Vamos analisar cada afirmação sobre a técnica ELISA direta: ( ) Essa técnica utiliza anticorpo marcado com radioisótopo. Falso (F). Na técnica ELISA direta, o anticorpo primário é o que está marcado com a enzima, não com radioisótopo. ( ) O antígeno não ligado é removido por lavagem. Verdadeiro (V). Após a etapa de incubação, é necessário realizar lavagens para remover o antígeno não ligado e evitar resultados falsos positivos. ( ) Essa técnica utiliza suporte sólido com uma quantidade fixa de antígenos. Verdadeiro (V). No ELISA direto, o suporte sólido é previamente revestido com o antígeno de interesse em uma quantidade fixa. ( ) O anticorpo secundário marcado com a enzima e não-ligado deve ser removido com lavagens. Verdadeiro (V). Após a etapa de ligação do anticorpo secundário marcado, é necessário remover o anticorpo não ligado por meio de lavagens para evitar interferências nos resultados. ( ) Após adicionar o substrato e incubação é possível visualizar reação de cor em amostras positivas. Verdadeiro (V). A reação de cor ocorre devido à ação da enzima ligada ao anticorpo secundário marcado, e é possível visualizar essa reação em amostras que contenham o antígeno de interesse. Portanto, a sequência correta é: B) V - F - V - F - V.