Vamos analisar cada afirmação sobre a técnica ELISA direta: ( ) Essa técnica utiliza anticorpo marcado com radioisótopo. Falso (F). Na técnica ELISA direta, o anticorpo utilizado não é marcado com radioisótopo, mas sim com uma enzima que permitirá a detecção da reação. ( ) O antígeno não ligado é removido por lavagem. Verdadeiro (V). Após a etapa de incubação, é necessário realizar lavagens para remover o antígeno não ligado e evitar resultados falsos positivos. ( ) Essa técnica utiliza suporte sólido com uma quantidade fixa de antígenos. Verdadeiro (V). O suporte sólido utilizado na técnica ELISA direta possui uma quantidade fixa de antígenos para capturar os anticorpos presentes na amostra. ( ) O anticorpo secundário marcado com a enzima e não-ligado deve ser removido com lavagens. Verdadeiro (V). Após a etapa de detecção com o anticorpo secundário marcado com enzima, é necessário realizar lavagens para remover o anticorpo não ligado e evitar interferências no resultado. ( ) Após adicionar o substrato e incubação é possível visualizar reação de cor em amostras positivas. Verdadeiro (V). A reação de cor ocorre na presença do substrato e da enzima ligada ao anticorpo, permitindo a visualização de amostras positivas. Portanto, a sequência correta é: B) V - F - V - F - V.