a) O Branco é utilizado como controle negativo, ou seja, é uma amostra que não contém proteínas e é utilizada para calibrar o espectrofotômetro e para subtrair a absorvância das amostras que serão medidas. b) O gráfico que apresenta uma curva mais linear e com maior número de pontos é o mais adequado para ser utilizado como curva-padrão, pois apresenta maior precisão e acurácia. c) A unidade de concentração de proteína que será obtida é em mg/mL. d) A maior e a menor absorbância que a curva-padrão consegue medir com confiança dependem da linearidade da curva. Para determinar a concentração de proteínas nessas absorbâncias, é necessário utilizar a equação da curva-padrão. e) A concentração obtida usando a curva-padrão não é confiável, pois a absorbância de 1,7 está fora da faixa de linearidade da curva-padrão. Para solucionar este problema, é necessário diluir a amostra e medir novamente a absorbância, de forma que a absorbância esteja dentro da faixa de linearidade da curva-padrão. f) Para calcular a concentração da amostra sem diluir, é necessário utilizar a equação da curva-padrão e substituir a absorbância obtida pela amostra diluída e a concentração obtida pela diluição correspondente. Assim, é possível calcular a concentração da amostra sem diluir. g) Abs 595 nm Diluição 5x 1.8 Diluição 50x 1.25 Diluição 100x 0.64 Diluição 500x Para calcular a concentração da amostra sem diluir, é necessário utilizar a equação da curva-padrão e substituir a absorbância obtida pela amostra diluída e a concentração obtida pela diluição correspondente. Assim, temos: - Diluição 5x: Concentração = 0,2 mg/mL - Diluição 50x: Concentração = 0,02 mg/mL - Diluição 100x: Concentração = 0,01 mg/mL - Diluição 500x: Concentração = 0,002 mg/mL Para calcular a concentração da amostra sem diluir, é necessário utilizar a equação da curva-padrão e substituir a absorbância obtida pela amostra sem diluir. Como não temos a absorbância da amostra sem diluir, não é possível calcular a concentração da amostra sem diluir.
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