou trofozoítos (fezes diarreicas). Jápara con�rmar o quadro de amebíase extraintestinal se o paciente apresentar abscesso hepático (tríade - dor, febre e hepatomegalia), faz-se necessária a indicação de exames por imagem: Raio-X Ultrassonogra�a Tomogra�a computadorizada Ressonância magnética Retossigmoidoscopia (também poderá ser utilizada) (Fonte: pixabay). Diagnóstico laboratorial e Diagnóstico imunológico Clique no botão acima. 1- Fezes diarreicas: pesquisa de trofozoítos Exame a fresco: 20-30 min após eliminação, pois trofozoítos morrem rapidamente 2- Fezes formadas: pesquisa de cistos Exames: Flutuação (ex Faust) Centrifugação (ex Ritchie ou formol-éter) Sedimentação (Hoffmann, Pons e Janer) Atenção A eliminação de cistos é intermitente e irregular. Deve-se coletar amostras em conservantes (10% formol ou SAF) em dias alternados por 1 semana. Diagnóstico imunológico - amebíase intestinal e extraintestinal Elisa Imuno�uorescência indireta Hemaglutinação indireta Contraimunoeletroforese Tratamento da Entamoeba histolytica Amebicidas de atuação na luz intestinal • Derivados da quinoleina; • Antibióticos (paromomicina e eritromicina; • Outros derivados (furoato de diloxamina, clorobetamina). Amebicidas tissulares (atuam na parede do intestino e do fígado) • Cloridrato de emetina; • Cloridrato de diidroemetina; • Cloroquina. Amebicidas intestinais e tissulares • Tetraciclinas e seus derivados (clorotetraciclina, oxitetraciclna, eritromicina); • Derivados imidazólicos (mais efetivos — metronidazol, ornidazol, nitroinidazol, cecnidazol e tinidazol). Pro�laxia da Entamoeba histolytica Saneamento e educação sanitária. Exame frequente dos manipuladores de alimentos. Combate às moscas. . Higienização dos alimentos crus Comentário Segundo a OMS: “Onde houver pequenos recursos �nanceiros para serem aplicados em saúde pública, todos eles devem ser dirigidos para o saneamento básico”. Ameba de vida livre As espécies de amebas de vida livre ou, mais bem denominadas, amebas parasitárias facultativas ou oportunistas podem causar meningoencefalites fulminantes que causam a morte de 3 a 7 dias, tendo como etiologia primária a Naegleria fowleri. Outro gênero de ameba de vida livre que pode causar a encefalite granulomatosa crônica, em aidéticos ou imunode�cientes, é a Acanthamoeba, que também pode causar ceratites (em usuários de lentes de contato). Ciclo de vida da ameba de vida livre As amebas de vida livre são frequentemente encontradas no solo e nas águas de lagos e rios. As formas trofozoíticas são ativas e alimenta-se de bactérias. Os cistos são encontrados no solo seco ou na poeira. O desencistamento ocorre quando os cistos entram em ambiente úmido. As formas �ageladas movem-se ativamente na água e, ao entrarem em contato com a mucosa nasal, transformam-se em trofozoítos ativos. Os trofozoítos multiplicam se por divisão binária simples. Placa de aviso sobre a existência de Naegleris fowleri no rio. Fonte: Shutterstock. (Fonte: Shutterstock). Epidemiologia da Naegleria fowleri O primeiro caso de meningoencefalite por Naegleria diagnosticado pós-mortem ocorreu na Austrália, em 1967. No Brasil, o primeiro caso de meningoencafalite amebiana foi diagnosticado em 1970. A Naegleria fowleri é causadora de meningoencefalite amebiana primária (MAP), que é uma infecção fulminante que pode levar a morte de 3 a 7 dias. Apesar de Naegleria fowleri ser isolada em lugares com temperatura acima de 30°C (termofílica), os cistos podem sobreviver a 4°C por, pelo menos, 12 meses, com retenção da virulência quando da excistação dos trofozoítos. Esses protozoários acometem indivíduos jovens e saudáveis. Na distribuição mundial, esses protozoários habitam solo e águas mornas (lagos, piscinas térmicas e rios). A cloração da água não elimina cepas patogênicas de N.fowleria. O número de infecções é pequeno em relação à quantidade de exposição do hospedeiro. O risco de infecção estimado é de 1 caso entre 2,6 milhões de exposições à Naegleria fowleri. Já foram descritos 200 casos. (Fonte: Shutterstock). Morfologia da Naegleria fowleri Trofozoítos Ativos trocando de forma constantemente Quando redondos, medem de 10-25µm de diâmetro Citoplasma granuloso com vacúolos Único núcleo central com halo claro Divisão binária. Fonte: Parasitologia Humana. Cistos Esféricos com 8-12 µm de diâmetro Dupla parede com 1 ou 2 poros Citoplasma �namente granuloso Único núcleo central rodeado com halo claro Em contato