Qual o procedimento de extração do RNA? O procedimento de extração de RNA é semelhante ao de extração de DNA, mas requer mais cuidados devido à fr...

O procedimento de extração de RNA é semelhante ao de extração de DNA, mas requer alguns cuidados adicionais. O RNA é mais frágil e pode ser facilmente degradado por ribonucleases (RNases) que estão presentes em muitos tecidos e fluidos biológicos. Para evitar a degradação do RNA, é importante seguir algumas etapas: 1. Coleta da amostra: a amostra deve ser coletada e armazenada em condições adequadas para preservar o RNA. Por exemplo, o sangue deve ser coletado em tubos com anticoagulante e o tecido deve ser congelado imediatamente após a coleta. 2. Homogeneização: a amostra deve ser homogeneizada para quebrar as células e liberar o RNA. Isso pode ser feito por meio de trituração mecânica, ultrassom ou homogeneizador. 3. Extração: a extração do RNA pode ser realizada por diferentes métodos, como o método do fenol/clorofórmio ou kits comerciais. O método do fenol/clorofórmio é mais trabalhoso, mas pode ser mais eficiente em algumas amostras. Os kits comerciais são mais práticos e rápidos, mas podem ser mais caros. 4. Purificação: após a extração, o RNA deve ser purificado para remover contaminantes, como proteínas e DNA. Isso pode ser feito por meio de colunas de sílica ou precipitação com álcool. 5. Quantificação: a quantidade e a qualidade do RNA extraído devem ser avaliadas por meio de espectrofotometria ou eletroforese em gel de agarose. 6. Armazenamento: o RNA deve ser armazenado em condições adequadas para evitar a degradação. Geralmente, o RNA é armazenado em solução de RNAse-free em temperatura de -80°C.