Autofagia: métodos de análise

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Autofagia 
Métodos de análise 
Microscopia eletrônica 
• O autofagossomo é definido por
uma estrutura de dupla
membrana que contem material
citoplasmático não digerido
GFP-LC3
A proteína LC3 é usada como um marcador de
lisossomos. Quando ligada a uma proteína
fluorescente (GFP) é possível visualizar a
proteína em microscópio de fluorescência pela
formação de pontinhos citoplasmáticos
Western Blot: 
É possível avaliar a formação dos
autofagossomos pela conversão
de LC3 I em LC3 II por
imunodetecção
É uma base fraca que funciona como marcador
fluorescente e se acumula em compartimentos ácidos,
marcando os autofagossomos maduros. Citoplasma e
núcleo ficam verdes enquanto os compartimentos ácidos
ficam vermelhos 
laranja de acridina
Referência: THOMÉ, Marcos Paulo et al. Nova abordagem para análise de autofagia com Laranja de Acridina. 2013. 31 f. TCC (Graduação) - Curso de Biomedicina, Universidade Federal do Rio Grande do Sul,
Porto Alegre, 2013. Disponível em: https://www.lume.ufrgs.br/bitstream/handle/10183/119153/000970136.pdf;sequence=1. Acesso em: 228 jun. 2021.