EXTRAÇÃO E DETERMINAÇÃO DE LIPÍDIOS TOTAIS PELO MÉTODO DE

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS 
PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS 
 
Disciplina: Análise de Alimentos – 1° semestre 2021 – Ensino remoto 
Aula prática – Faculdade de Farmácia 
Prof: Eduardo Ramirez Asquieri 
 
EXTRAÇÃO E DETERMINAÇÃO DE LIPÍDIOS TOTAIS PELO MÉTODO DE 
BLIGH-DYER 
 
1. Fundamento 
Neste método, a amostra é homogeneizada com uma mistura de clorofórmio e 
metanol, em proporção tal que um sistema miscível é formado com a água da 
amostra. Este sistema de solventes já tinha sido utilizado por Folch et al. (1951), mas 
o método empregava volumes grandes e inconvenientes de solventes, tornando-se 
pouco prático. Uma nova diluição e extração com volumes determinados de 
clorofórmio e água, separa o sistema monofásico em duas camadas, formando um 
sistema bifásico: uma camada clorofórmica, mais pesada, contendo os lipídios e uma 
camada metanólica contendo a água e os compostos não lipídicos. Desta forma, é 
obtido um extrato lipídico purificado quando a camada clorofórmica é isolada. O 
método permite muita flexibilidade de procedimento, mas é imperativo que as 
proporções entre os volumes de clorofórmio, metanol e água, sejam de 1:2:0,8 e 
2:2:1,8, antes e após a diluição, respectivamente. Este método apresenta vantagens 
marcantes sobre a maioria dos métodos existentes de extração e purificação de 
lipídios, a saber: 
a) Todas as classes de lipídeos são extraídas, polares e apolares, pois o clorofórmio 
é um solvente orgânico para qualquer classe de lipídios, e o metanol tem função 
dupla de facilitar o embebimento da amostra e desfazer as ligações dos lipídios 
com proteínas (Lovern, 1965). 
b) A extração é realizada sem aquecimento, assim os lipídeos extraídos podem ser 
utilizados para qualquer tipo de determinação, sem alterações químicas e físicas. 
 
2. Reagentes 
• Clorofórmio 
• Metanol 
• Solução de sulfato de sódio 1,5% 
• Sulfato de sódio 
 
3. Materiais 
• Agitador rotativo para tubos 
• Cadinhos 
• Dessecador 
• Estufa a 105°C 
• Funil 
• Papel de filtro qualitativo 
• Pipetas 
• Proveta de 25 mL 
• Tubos pirex com tampa de rosca com teflon (70mL) 
 
 
 
4. Procedimento 
Para amostras secas ou quase secas, até 10% de umidade. 
 
• Amostra: farinha de soja (abaixo de 20%) 
• Preparar cadinho (ou béquer): numerar e secar os cadinhos em estufa à105°C por 
30 minutos, em seguida deixar em dessecador por 20 minutos. Anotar o peso. 
• Pesar em papel vegetal entre 3,0 a 3,5g (amostras com teor de gordura abaixo de 
20%) ou entre 2,0 a 2,5g (amostras com teor de gordura acima de 20%) de 
amostra finamente moída e homogeneizada. Anotar o peso. 
• Transferir para o tubo de 70mL identificado. Adicionar exatamente 10mL de 
clorofórmio, 20mL de metanol e 8mL de água destilada. Agitar no agitador 
rotativo por 30 minutos (lentamente). 
• Adicionar exatamente 10mL de clorofórmio e 10mL de solução de sulfato de 
sódio 1,5%. Agitar vigorosamente por 2 minutos. 
• Deixar separar as camadas naturalmente por no mínimo 1 hora ou centrifugar a 
2000 rpm por 3 minutos. 
• Succionar a camada metanólica (superior) e descartar em frasco de descarte. 
• Filtrar a camada inferior em papel de filtro com 1g de sulfato de sódio. Medir 
exatamente 5mL do filtrado e transferir para o cadinho que deve ser manuseado 
com pinça. 
• Evaporar o solvente em estufa à 105ºC por 45 minutos, esfriar em dessecador por 
20 minutos e pesar. 
 
5. Cálculo 
 
Lipídios (%)= 
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑜𝑠 𝑙𝑖𝑝í𝑑𝑖𝑜𝑠 (𝑔) 𝑥 4 𝑥 100
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑎 𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎 (𝑔)
 
 
 
6. Referências 
• BLIGH, E. G. & DYER, W.J. A rapid method of total lipid extraction and 
purification. Canadian Journal of Biochemistry and Physiology. v. 37, n. 08, 
p. 911-917, 1959. 
• FOLCH, J.; ASCOLI, I.; LEES, M. et al. Preparation of lipid extracts from brain 
tissue. The Journal of Biological Chemistry. v.191, p. 883-841, 1951. 
• LOVERN, J.A Some analytical problems in the analysis of fish and fish products. 
Journal of AOAC International. v. 48, n. 01, p. 60-68, 1965. 
 
 
 
DADOS PARA RELATÓRIO 
 
 Peso amostra 
(g) 
Peso cadinho 
vazio (g) 
Peso cadinho + óleo 
(g) 
1 3,4013 33,9953 34,1399 
2 3,3999 38,4352 38,5967 
3 3,2997 33,5789 33,7323