com água destilada, convertem-se rapidamente em formas �ageladas. Fonte: Parasitologia Humana. Transmissão da Naegleria fowleri Principais meios de transmissão: Água (cistos ou trofozoítos) e poeira (cistos). A dose infectante ainda é desconhecida. Meios de transmissão Clique no botão acima. Em humanos, pode invadir o SNC através das narinas. Após a penetração, os trofozoítos migram por meio dos nervos olfatórios até chegar ao bulbo olfatório localizado no espaço subaracnóideo. Como esse espaço é bem vascularizado, torna-se uma rota de disseminação dos trofozoítos para outras áreas do Sistema Nervoso Central. Naegleria fowleri secreta uma proteína com atividade mucinolítica e citolítica, (Nfa-1) de 37-kd, localizada nos pseudópodes. Como os trofozoítos de N. fowleri possuem atividade neurotró�ca, essa proteína facilita a invasão da mucosa, submucosa dos plexos nervosos e bulbo olfatório, e �nalmente invade a lâmina cribiforme até atingir o espaço subaracnóideo. O início dos sinais clínicos e sintomas variam de 2 a 3 dias, podendo chegar até de 7 a 14 dias. Porém, após a instalação da doença, a MAP progride rapidamente e quase sempre é fatal. Vejamos, a seguir, a patologia, a sintomatologia, o diagnóstico e o tratamento da Naegleria fowleri: Clique nos botões para ver as informações. Meningoencafalite amebiana primária Macroscopicamente, os hemisférios cerebrais se encontram edemaciados e os bulbos olfatórios necrosados e hemorrágicos. Em menor escala, a substância cortical cinzenta parece ser o local preferido. Trofozoítos podem ser encontrados nos axônios não mielinizados dos nervos olfatórios e mucosa nasal. Patologia Alterações da percepção olfatória - cheiro (parosmia) e gosto (ageusia); Vômitos, náusea e febre; Cefaleia frontal ou bitemporal súbita; Rigidez da nuca; Letargia e coma; Morte em aproximadamente uma a 2 semanas. Sintomatologia Deve ser considerado o histórico de banhos em rios, lagoas e piscinas. É necessário fazer pesquisa e/ou cultura de amebas no líquor cefalorraquidiano e tomogra�a computadorizada do cérebro: Real Time PCR. Encontra-se em desenvolvimento no sentido de monitorar o processo de ampli�cação em tempo real por meio da hibridização de sondas marcadas com �uorescência, visando como alvo a sequência MpC15 – que é única para Naegleria fowleri (MADAROVA et al., 2009). Diagnóstico clínico e laboratorial Somente 3 pacientes sobreviveram à meningoencafalite amebiana primária. Eles foram tratados com Anfotericina B, mas há também o Miconazol. Tratamento Acanthamoeba sp e Balamuthia mandrilaris Veja onde podemos encontrá-la: Solo e coleções de água doce e salgada; Esgotos; Piscinas; Lentes de contato; Unidades de tratamento dentário; Máquinas de diálise; Ventilação; Garganta; Narinas; Pele; Tecido pulmonar ; Cérebro de humanos e animais. A resistência dos cistos a extremos de temperatura, desinfecção e dessecação contam para a presença predominante deste organismo no meio ambiente. Formas morfológicas Acanthamoeba sp Atenção! Aqui existe uma videoaula, acesso pelo conteúdo online Trofozoítos Presença de �nos pseudópodes em forma de espinho; Pequenas, medindo de 15 a 50μm de comprimento de forma oval a triangular quando em movimento; Citoplasma �namente granuloso; Núcleo simples com nucléolo rodeado por halo claro; São ativos em ambiente úmidos e aquosos, onde se dividem por divisão binária. Trofozoíto de Acanthamoeba sp Fonte: Parasitologia Humana. Trofozoíto Cistos Geralmente poligonais, esféricosou estrelados, com 15- 20µm de diâmetro Núcleo semelhante ao trofozoíto Parede interna (endocisto) e a parede externa (ectocisto) formando poros ou opérculos Trofozoíto de Acanthamoeba sp Fonte: Parasitologia Humana. Balamuthia mandrilaris Trofozoítos Presença de pseudópodes alongados e achatados Pequenas, medindo de 30 a 60μm de comprimento de forma oval a triangular quando em movimento Parede dupla sem poros Normalmente encontrada no solo Transmissão, a incidência, os tipos de infecção, a epidemiologia, os diagnósticos e o tratamento da Acanthamoeba sp e da Balamuthia mandrilaris. Clique no botão acima. Transmissão da Acanthamoeba sp e Balamuthia mandrilaris Pela água (aerosol) e poeira. O parasita entra através de lesões na pele, trato respiratório superior ou por meio da inalação de cistos, espalhando-se no organismo via hematogênica até o Sistema Nervoso Central. Incidência da Acanthamoeba sp e Balamuthia mandrilaris A disseminação cutânea