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O acoplamento da cromatografia líquida com o detector de fluorescência é muito usada para separação de espécies fluorescentes da demais espécies da...

O acoplamento da cromatografia líquida com o detector de fluorescência é muito usada para separação de espécies fluorescentes da demais espécies da amostra para sua posterior detecção. A técnica mais utilizada é a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), cuja instrumentação típica está sendo representada na Figura 1, na qual as pressões altas de bombeamento são requeridas para se obter vazões razoáveis com as colunas com materiais de empacotamento de 3 a 10 µm. Por causa destas altas pressões, os equipamentos de CLAE tendem a ser mais elaborados e mais caros. A Figura mostra um equipamento CLAE típico que é composta por um reservatório de fase móvel, uma bomba, um injetor, uma coluna, um detector e um processador de dados. CLAE com detector de fluorescência. Analise as afirmações a seguir: I. Existem algumas espécies que não são fluorescentes, mas pode-se utilizar o método de derivação química, na qual o analito se liga ao derivatizante podendo emitir radiação fluorescente. Os principais derivatizantes para este fim são cloreto de dansila, ortoftaldeído (OPA) e fluorescamine. II. No caso de análise de vinhos, pode-se utilizar a técnica de CLAE acoplada a um detector de fluorescência. Após a interação das aminas bioativas com o derivatizante, as espécies são separadas pelo método da cromatografia líquida e são detectadas utilizando o detector de fluorescência, que permite determinar a concentração da espécie de histamina na amostra de vinho. III. O limite de detecção desta técnica é cerca de 10 fg (fentogramas). IV. O equipamento utiliza altas pressões com a bomba devido ao empacotamento da coluna e o tamanho da partícula da fase estacionária. Considerando o contexto apresentado, é CORRETO o que se afirma em: Selecione uma alternativa: a) I e II, apenas. b) II e III, apenas. c) I, II e III, apenas. d) I, II e IV, apenas. e) I, II, III e IV.

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A alternativa correta é a letra D) I, II e IV, apenas. Justificativa: I. Existem algumas espécies que não são fluorescentes, mas pode-se utilizar o método de derivação química, na qual o analito se liga ao derivatizante podendo emitir radiação fluorescente. Os principais derivatizantes para este fim são cloreto de dansila, ortoftaldeído (OPA) e fluorescamine. - Correta. II. No caso de análise de vinhos, pode-se utilizar a técnica de CLAE acoplada a um detector de fluorescência. Após a interação das aminas bioativas com o derivatizante, as espécies são separadas pelo método da cromatografia líquida e são detectadas utilizando o detector de fluorescência, que permite determinar a concentração da espécie de histamina na amostra de vinho. - Correta. III. O limite de detecção desta técnica é cerca de 10 fg (fentogramas). - Incorreta. O limite de detecção pode variar de acordo com a amostra e as condições experimentais. IV. O equipamento utiliza altas pressões com a bomba devido ao empacotamento da coluna e o tamanho da partícula da fase estacionária. - Correta.

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