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Biologia Molecular

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A Biotecnologia trabalha predominantemente manipulando material genético de seres vivos; para a maioria dos organismos, o material genético é a molécula de DNA.
Acerca da estrutura da molécula de DNA, assinale a opção correta.
A - DNA é composto por quatro tipos de bases nitrogenadas: adenina, citosina, timina e uracila.
B - O açúcar contido na molécula de DNA é a ribose.
C - Em uma cadeia de DNA, os nucleotídeos se ligam aos açúcares e fosfatos por pontes de hidrogênio.
D - As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas.
E - Há complementaridade entre as bases nitrogenadas adenina e timina e entre guanina e uracila.

Exercícios Para o Conhecimento

semana passada

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Tema 4 Amplificação in Vitro de Dna

Tema 4 Amplificação in Vitro de Dna

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Ed

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Vamos analisar cada uma das alternativas para identificar a correta sobre a estrutura da molécula de DNA: A - DNA é composto por quatro tipos de bases nitrogenadas: adenina, citosina, timina e uracila. Incorreta. A uracila é uma base nitrogenada encontrada no RNA, não no DNA. No DNA, as bases são adenina, citosina, timina e guanina. B - O açúcar contido na molécula de DNA é a ribose. Incorreta. O açúcar no DNA é a desoxirribose, não a ribose. C - Em uma cadeia de DNA, os nucleotídeos se ligam aos açúcares e fosfatos por pontes de hidrogênio. Incorreta. Os nucleotídeos se ligam por ligações covalentes entre o açúcar de um nucleotídeo e o fosfato do próximo, não por pontes de hidrogênio. D - As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas. Correta. As fitas de DNA são unidas por pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas complementares (adenina com timina e guanina com citosina). E - Há complementaridade entre as bases nitrogenadas adenina e timina e entre guanina e uracila. Incorreta. A guanina se emparelha com a citosina, não com a uracila, que é uma base do RNA. Portanto, a alternativa correta é: D - As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas.

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ESTÁCIO

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Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas.
Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta.
A - A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa.
B - A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase.
C - Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios.
D - O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA.
E - A reação mostrada na etapa E demonstra a desnaturação da fita de mRNA.

A Biotecnologia utiliza conceitos das áreas da Biologia Molecular e da Genética Molecular, que têm uma ampla gama de técnicas, métodos e equipamentos específicos para cada objetivo.
Com relação à análise e identificação de material genético utilizando técnicas de biologia molecular, assinale a opção correta.
A - A eletroforese em gel de agarose é preferencialmente utilizada para separar fragmentos de DNA, como produtos de PCR.
B - Quando uma solução aquosa de DNA é aquecida até 100 °C ou exposta a um pH maior ou igual a 13, a hélice da molécula rapidamente se dissocia em duas fitas duplas.
C - Cromossomos inteiros não podem ser individualizados por meio de técnicas de Biologia Molecular.
D - Para análise de perfil genético, por exemplo, na Biologia forense, utiliza-se a tecnologia do DNA recombinante, ou por clonagem gênica.
E - A hibridação de sondas de DNA com RNAs celulares em uma qPCR permite determinar se um gene sofreu ou não uma mutação.

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) desempenha um papel fundamental na biologia molecular, possibilitando a amplificação seletiva de segmentos específicos de DNA.
Qual é a diferença central entre a PCR qualitativa e a PCR quantitativa (em tempo real)?
A - A PCR qualitativa requer ciclos adicionais para quantificar produto, enquanto a PCR quantitativa não necessita de revelação posterior.
B - A PCR quantitativa é mais rápida e não exige revelação posterior, enquanto a PCR qualitativa é mais lenta.
C - A PCR qualitativa ocorre em um termociclador especializado (tempo real), enquanto a PCR quantitativa utiliza um termociclador comum.
D - A PCR quantitativa é mais sensível na detecção de alvos específicos necessitando de amplificação em tempo real, enquanto a PCR qualitativa é mais rápida na amplificação.
E - A PCR qualitativa não requer amplificação do produto alvo, enquanto a PCR quantitativa quantifica a presença do alvo em tempo real.

SNPs são empregados amplamente para a identificação humana e possuem diferenças relevantes. A análise dos SNPs também pode estar associada aos fenótipos individuais, havendo uma possibilidade futura de identificação de traços físicos como, por exemplo, a cor da íris.
Os SNPs são:
A - Elementos repetitivos do genoma.
B - Sequências presentes somente no DNA mitocondrial.
C - Homozigotos.
D - Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA.
E - Heterozigotos.

No diagnóstico a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para prognóstico de tumores malignos.
A partir das informações apresentadas, conclui-se que:
A - Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha A do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra.
B - Aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência.
C - A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico.
D - A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra e no ciclo 40, para a amostra maior.
E - Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas (B), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral.

Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados.
Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta.
A - Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos.
B - O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas.
C - A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas fitas de polímero sintetizadas.
D - Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências simultaneamente.
E - Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações.

A principal função do PCR multiplex é permitir a detecção simultânea de múltiplos alvos de DNA em uma única reação. Qual é a principal função da técnica de PCR multiplex no diagnóstico de doenças genéticas?
A Amplificar regiões próximas de repetições de DNA.
B Identificar a presença de infecções virais.
C Determinar a estrutura tridimensional de proteínas.
D Avaliar a expressão gênica em diferentes tecidos.
E Detectar pequenas mutações em alelos distintos.

A importância primordial da sensibilidade da PCR transcende diversos cenários biomoleculares, incluindo diagnósticos clínicos, pesquisas genéticas e análises de patógenos.
Nesse contexto, qual é exatamente o conceito subjacente à sensibilidade da PCR?
A - Sensibilidade da PCR refere-se à capacidade de amplificar DNA em altas temperaturas, que facilita a detecção.
B - Sensibilidade da PCR representa a habilidade da enzima Taq polimerase em se ligar ao DNA-alvo.
C - Sensibilidade da PCR é a quantidade máxima de DNA que pode ser amplificada em uma reação.
D - Sensibilidade da PCR é a capacidade de detectar sinal do DNA-alvo em amostras contendo-o na realidade.
E - Sensibilidade da PCR é a velocidade com que os produtos de amplificação são gerados.

A curva padrão desempenha um papel essencial na quantificação absoluta de um DNA alvo em uma amostra.
Qual é a finalidade da curva padrão em quantificação absoluta de DNA alvo?
A - Determinar a temperatura ótima de amplificação do DNA alvo.
B - Calibrar a concentração de reagentes na reação de amplificação.
C - Estabelecer a linearidade e eficiência da amplificação para cálculos precisos.
D - Identificar a sequência específica do DNA alvo.
E - Avaliar a presença de contaminantes na amostra.