e a Meningoencefalite Amebiana Granulomatosa (GAE) normalmente ocorrem em pacientes com algum tipo de: Imunode�ciência Diabetes Tumores Má nutrição Lúpus eritramatoso Alcoolismo Infecção oportunista Encefalite Amebiana Granulomatosa (GAE) Os sintomas incluem: Mudança de humor Perda de coordenação Febre raqueza muscular ou paralisia parcial afetando um dos lados do corpo Visão dupla; Sensibilidade à luz Problemas neurológicos Infecção não oportunista Varia de pessoa para pessoa. Indivíduos infectados queixam-se de: Dor e vermelhidão nos olhos Visão borrada Sensibilidade a luz Sensação de algo estranho nos olhos Lacrimação excessiva Úlceras de córneas associada ao uso de lentes de contato Se não tratada, pode haver perfuração da córnea, diminuição ou perda de visão e até retirada do olho. Devido à similaridade de sintomas com outras infecções oculares, um diagnóstico precoce torna-se essencial para o tratamento efetivo da ceratite por Acanthamoeba. Epidemiologia da acanthamoeba sp e balamuthia mandrilaris Habita água corrente, salgada, ar, e solo. Os cistos podem ser carregados pela água e/ou poeira. A maioria das pessoas já entrou em contato com este organismo durante suas vidas e de 50 a 100% das pessoas sadias possuem anticorpos contra Acanthamoeba. Estudos já demonstraram que estas amebas podem ser cultivadas em faringes de pessoas sadias. Há 1300 casos de ceratite por Acanthamoeba descritos no mundo. A maioria das pessoas infectadas eram usuárias de lentes de contato. Devido a existência mundial de Acanthamoeba, a Meningoencefalite Amebiana Granulomatosa (GAE) normalmente ocorre em pessoas imunocomprometidas, como: Portadores de AIDS Pessoas que receberam transplantes Pacientes com câncer recebendo quimioterapia e fazendo uso de esteroides antiin�amatórios Diagnóstico laboratorial da Acanthamoeba sp e Balamuthia mandrilaris Para dermatite: exame microscópico e biópsia de pele. Para ceratite: pesquisa de trofozoítos e cistos no estroma e raspado de córnea, corados com hematoxilina e eosina ou técnicas de imuno�uorescência. Cultura de amebas com ágar nutriente e salina de Page contendo Escherichia coli, Enterobacter aerogines ou bactérias Gran-negativas. Tratamento da Acanthamoeba sp e Balamuthia mandrilaris Meningoencefalite e lesões cutâneas Amphotericina-B; Rifampicina; Sulfametoxazol – trimetroprina; Cetoconazol; Fluconazol; Albendazol. Ceratite Isotianato de propamidina; Dibromopropamidina; Polimixina B; Miconazol; Neomicina; Derivados de acridina e paramomicina. Os casos que não respondem à terapia por drogas podem ser tratados por ceratoplastia. Pode ser feito também transplante de córnea. Atividade 1. O que é um parasito oportunista? a) Parasito que acomete principalmente indivíduos imunocompetentes b) Parasito que acomete principalmente indivíduos imunodeprimidos c) Parasito que não consegue causar infecção no hospedeiro d) Parasito que causa infecções graves nos hospedeiros e) Parasito de vida livre 2. Um paciente do sexo masculino com 58 anos, HIV positivo, dá entrada no hospital com fortes dores de cabeça e enrijecimento de nuca. Dentre os protozoários estudados até agora, quais parasitas oportunistas estariam envolvidos? Qual a forma morfológica deste parasita envolvida na transmissão? 3. Qual a importância de diferentes metodologias coprológicas para a identi�cação adequada do parasitismo causado por amebas de vida livre? Justi�que. Notas Amebas 1 Ameba indica “aquilo que muda ou não tem forma”, emitem pseudópodes. Referências CIMERMAN, B.; FRANCO, M. A. Atlas de Parasitologia. Artrópodes, Protozoários e Helmintos. São Paulo, Editora Atheneu, 2001. DE CARLI, G.A. Parasitologia Clínica. Seleção de Métodos e Técnicas de Laboratório para o Diagnóstico das Parasitoses Humanas. São Paulo, Editora Atheneu, 2001. MADAROVÁ, L.; TRNKOVÁ, K.; FEIKOVÁ, S.; KLEMENT, C.; OBERNAUEROVÁ, M. A real-time PCR diagnostic method for detection of Naegleria fowleri. Experimental Parasitology. Vol.126, N. 1, 2009. NEVES, D.P. Parasitologia Humana. 12. ed. São Paulo: Editora Atheneu, 2011. REY, L. Bases da Parasitologia Médica. 3. ed. Rio de Janeiro: Editora Guanabara-Koogan, 2009. SILVA, Reinaldo José da et al. Atlas de parasitologia humana. São Paulo: Cultura Acadêmica: Universidade Estadual Paulista, 2009. Próxima aula Explore mais Leia o texto destruction and invasion by Entamoeba histolytica. javascript:void(0);
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