Meios de cultura

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Josué Mallmann Centenaro 
Nas condições artificias de laboratório, o crescimento 
de bactérias é conseguido pela semeadura das mesmas 
em meios de cultura, cuja composição deve atender 
aos requesitos de cada espécie de bactérias. Dessa 
forma, para compor um mio adequado, é necessário 
conhcecer a fisiologia das bactérias em estudo. 
De uma forma geral, o meio de cultura é o material 
nutriente preparado no laboratório para o crescimento 
de microrganismos. As bactérias que crescem e se 
multiplicam nos meios de cultura são denominados 
“cultura”. 
 
Classificações dos meios de 
cultura 
De acordo com o esta físico: ágar (polissacarídeo 
complexo isolado de algas marinhas) 
 Líquido: são os caldos desprovidos de ágar. 
 Semi-sólido: são aqueles que apresentam em 
sua composição até 1% de ágar. 
 Sólido: são aqueles que apresentam em sua 
composição 1,5 a 2,5% de ágar. 
De acordo com a composição: 
 Naturais: são aqueles encontrados na natureza, 
de origem vegetal (exemplo: pedaço de batata 
ou de abóbora) ou de origem animal (exemplo: 
pedaço de carne). 
 Artificiais: são aqueles fabricados em 
laboratório, constituido de substâncias 
químicas, podendo ser definidos ou indefinidos 
(como o sangue, gema de ovo, alimentos). 
De acordo com a finalidade: 
 Simples: contém apenas componentes básicos 
para o crescimento de uma bactéria. 
 Enriquecido: meio que tem aumentada a sua 
capacidade nutricional para a bactéria pela 
adição de substâncias como gema de ovo, 
sangue, plasma, soro, leite. De uso frequente 
para bactérias de difícil crescimento 
(fastidiosas). 
 De enriquecimento: visa inibir o crescimento de 
bactérias acompanhantes e favorecer o 
crescimento da bactéria alvo que pretende-se 
isolar. Exemplo: Caldo Rapapport Vassiliardis. 
 Seletivo: contêm substâncias seletivas que 
inibem o crescimento de certas bactérias e 
permitem o crescimento de outras. São meios 
sólidos e têm como objetivo isolar culturas 
puras. 
 Diferencial: permite a diferenciação de 
diferentes microrganismos. Por exemplo: a 
diferenciação de bactérias fermentadoras e 
não fermentadoras da lactose no Ágar EBM e 
Ágar MacConkey. 
o O Ágar MacConkey é considerado um 
dos primeiros meios de cultivo para 
bactérias gram negativas indicando a 
fermentação por lactose. As bactérias 
gram negativas se desenvolvem melhor 
com essa técnica e se diferenciam por 
apresentarem a habilidade de 
fermentar a lactose. O Ágar 
MacConkey é seletivo, pois apresenta 
combinação de sais biliares e o cristal 
violeta, que inibem os microrganismos 
gram positivos, assim reduzindo 
relativamente doenças causadas por 
bactérias ou protozoários presentes nas 
fezes. 
o O Ágar EMB é um meio para 
diferenciação ligeiramente seletivo 
utilizado para o isolamento e 
diferenciação de bacilos entéricos 
gram-negativos. A sacarose é 
fermentada por determinados 
organismos entéricos de forma mais 
rápida do que a lactose. O EMB contém 
corantes de eosina e azul de metileno 
que inibem as bactérias gram-positivas 
num determinado grau. Os corantes 
funcionam também como indicadores 
de diferenciação em resposta à 
fermentação da lactose e/ou sacarose 
por microrganismos. 
Indicadores 
Possuem agentes que indicam determinadas reações no 
meio, para a determinação do metabolismo das bactérias. 
Como exemplo, o ferro no meio pode indicar a produção de 
H2S pelo enegrecimento do meio (sulfeto ferroso). 
Geralmente o agente é um indicador de pH. Os meios 
bioquímicos são geralmente indicadores. 
 De transporte: são meios utilizados com a finalidade 
de manter os microrganismos viáveis, permitindo 
seu crescimento em meios de cultura utilizados no 
laboratório. 
 De estoque: são meios utilizados com a finalidade 
de preservar uma cultura bacteriana para 
posteriores utilizações no laboratório. 
Destruição ou remoção das 
formas de vida 
Esterilização: o objetivo é eliminar microrganismos que 
possam estar presentes nos instrumentos. A esterilização 
pode ser feita por vários métodos: calor (de uma estufa ou 
fervura), radiação (raios UV, Gama, Alfa ou X) e substâncias 
químicas. 
Desinfecção: serve para eliminar microrganismos pelo uso 
de desinfetantes. Ela é fundamental, mas antes de mais 
nada é preciso lavar os instrumentos, para depois, 
desinfetá-los. Os desinfetantes podem perder o seu efeito 
na presença de sujeiras e contribuir para que os micróbios 
fiquem resistentes a eles. Exemplos: álcoois, compostos 
clorados, formaldeído, iodóforos, peróxido de hidrogênio, 
ácido peracético, compostos fenólicos e quaternário de 
amônia. 
Assepsia: significa método, ou o conjunto de métodos, 
utilizados para impedir a invasão de germes patogênicos no 
organismo, visando-se prevenir infecções. É a limpeza que 
ocorre preventivamente. Trata-se de uma higienização 
prévia, cujo objetivo é evitar a entrada de organismos ou 
elementos que possam prejudicar determinado organismo 
ou ambiente. 
Antissepsia: significa método, ou conjunto de métodos e 
processos, utilizado para desinfectar um local ou organismo 
que já foi infectado. É um processo de limpeza de um local 
ou organismo que já foi invadido por organismos 
indesejados, tais como fungos, vírus, bactérias, outros 
agentes etiológicos. A antissepsia é feita principalmente 
através do uso substâncias químicas, tais como fungicidas e 
microbicidas, as quais visam a eliminar ou diminuir a 
proliferação dos agentes invasores.