A principal característica que diferencia as micobactérias, como Mycobacterium tuberculosis, das bactérias gram-positivas e gram-negativas no processo de coloração de Gram é a presença de uma parede celular rica em lipídios, que dificulta a retenção do corante violeta pela parede celular durante a coloração de Gram. Isso faz com que as micobactérias sejam classificadas como álcool-ácido resistentes, ou seja, não retêm a coloração violeta e são coradas de vermelho pelo corante de contraste.
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