DESENVOLVIMENTO BACTERIANO

Prévia do material em texto

REPRODUÇÃO 
Þ Assexuada: fissão binária 
Þ Duplicação de todo o material celular: 2 cel.-4 cel.... 
Þ Arranjos característicos 
Þ São necessários nutrientes (DNA) e fatores 
ambientais 
Þ Tempo de geração: intervalo de tempo necessário 
para que uma célula se duplique (cada célula varia o 
tempo para se multiplicar= toda bác tem um 
ambiente ideal/ótimo) 
 
 
 
População bacteriana é um SISTEMA DINÂMICO, com 
células se dividindo e células morrendo o tempo todo 
(curva do desenv. Bacteriano) 
 
 
Dinâmica populacional 
 
Fase lag ou Fase de adaptação ou Fase de retardo 
(Duração: Caract. das espécies bacterianas 
e condições do meio de origem e destino) 
 
Fase log ou Fase exponencial 
(Se adaptaram= Número de bactérias crescerá para 2n (n= 
número de duplicações)) 
 
Fase Estacionária 
(↓ Nutrientes ↑ substâncias tóxicas (seus produtos excretados) 
adição de meio de cultura novo/transferência de 
microrganismos) 
LIMITE PARA ESTUDOS 
 
Fase de Declínio ou Fase de morte 
(Condições não favoráveis 
células se modificam – difícil identificação, esporos: se formam) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Células mais periféricas: desenvolvimento favorecido 
Células mais no centro da colônia: desenvolvimento 
lento ou mais mortes de células bacterianas 
Cultura: todas as fases simultaneamente 
 
 
 
 
 
 
CONDIÇÕES NECESSÁRIAS 
Þ Condições químicas (nutrientes): água, 
macronutrientes, micronutrientes e fatores 
orgânicos de crescimento 
Þ Condições físicas (ambientais): temperatura, pH, 
atmosfera gasosa, pressão osmótica 
 
Temperatura 
o Afeta de maneira significativa 
o Desenvolvimento – reações químicas – temperatura 
o Temperatura máxima tolerada – termoestabilidade 
geral das proteínas de cada espécie 
o Proteínas do choque térmico: produzidas 
temporariamente, quando ocorre um aumento súbito 
de temp., (termorresistentes) e estabilizam 
proteínas termossensíveis 
 
 
Þ Mesófilos: 20 a 45°C – ótimo: 30 a 40°C 
(patogênicos -febre: pode inibir) 
Þ Psicrotrófico: 7°C ou menos – ótimo: 20 a 30°C 
(“mesófilos” que podem desenvolver em 
temperaturas de refrigeração) 
Þ Hipertermófilos: temperaturas extremas 
Þ Termófilos: 45°C ou mais – ótimo: 55 a 65°C 
Þ Psicrófilos: 0 a 20°C – ótimo: 10 a 15°C 
 
Atmosfera gasosa: oxigênio, dióxido de carbono, 
nitrogênio e metano 
 
Þ Toxicidade do O2 resulta de sua redução 
• Peróxido de hidrogênio (H2O2) 
• Superóxido (O2-) 
 
Þ H2O2 – lesão no DNA 
• Mutantes são extremamente sensíveis 
• Mecanismos de reparo do DNA 
 
Obs.: sistema de reparo do DNA em E. coli é mais 
importante que a presença das enzimas dismutase e catalase 
 
 
Desenvolvimento Bacteriano 
 
 
 
 
pH 
Þ Manutenção do pH intracelular em torno de 7,5 –
independente do pH do meio externo (característica 
específica) 
Þ Manutenção do pH intracelular: sistemas de 
transporte de prótons na membrana citoplasmática 
 
Þ Desenvolvimento dos microrganismos: alteração do 
pH do meio – inibe o desenvolvimento 
Þ Prevenção: adição de tampão ao meio de cultura 
 
Pressão osmótica 
Þ Diferenças na concentração de solutos (meio externo 
e meio interno): células podem desidratar-se ou 
romper- se 
Þ Meios hipertônicos e hipotônicos: redução do 
desenvolvimento microbiano até morte celular 
 
Medidas de Crescimento 
Estimar o numero de células- viáveis e não viáveis 
 
Diluição em série e contagem padrão em placa 
Princípio: 1 bactéria se dividirá e formará uma 
colônia visível (condições adequadas) 
Contagem deve ser “viável”: diluir (diluição em série) a 
cultura ou amostra e plaquear um volume conhecido 
Precisão: dispersão homogênea dos organismos em cada 
diluição 
• Agitar antes de retirar amostra 
• Semear diversas placas por diluição 
• Culturas jovens (fase log) – microrganismos 
que morreram não são contados 
 
 
Contagem microscópica direta 
Þ Câmara de contagem de Petroff-Hausser 
• Volume conhecido de uma suspensão bacteriana 
• Contagem das células em áreas específicas 
• Cálculo da suspensão original 
Precisão: presença de grande quantidade de bactérias n 
por ml de cultura 
• Requer que as bactérias estejam homogeneamente 
distribuídas 
• Desvantagem: não distingue células mortas de 
células vivas 
 
Número mais provável 
• Amostra com poucos microrganismos (água, 
alimentos) 
• Baterias de 3 ou de 5 tubos 
• Número de microrganismos na cultura original é 
estimado: tabela de “NMP” – valores baseados em 
probabilidades estatísticas 
 
Filtração 
• Tamanho da população é pequeno 
• Volume conhecido de água ou ar é filtrado (poros irão 
reter microrganismos) 
• Filtro é colocado em meio sólido: cada colônia 
representa originalmente um microrganismo 
 
Turbidez 
• Colorímetros ou espectrofotômetros 
• Medida de crescimento sem interrupção da cultura 
• Amostras com densidades bacterianas altas: diluídas 
para aumentar a exatidão de leitura 
• Turvação não diferencia células vivas e mortas 
 
CRESCIMENTO CONTÍNUO 
Ideal para estudos: parâmetros constantes (cultura 
contínua) 
• Nutrientes adicionados continuamente 
• Volume constante (retirada de meio já utilizado) 
• Constante: composição do meio, concentração de 
metabólitos e massa de células 
 
 
Todos os alimentos 
tem uma 
contaminação 
microbiana, devemos 
prolongar a fase lag: 
acrescenta sal, 
refrigera, aquece 
(dificulta as bác se 
desenvolverem)