resuma com suas próprias palavras: Os meios de cultura podem ser seletivos ou diferenciais. Os primeiros, como o próprio nome diz, selecionam determinadas espécies pela inibição do crescimento de outras, pela ação de substâncias presentes em sua composição, como antibióticos, corantes, bile ou sais biliares. Um exemplo de meio de cultivo enriquecido e muito seletivo é o Thayer-Martin, no qual crescem apenas as bactérias do gênero Neisseria, por conter vancomicina (inibidor de bactérias Gram-positivas), colistina (inibidor de bactérias Gram-negativas) e nistatina (inibidor fúngico). Os meios diferenciais são produzidos para isolamento de microrganismos com base em suas características bioquímicas ou fisiológicas, diferenciando-os das demais espécies presentes na amostra. Essa funcionalidade é obtida por meio da adição de um carboidrato e de um indicador de pH ao meio de cultura, possibilitando identificar, pela mudança de cor, devido à acidificação, as colônias que produzem ácidos a partir do carboidrato adicionado. Também existem meios de cultura seletivos e diferenciais, como o ágar MacConkey, que contém sais biliares e cristal violeta (inibidores de bactérias Gram-positivas e algumas Gram-negativas fastidiosas), e lactose e vermelho neutro (para diferenciação de bactérias lactose-dependentes): bactérias lactose-positivas se apresentam em tons avermelhados, e bactérias lactose-negativas se apresentam transparentes. Outro exemplo é o meio CLED (cisteína, lactato, eletrólito deficiente), muito utilizado em urinocultura, contendo azul de bromotimol: a cor original do meio é verde, tornando-se amarela na presença de bactérias lactose-positivas. O ágar Salmonella-Shigella (SS) é um meio seletivo para esses dois gêneros de bactérias enteropatogênicas, por conter altas concentrações de sais biliares e citrato de sódio, sendo diferencial para outras bactérias Gram-negativas intestinais, por conter lactose e vermelho neutro. Além disso, o meio proporciona diferenciação também entre salmonelas (colônias com centro negro) e Shigella sp. (colônias rosadas). O ágar sangue de carneiro, por sua vez, proporciona o isolamento de bactérias produtoras de substâncias hemolíticas (hemolisinas), formando um anel claro ao redor da colônia pela lise das hemácias presentes no meio. Para o isolamento dos microrganismos em cultura pura, uma das técnicas mais utilizadas é a do esgotamento, baseada no princípio de que uma célula microbiana isolada origina um agrupamento visível macroscopicamente (colônia) em meio de cultura propício para seu crescimento. O procedimento consiste na semeadura da suspensão de microrganismos com uma alça de inoculação, de maneira estriada, não sobreposta, e das bordas para o centro da placa, em três regiões diferentes. Dessa forma, a quantidade de amostra na alça vai diminuindo a cada estriação e, ao final da última, as células microbianas estarão separadas umas das outras na superfície do meio – podendo mais facilmente ser identificadas e passadas para um novo meio de cultura, obtendo-se uma cultura pura. Para obtenção de resultados com qualidade, deve-se: a) realizar o maior número de estriações possível; b) não perfurar ou rasgar o ágar, cuja consistência é delicada, lembrando a da gelatina; c) não voltar com a alça sobre as estrias, de maneira a sobrepô-las; e d) iniciar a semeadura com uma pequena quantidade de amostra na alça de inoculação. Na urinocultura, o esgotamento é realizado com uma alça calibrada de 10µL ou, mais comumente, 1µL, e o estriamento é realizado por toda a extensão da placa, precedido por uma estria central de cima a baixo (Figuras 5 e 6). Quando a técnica é realizada com alça de 1µL, cada colônia representa 1.000 unidades formadoras de colônia (UFC) por mililitro, ou 103UFC/mL. Contagens superiores a 100.000UFC/mL determinam um resultado positivo; contagens inferiores a esse número, um resultado negativo. No entanto, mesmo resultados negativos podem ser importantes se associados ao sedimento urinário, ao quadro clínico do paciente, a exames anteriores e à relevância do microrganismo isolado