Um grupo de pesquisa está interessado em avaliar as consequências da deleção do gene XYZ para o desenvolvimento da retina. Utilizando o sistema de ...

Um grupo de pesquisa está interessado em avaliar as consequências da deleção do gene XYZ para o desenvolvimento da retina. Utilizando o sistema de deleção Gênica tecido-específica, observou-se o seguinte resultado: Na imagem é possível observar o efeito da deleção do gene XYZ na retina de camundongos em diferentes idades. Como essa hipótese proposta pode ser testada?

Para identificar qual função (proliferação, diferenciação e morte celular) está desregulada, é necessário fazer ensaios de apoptose, ensaios de diferenciação celular e ensaios de proliferação.Antes desses ensaios, é necessário confirmar a hipótese de que a deleção desse gene causa danos no DNA.Para isso, pode-se realizar o uso de biomarcadores como γH2AX+ que vai servir para a identificação de danos no DNA e realizar uma comparação entre um grupo controle e um grupo com deleção do gene XYZ. Se a hipótese levantada for correta, a presença de células γH2AX+ vai ser maior no grupo com a deleção do gene (XYZ-cKO) do que no controle. Confirmando que a deleção desse gene aumenta os danos no DNA. Vai ser necessário analisar se esse dano leva a apoptose dessas células e/ou redução da proliferação celular.Para isso, vai ser necessário um ensaio de apoptose para identificar se as células vão ter uma apoptose maior com a deleção do gene XYZ quando comparadas com o controle e também entre as diferentes idades dos camundongos.Para isso, pode-se quantificar a presença de núcleos picnóticos (indica apoptose) ou por um método conhecido como TÚNEL.Para descobrir se a redução da proliferação celular está envolvida, pode-se usar marcadores de proliferação como PCNA, BrdU para analisar se essas células realmente estão proliferando menos quando comparada entre as diferentes idades de camundongos e com o controle.