Técnica da coloração de Ziehl-Neelsen

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Reagentes:
↘ Corante primário: fucsina fenicada (carbolfucsina);
↘ Descolorante: álcool-ácido 3% (v/v);
↘ Contra-corante: azul de metileno ou verde malaquita.
Passo a passo:
1. Cobrir a lâmina com fucsina fenicada;
2. Aquecer a lâmina até à emissão de vapores (não deixar ferver ou secar);
3. Deixe o corante aquecido na lâmina por 5 minutos;
4. Lavar com água corrente;
5. Cobrir a lâmina com álcool-ácido até descorar totalmente o esfregaço(2-5 min);
6. Lavar com água corrente;
7. Cobrir a lâmina com azul de metileno durante 1 a 2 minutos;
8. Lavar com água corrente e limpar a parte inferior da lâmina;
9. Esperar secar;
10. Observar no microscópio em objetiva de imersão (100x).
OBS: Quando a fucsina fenicada é aquecida, o calor faz com que os lipídios da
membrana derretam, deixando-a permeável ao corante.
Interpretação
● Não ácido-álcool resistentes: corados de azul/verde.
● Organismos ácido-álcool resistentes: corados de vermelho.